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Physiology of the exocrine pancreas in relation to protein utilization by the chinchilla Smith, Valerie Irene 1973

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c 1 P H Y S I O L O G Y OF THE E X O C R I N E P A N C R E A S IN R E L A T I O N TO P R O T E I N U T I L I Z A T I O N BY THE C H I N C H I L L A B Y V A L E R I E IRENE SMITH S c . ( A G R . ) U N I V E R S I T Y O F B R I T I S H C O L U M B I A , 1971 A T H E S I S S U B M I T T E D IN P A R T I A L F U L F I L M E N T OF THE R E Q U I R E M E N T S FOR THE DEGREE OF MASTER OF S C I E N C E I N T H E D E P A R T M E N T O F A N I M A L S C I E N C E WE A C C E P T T H I S T H E S I S A S C O N F O R M I N G T O T H E R E Q U I R E D S T A N D A R D THE U N I V E R S I T Y OF B R I T I S H COLUMBIA J U N E , 1973 In presenting t h i s " t h e s i s i n p a r t i a l f u l f i l m e n t of the requirements for an advanced degree at the University of B r i t i s h Columbia, I agree that the Library s h a l l make i t f r e e l y available for reference and. study. I further agree that permission for extensive copying of t h i s thesis for scholarly purposes may be granted by the Head of my Department or by h i s representatives. It i s understood that copying or publication of t h i s thesis for f i n a n c i a l gain s h a l l not be allowed without my written permission. Department of A n i m a l S c i e n c e The University of B r i t i s h Columbia Vancouver 8, Canada Date 25 , 1 973 A B S T R A C T P R O T E I N U T I L I Z A T I O N WAS I N V E S T I G A T E D I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O P O S T - W E A N I N G B Y S T U D Y I N G T H R E E I M P O R T A N T S T A G E S O F G R O W T H AN D N U T R I T I O N A L A D A P T A T I O N , O C C U R I N G A T B I R T H , W E A N I N G , A N D I N A D U L T L I F E . T H E F I R S T A R E A O F S T U D Y WAS C E N T E R E D ON T H E P R E - C O L O S T R A L C H I N C H I L L A , A P E R I O D W H I C H I N M A N Y S P E C I E S I S A C C O M P A N I E D B Y A B S O R P T I O N O F I N T A C T P R O T E I N S A N D I M M U N O G L O B U L I N S . I M M U N O G L O B U L I N S O F T H E B L O O D S E R A F R O M B I R T H T O P O S T - W E A N I N G W E R E Q U A N T I T A T E D B Y P O L Y A C R Y L A M I D E D I S C G E L E L E C T R O P H O R E S I S . T H E L E V E L S O F IMMUNO-G L O B U L I N S D I D N O T C O R R E L A T E W I T H P A N C R E A T I C E N Z Y M E OR I N H I B I T O R Y L E V E L S I N A N Y WAY S O A S T O SHOW A R E L A T I O N S H I P B E T W E E N I N H I B I T E D E N Z Y M E L E V E L S A N D T H E A M O U N T O F I M M U N O G L O B U L I N A B S O R B E D I N T O T H E B L O O D S T R E A M . T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N I N H I B I T O R S , A S S A Y E D S P E C T R O P H O T O M E T R I C A L L Y , W E R E N O T A P P R E C I A B L E I N T H E P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E F R O M T H E Y O U N G C H I N C H I L L A T E S T E D . T H E S T U D Y O F A D A P T A T I O N C A N B E B A S E D ON T H E A S S U M P T I O N T H A T A T D I F F E R E N T S T A G E S O F G R O W T H , T H E C H I N C H I L L A U T I L I Z E S T H E P R O T E I N S O F I T S D I E T T O D I F F E R E N T E X T E N T S . T H I S I S I N A C C O R D A N C E W I T H T H E C H A N G E I N L E V E L O F P R O T E I N B E T W E E N I T S F I R S T D I E T O F M A T E R N A L M I L K A N D T H E N I T S S E C O N D A R Y D I E T O F R O U G H A G E . IN O R D E R T O V E R I F Y T H I S A S S U M P T I O N , P A N C R E A T I C P R O T E A S E A C T I V I T Y , O F T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N , WAS S T U D I E D I N S E V E N T E E N C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O P O S T - W E A N I N G . -I H O M O G E N A T E S O F T H E P A N C R E A S , A S S A Y E D ~ S P E C T R O P H O T O M E T R I C A L L Y , W E R E U S E D T O M O N I T O R T H E E N Z Y M A T I C A C T I V I T Y . T H O U G H N O T S I G N I F I C A N T L Y D I F F E R E N T F O R T H E R E S P E C T I V E A G E G R O U P S , T R Y P S I N A N D . C H Y M O T R Y P S I N L E V E L S T E N D E D T O B E H I G H E S T A T B I R T H , D R O P P I N G A T A B O U T D A Y T H R E E T O D A Y E I G H T A N D T H E N R I S I N G S L I G H T L Y A T A B O U T S I X W E E K S O F A G E W H E R E T H E V A L U E S L E V E L L E D O F F . T H E T H I R D A R E A O F S T U D Y W A S T H E J U V E N I L E A N D A D U L T A D J U S T M E N T T O V A R I O U S R A T I O N S . | N T H I S C A S E , F I V E R A T I O N S V A R I E D I N P R O T E I N L E V E L S , R A N G I N G F R O M A L O W P R O T E I N L E V E L ( 1 1 . 2 $ ) T O A R E L A T I V E L Y H I G H P R O T E I N L E V E L ( 2 4 . 5 $ ) . P A N C R E A T I C T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N L E V E L S W E R E I N V E S T I G A T E D T O D E T E R M I N E I F P A N C R E A T I C P R O T E A S E W O U L D R E S P O N D T O T H E L E V E L O F P R O T E I N I N T H E D I E T . A G A I N , E N Z Y M E L E V E L S W E R E N O T S I G N I F I C A N T L Y D I F F E R E N T B E T W E E N D I E T S , B U T T H E R E W A S A T E N D E N C Y F O R T H E H I G H E R P R O T E I N D I E T S T O R E S U L T I N H I G H E R E N Z Y M E V A L U E S . T A B L E OF C O N T E N T S P A G E A B S T R A C T i L I S T OF T A B L E S v i L I S T OF F I G U R E S v i i L I S T OF A P P E N D I C E S v i i i ACKNOWLEDGEMENTS i x I N T R O D U C T I O N .' 1 L I T E R A T U R E REVIEW 3 A . S T R U C T U R E A N D D E V E L O P M E N T O F T H E E X O C R I N E P A N C R E A S . 3 B. T H E E N Z Y M E S O F T H E E X O C R I N E P A N C R E A S 4 1 . T R Y P S I N 4 2. C H Y M O T R Y P S I N 6 C . U L T I M A T E C O N T R O L S O F E N Z Y M E S Y N T H E S I S , S E C R E T I O N , I N A C T I V A T I O N A N D I N H I B I T I O N 7 1. T H E E F F E C T O F A G E O N P A N C R E A T I C P R O T E A S E A C T I V I T Y 7 2. T H E E F F E C T O F F E E D I N G R E G I M E N O N P A N C R E A T I C A C T I v I T Y 7 3 . T H E E F F E C T O F A M I N O A C I D S O N P A N C R E A T I C A C T I v I T Y 9 4 . T H E E F F E C T O F N A T U R A L I N H I B I T O R S O N P A N C R E A T I C A C T I V I T Y 10 D. P R O X I M A T E C O N T R O L S O F E N Z Y M E S E C R E T I O N ( R E F L E X , H O R M O N A L , H U M O R A L ) 10 M A T E R I A L S AND METHODS 14 A. E X P E R I M E N T 1. P R O T E A S E A C T I V I T Y A N D A B S O R P T I O N O F I M M U N O G L O B U L I N S B Y N E W B O R N C H I N C H I L L A 14 i I i P A G E 1. E X P E R I M E N T A L A N I M A L S 14 2. S E R U M I M M U N O G L O B U L I N S 14 3. T R Y P S I N I N H I B I T O R S 15 B. E X P E R I M E N T 2. D E V E L O P M E N T O F E N Z Y M E P R O F I L E F R O M B I R T H T O M A T U R I T Y 16 1. E X P E R I M E N T A L A N I M A L S 16 2. P R E P A R A T I O N O F P A N C R E A T I C T I S S U E F O R E N Z Y M E A S S A Y 16 3. S T A T I S T I C A L T R E A T M E N T 17 C. E X P E R I M E N T 3. R O L E O F P R O T E I N L E V E L O F D I E T O N E N Z Y M E P R O F I L E 17 1. E X P E R I M E N T A L A N I M A L S 17 2. P R E P A R A T I O N O F P A N C R E A T I C T I S S U E F O R E N Z Y M E A S S A Y 17 3. E X P E R I M E N T A L D E S I G N A N D S T A T I S T I C A L T R E A T M E N T S 18 D. B I O C H E M I C A L A N A L Y S E S F O R E X P E R I M E N T 2 A N D E X P E R I M E N T 3 18 1. H O M O G E N I Z A T I O N O F T H E P A N C R E A S 18 2. A C T I V A T I O N B Y E N T E R O K I N A S E 19 3. D E T E R M I N A T I O N O F P R O T E I N 19 4. A C T I V A T I O N O F E N Z Y M E S 20 5. E N Z Y M E A S S A Y S 20 A . T O T A L P R O T E A S E 20 B . T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N 21 R E S U L T S AND D I S C U S S I O N 23 A . P R O T E A S E A C T I V I T Y A N D A B S O R P T I O N O F I M M U N O G L O B U L I N S B Y N E W B O R N C H I N C H I L L A 23 1. I M M U N O G L O B U L I N A B S O R P T I O N 23 2. T R Y P S I N I N H I B I T O R S 28 B. D E V E L O P M E N T O F E N Z Y M E P R O F I L E F R O M B R I T H T O M A T U R I T Y 29 1 . R E S U L T S 29 2. D I S C U S S I O N 29 i v P A G E C . R O L E O F P R O T E I N L E V E L O F D I E T O N E N Z Y M E P R O F I L E . . . 42 1 . R E S U L T S 42 2. D I S C U S S I O N 42 SUMMARY AND C O N C L U S I O N S 55 B I B L I O G R A P H Y 57 A P P E N D I C E S 62 v L I S T OF T A B L E S T A B L E P A G E I . R O U T E S O F T R A N S M I S S I O N O F M A T E R N A L A N T I B O D Y I N V A R I O U S S P E C I E S 23 I I . P L A C E N T A L T Y P E S 27 v I L I S T OF F I G U R E S F I G U R E P A G E 1. F A C T O R S A F F E C T I N G P A N C R E A T I C P R O T E A S E S E C R E T I O N . . . . 12 2. R A N G E O F C H A N G E S I N L E V E L O F ^ - G L O B U L I N S I N S E R U M O F C H I N C H I L L A S F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S O F A G E 24 3. R E L A T I V E C H A N G E S I N T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S 30 4. R E L A T I V E C H A N G E S I N T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N F R O M T H E P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E O F T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S 32 5. R E L A T I V E C H A N G E S I N T H E R A T I O O F C H Y M O T R Y P S I N A N D T R Y P S I N W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S 34 6. R E L A T I V E C H A N G E S I N T O T A L P R O T E A S E A C T I V I T Y P E R M G . P R O T E I N I N P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S 36 7. R A N G E O F V A L U E S F O R T R Y P S I N U N I T S F R O M C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N 43 8. R A N G E O F V A L U E S F O R C H Y M O T R Y P S I N U N I T S F R O M C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N 45 9 . R A T I O C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N . R A N G E A N D A V E R A G E V A L U E S F R O M C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N 47 10. R A N G E O F V A L U E S F O R T O T A L P R O T E A S E A C T I V I T Y F R O M C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N 49 v I I L I S T OF A P P E N D I C E S A P P E N D I X P A G E 1. S E R U M P R O T E I N L E V E L S I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S 63 2. R E L A T I V E C H A N G E S I N T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S 64 3. T O T A L P R O T E A S E A C T I V I T Y A N D C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S 65 4. T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N U N I T S I N R E L A T I O N T O B O D Y W E I G H T I N C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N 66 5. T O T A L P R O T E A S E A N D C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N I N R E L A T I O N T O B O D Y W E I G H T O F C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N 67 6. P R O T E A S E A C T I V I T Y O F D I F F E R E N T S P E C I E S W I T H R E S P E C T T O % I M M U N O G L O B U L I N S A C Q U I R E D A F T E R B I R T H , P R O T E I N C O N T E N T O F T H E M I L K , A N D P H Y S I O L O G I C A L A G E A T B I R T H 68 7. E X A M P L E G R A P H T O I L L U S T R A T E L I N E A R I T Y O F R E G R E S S I O N L I N E F O R A N A L Y S I S O F D A T A F O R E X P E R I M E N T 3 70 VIM ACKNOWLEDGEMENTS I W I S H T O T H A N K D R . R. J . H U D S O N , A S S I S T A N T P R O F E S S O R O F A N I M A L S C I E N C E , A N D D R . W. D. K I T T S , P R O F E S S O R O F A N I M A L S C I E N C E A N D C H A I R M A N O F T H E D E P A R T M E N T O F A N I M A L S C I E N C E , F O R D I R E C T I O N A N D S U P P O R T I N T H I S S T U D Y . I A M A L S O V E R Y G R A T E F U L T O M R . G. L . K E R R F O R P R O V I D I N G D A T A U S E D I N P A R T S O F T H E S T A T I S T I C A L A N A L Y S E S , A N D M R . J . A. S H E L F O R D F O R I N V A L U A B L E L A B O R A T O R Y A S S I S T A N C E . I X I N T R O D U C T I O N T H E P O T E N T I A L O F A N A N I M A L F O R G R O W T H C A N N O T B E F U L L Y R E A L I Z E D U N L E S S T H E D I E T I T I S C O N S U M I N G P R O V I D E S A L L I T S P R O T E I N A N D E N E R G Y N E E D S . I N O R D E R T O U N D E R S T A N D N U T R I E N T R E Q U I R E M E N T S F O R A S P E C I F I C S P E C I E S O F A N I M A L , O N E S H O U L D B E A W A R E O F T H E - P H Y S I O L O G Y O F I T S D I G E S T I V E P R O C E S S E S . T H I S S T U D Y A T T E M P T S T O I N V E S T I G A T E T H E P H Y S I O L O G Y O F T H E C H I N C H I L L A E X O C R I N E P A N C R E A S I N R E L A T I O N T O P R O T E I N U T I L I Z A T I O N W I T H E M P H A S I S O N E L U C I D A T I N G W H A T M A J O R F A C T O R S A R E I N V O L V E D I N T H E S T I M U L A T I O N O F T H E P R O T E A S E S Y N T H E S I S A N D S E C R E A T I O N . G R O W T H O F T H E Y O U N G A N I M A L R E S U L T S I N C O R R E S P O N D I N G C H A N G E S I N T H E P H Y S I O L O G Y O F I T S D I G E S T I V E T R A C T . I N O R D E R T O A D A P T T O N A T U R A L C H A N G E S I N T H E D I E T , E N Z Y M E S Y S T E M S O F T H E A N I M A L , T O A C E R T A I N E X T E N T , M U S T B E R E S P O N S I V E T O T H E S E C H A N G E S . THE F I R S T P E R I O D O F M A R K E D C H A N G E I N P R O T E I N N U T R I T I O N O C C U R S A T B I R T H . THE Y O U N G A N I M A L D E P E N D S U P O N A B S O R P T I O N O F M A T E R N A L I M M U N O G L O B U L I N S F R O M T H E C O L O S T R U M . THE D I G E S T I V E T R A C T I S V E R Y P E R M E A B L E T O T H E S E L A R G E P R O T E I N S F O R A S H O R T P E R I O D O F T I M E A F T E R B I R T H . T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N W O U L D D E G R A D E T H E S E P R O T E I N S I F P R E S E N T I N L A R G E Q U A N T I T I E S W H E N T H E G U T I S M O S T R E C E P T I V E T O T H E M . S I M I L A R L Y , T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N I N H I B I T O R S P R E S E N T I N C O L O S T R U M O R I N T H E D I G E S T I V E T R A C T O F T H E C H I N C H I L L A W O U L D P R E V E N T T H E S E E N Z Y M E S F R O M D I G E S T I N G T H E I M M U N O G L O B U L I N S B Y C O M B I N I N G W I T H T H E E N Z Y M E S T H E M S E L V E S , Y O U N G C H I N C H I L L A S T A R T L I F E O N A M A T E R N A L M I L K D I E T , W H I C H I S 1 H I G H E R I N P R O T E I N T H A N T H E I R W E A N L I N G D I E T O F - R O U G H A G E . S I N C E I T W A S F O U N D T H A T T H E A C T I V I T I E S O F C E R T A I N C A R B O H Y D R A S E S I N C R E A S E W I T H A G E T O M E E T W I T H A N I N C R E A S I N G D E M A N D T O D I G E S T C A R B O H Y D R A T E S (45), A H Y P O T H E S I S W A S T E S T E D T O S E E I F A G E A N D / O R F E E D A N D F E E D I N G R E G I M E N W E R E M A J O R F A C T O R S I N T H E S T I M U L A T I O N O F P A N C R E A T I C D E V E L O P M E N T . AS W E L L A S M O N I T O R I N G P A N C R E A T I C P R O T E A S E D E V E L O P M E N T I N T H E G R O W I N G C H I N C H I L L A , A N A T T E M P T W A S M A D E T O T E S T T H E P R O P O S A L T H A T T H E P A N C R E A S O F T H E W E A N E D C H I N C H I L L A A D A P T S T O C H A N G E S I N P R O T E I N L E V E L O F T H E D I E T . W E A N E D C H I N C H I L L A W E R E F E D V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N I N T H E I R R A T I O N R A N G I N G F R O M A B O U T 11$ T O 24$ P R O T E I N A N D T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T I E S W E R E Q U A N T I T A T E D . T H E O B J E C T I V E S O F T H I S S T U D Y W E R E A S F O L L O W S : ( A ) T O I N V E S T I G A T E W H E T H E R I M M U N O G L O B U L I N A B S O R P T I O N W A S A F F E C T E D B Y P R O T E A S E L E V E L S ; ( B ) T O D E T E R M I N E W H E T H E R P A N C R E A T I C E N Z Y M E I N H I B I T O R S W E R E R E L A T E D T O T H E E N Z Y M E L E V E L S I N T H E D I F F E R E N T A G E G R O U P S ] ( C ) T O M E A S U R E T H E C H A N G E S I N P A N C R E A T I C P R O T E A S E L E V E L S W I T H G R O W T H O F T H E C H I N C H I L L A , A N D ( D ) T O D E T E R M I N E W H E T H E R O R N O T T H E FP;A:NC;R:B-:A(S3 W O U L D R E A C T T O A C H A N G E O F P R O T E I N L E V E L I N T H E D I E T . LITERATURE REVIEW A. S T R U C T U R E A N D D E V E L O P M E N T O F T H E E X O C R I N E P A N C R E A S T H E P A N C R E A S O F T H E H U M A N , D O G , A N D C A T C A N B E D E S C R I P T I V E L Y D I V I D E D I N T O T H E H E A D , B O D Y A N D T A I L ; T H E M O S T M A S S I V E P O R T I O N B E I N G T H E H E A D . | N T H E D O G A N D C A T T H E P A N C R E A S I S M O R E M O B I L E T H A N I N T H E H U M A N ; T H E U N C I N A T E P R O C E S S I S W E L L D E V E L O P E D A N D P A R A L L E L S T H E D E S C E N D I N G P O R T I O N O F T H E D U O D E N U M . IN T H E R A B B I T A N D A L S O I N S O M E R O D E N T S T H E P A N C R E A S I S R A T H E R D I F F U S E L Y D I S T R I B U T E D I N T H E M E S E N T E R Y O F T H E U P P E R I N T E S T I N E (51). T H E P R A N C R E A S I S A C O M P L E X G L A N D C O M P O S E D O F B O T H E X O C R I N E A N D E N D O C R I N E E L E M E N T S . T H E E X O C R I N E A S P E C T O F T H I S G L A N D I S T H E P E R T I N E N T T O P I C I N T H I S S T U D Y A N D A S H O R T S K E T C H W I L L B E G I V E N F R O M T H E R E V I E W B Y B E N C O S M E A N D L E C H A G O ( 4 ) . T H E E X O C R I N E P O R T I O N O F T H E P A N C R E A S I S R E P R E S E N T E D B Y A C O M P O U N D A C I N O U S G L A N D . T H E A C I N I C O N S I S T O F A S I N G L E R O W O F E P I T H E L I A L C E L L S T H A T R E S T O N A B A S A L M E M B R A N E A N D C O N V E R G E T O W A R D S A C E N T R A L L U M E N . A B R A N C H I N G S Y S T E M O F D U C T S C O M M U N I C A T E S T H E A C I N A R T I S S U E W I T H T H E L U M E N O F T H E D U O D E N U M . I N T E R S P E R S E D A M O N G T H E C O M P O N E N T S O F T H E E X O C R I N E T I S S U E A R E T H E E N D O C R I N E E L E M E N T S O F T H E P A N C R E A S , R E P R E S E N T E D B Y T H E I S L E T S O F L A N G E R H A N S . | N A D D I T I O N T O T H E E X O C R I N E D U C T S , T H E R E A R E O T H E R S M A L L D U C T U L E S T H A T A R I S E F R O M T H E L A R G E R D U C T S A N D A P P A R E N T L Y J O I N T H E E N D O C R I N E I S L E T S . T H E S E D U C T U L E S D O N O T A P P E A R T O C A R R Y A N Y S E C R E T I O N A N D P R O B A B L Y R E P R E S E N T U N D I F F E R E N T I A T E D E P I T H E L I U M . H I S T O L O G I C A L L Y , T H E A C I N A R C E L L S A R E C H A R A C T E R I Z E D B Y T H E P R E S E N C E O F A B U N D A N T R 0 U G H - S U R F A C E D E N D O P L A S M I C R E T I C U L U M A N D L A R G E Z Y M O G E N G R A N U L E S I N T H E I R C Y T O P L A S M J T H E I R A P I C A L S U R F A C E S P O S S E S S M I C R O V I L L I . T H E L U M E N O F T H E A C I N I I S C O N T I N U O U S W I T H T H A T O F S M A L L D U C T S L I N E D B Y C E N T R O A C I N A R C E L L S . T H E D I S T A L P O R T I O N O F T H E S M A L L D U C T S E X T E N D S I T S E L F I N T O T H E I N T R A L O B U L A R O R I N T E R C A L A T E D D U C T S , T H E L A T T E R A R E L I N E D B Y A C O L U M N A R E P I T H E L I U M I N W H I C H O C C A S I O N A L G O B L E T C E L L S A R E P R E S E N T A N D H A V E A M O D E R A T E L Y T H I C K W A L L O F D E N S E C O N N E C T I V E T I S S U E T H A T C O N T A I N S S O M E M U S C L E F I B R E S A N D N E R V E E L E M E N T S . T H E M A I N F U N C T I O N O F T H E L A R G E D U C T S I S T H E T R A N S P O R T O F T H E P A N C R E A T I C S E C R E T I O N F O R M E D B Y A C I N A R A N D P O S S I B L Y C E N T R O A C I N A R A N D D U C T A L C E L L S T O T H E D U O D E N U M . T H E M U C O U S L A Y E R T H A T L I N E S T H E L U M E N O F T H E S E D U C T S S E E M S T O A C T A S A P R O T E C T I V E B A R R I E R B E T W E E N T H E E N Z Y M E R I C H D U C T A L C O N T E C T S A N D T H E U N D E R L Y I N G P A R E N C H Y M A ( 4 ) . B. T H E E N Z Y M E S O F T H E E X O C R I N E P A N C R E A S P A N C R E A T I C J U I C E C O N T A I N S S E V E R A L E N Z Y M E S O F I M P O R T A N C E T O T H E D I G E S T I V E P R O C E S S . T H E S E I N C L U D E T R Y P S I N O G E N , C H Y M O T R Y P S I N O G E N , P R O C A R B O X Y P E P T I D A S E S , A L I P A S E , A N " ( - A M Y L A S E , M A L I J T A S E A N D R I B O N U C L E A S E ( 5 6 ) . T H E P R O T E A S E S W I T H W H I C H T H I S S T U D Y I S C O N C E R N E D , T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N , W I L L B E D I S C U S S E D . 1. T R Y P S I N . T H E P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E T R Y P S I N A N D I T S I N A C T I V E P R E C U R S O R , T R Y P S I N O G E N , W E R E F I R S T O B T A I N E D I N C R Y S T A L L I N E F O R M F R O M B O V I N E P A N C R E A T I C T I S S U E B Y N O R T H R O P A N D K U N I T Z ( 3 7 ) . T R Y P S I N O G E N ( M . W . = 2 4 , 5 0 0 ) I S T R A N S F O R M E D I N T O T R Y P S I N A S T H E R E S U L T O F T H E C L E A V A G E O F A S I N G L E P E P T I D E B O N D ( L Y S G - I L E Y ) N E A R T H E N~ T E R M I N U S O F T H E Z Y M O G E N , A N D T H E A P P E A R A N C E O F A C T I V I T Y I S A C C O M P A N I E D B Y C O N F O R M A T I O N A L C H A N G E S . THE A C T I V A T I O N P R O C E S S I S C A T A L Y S E D B Y A V A R I E T Y O F E N Z Y M E S I N C L U D I N G E N T E R 0 K I N A S E , M O L D P R O T E A S E S , A N D T R Y P S I N I T S E L F . THE L A T T E R A U T O C A T A L Y T I C P R O C E S S I S A C C E L E R A T E D B Y C A L C I U M I O N S W H I C H B I N D T O T H E N - T E R M I N A L R E G I O N O F T H E Z Y M O G E N A N D P R O M O T E T H E S P E C I F I C B O N D C L E A V A G E . A S T R I K I N G F E A T U R E O F T H E E N Z Y M E I S T H E N A R R O W S P E C I F I C I T Y O F I T S A C T I O N , W H I C H I S A L M O S T E X C L U S I V E L Y D I R E C T E D T O W A R D L - L Y S L A N D L - A R G I N I N Y L B O N D S O F P O L Y P E P T I D E S . B I O L O G I C A L L Y , T R Y P S I N S E R V E S A S T H E A C T I V A T O R O F A L L T H E O T H E R Z Y M O G E N O F P A N C R E A T I C T I S S U E . T H U S , T H E C O N T R O L O F T H E A C T I V A T I O N O F T R Y P S I N O G E N H A S B R O A D C O N S E Q U E N C E S I N T E R M S O F T H E F O R M A T I O N O F T H E E N D O P E P T I D A S E A N D E X O P E P T I D A S E C O M P O N E N T S O F P A N C R E A T I C J U I C E . T H E S U B S T R A T E S O F T R Y P S I N C A N B E D E S C R I B E D B Y T H E G E N E R A L F O R M U L A , R-CO-X,. W H E R E T H E N A R R O W S P E C I F I C I T Y O F T R Y P S I N I S D E T E R M I N E D B Y T H E A C Y L M O I T Y (R-CO-J. THE T Y P E O F B O N D C L E A V E D ( L . E . P E P T I D E , A M I D E O R E S T E R ) I S D E F I N E D B Y T H E N A T U R E O F X. T H E M O S T W I D E L Y U S E D A S S A Y S F O R T R Y P S I N F O L L O W T H E E S T E R A S E A C T I V I T Y T O W A R D B E N Z 0 Y L - L " A R G I N I N E E T H Y L E S T E R ( B A E E ) O R P - T O L U E N E S U L F O N Y L - L - A R G I N I N E M E T H Y L E S T E R ( T A M E ) B Y P O T E N T I O M E T R I C O R S P E C T R O P H O T O M E T R I C P R O C E D U R E S . TAME H A S G R E A T E R S E N S I T I V I T Y A N D G R E A T E R S E L E C T I V I T Y ( C H Y M O T R Y P S I N D O E S N O T H Y D R O L Y Z E TAME').' T H A N B A E E . T R Y P S I N I S S T A B L E A T P H 3 A N D L O W T E M P E R A T U R E S W H E R E I T C A N B E S T O R E D F O R W E E K S W I T H O U T L O S S O F A C T I V I T Y . THE A D D I T I O N O F C A L C I U M I O N S T O T R Y P S I N S O L U T I O N S R E T A R D S A U T O L Y S I S . T H I S S T A B I L I Z I N G E F F E C T I S A C C O M P A N I E D B Y A C O N F O R M A T I O N A L C H A N G E I N T H E T R Y P S I N M O L E C U L E , A P P A R E N T L Y I N D U C E D B Y C A L C I U M A N D R E S U L T I N G I N A M O R E C O M P A C T S T R U C T U R E A N I M P O R T A N T F E A T U R E O F T R Y P S I N I S I T S N A R R O W S P E C I F I C I T Y O F A C T I O N W H I C H R E N D E R S I T S U I T A B L E F O R S P E C I F I C C L E A V A G E A T L Y S Y L O R A R G I N Y L R E S I D U E S I N A M I N O A C I D S E Q U E N C E A N A L Y S I S . T H E S P E C I F I C I T Y O F T R Y P S I N I S D I R E C T E D T O W A R D L Y S L A N D A R G I N Y L R E S I D U E S I N N A T U R A L A N D S Y N T H E T I C S U B S T R A T E S , T H U S E X H I B I T I N G T H E M O S T R E S T R I C T E D S P E C I F I C I T Y O F A C T I O N O F T H E K N O W N E N D 0 P E P T I D A S E S (54). 2. C H Y M O T R Y P S I N . C H Y M O T R Y P S I N O G E N A (M.W. = 25,000) I S C O N V E R T E D T O A C T I V E E N Z Y M E A T PH 7.6 B Y T R Y P T I C C L E A V A G E O F T H E B O N D B E T W E E N AR G , , - A N D I 5 I L E .j g. IT A N D C H Y M O T R Y P S I N O G E N B, R E P R E S E N T 32fo O F T H E P R O T E I N C O N T E N T O F P A N C R E A T I C E X T R A C T S . D E P E N D E N T U P O N T H E C O N D I T I O N S , C H Y M O T R Y P S I N O G E N A M A Y B E A C T I V A T E D T O C C - , fr-, <J - , O R Tl -C H Y M O T R Y P S I N (59). C R U D E C H Y M O T R Y P S I N O G E N S O L U T I O N S ( A T PH 7.0-8.0) A R E R A P I D L Y A C T I V A T E D B Y A N E X T R A C T O F T H E S M A L L I N T E S T I N E ( E N T E R O K I N A S E ) , B U T C A N N O T B E A C T I V A T E D B Y S M A L L A M O U N T S O F T R Y P S I N , R E C R Y S T A L L I Z E D C H Y M O T R Y P S I N , H O W E V E R , C A N O N L Y B E A C T I V A T E D B Y T R Y P S I N . C H Y M O T R Y P S I N B I N D S O N E C A L C I U M I O N ( C A + + ) A N D T H E R E B Y ++ B E C O M E S S T A B I L I Z E D A G A I N S T D E N A T U R A T I O N . T H E P R E S E N C E O F T H E CA H A S N O E F F E C T O N T H E R A T E O F A C T I V A T I O N O F T H E Z Y M O G E N B Y T R Y P S I N (57). C H Y M O T R Y P S I N P R E F E R E N T I A L L Y C A T A L Y S E S T H E H Y D R O L Y S I S O F P E P T I D E B O N D S I N V O L V I N G T H E L - I S O M E R S O F T Y R O S I N E , P H E N Y L A L A N I N E A N D T R Y P T O P H A N E . T H E E N Z Y M E R E A D I L Y A C T S O N A M I D E S A N D E S T E R S O F S U S C E P T I B L E A M I N O A C I D S (59). C . U L T I M A T E C O N T R O L S O F E N Z Y M E S Y N T H E S I S , S E C R E T I O N ,  I N A C T I V A T I O N A N D I N H I B I T I O N 1. T H E E F F E C T O F A G E O N P A N C R E A T I C P R O T E A S E A C T I V I T Y . Y O U N G M A M M A L S O F M O S T S P E C I E S M A Y C H A N G E T H E C O M P O S I T I O N O F T H E F E E D S T U F F S T H E Y C O N S U M E D U R I N G E A R L Y L I F E . A M I L K D I E T , G R A D U A L L Y R E P L A C E D B Y A V E G E T A B L E O R M E A T D I E T , W O U L D R E Q U I R E C H A N G E S I N T H E C O N C E N T R A T I O N O F E N Z Y M E S I N T H E D I G E S T I V E T R A C T R E S P O N S I B L E F O R B R E A K I N G D O W N T H E S E N U T R I E N T S . R E S U L T S V A R Y F R O M A U T H O R T O A U T H O R A N D A L S O F R O M S P E C I E S T O S P E C I E S , A N D T H E R E F O R E , C A N B E C O N F L I C T I N G . IT H A S B E E N D E M O N S T R A T E D T H A T T H E P A N C R E A T I C S E C R E T I O N I N T H E B A B Y P I G I S H I G H L Y I R R E G U L A R A N D U N P R E D I C T A B L E W I T H R E S P E C T T O T H E P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S (23), H O W E V E R , C A R B O H Y D R A S E S H A V E B E E N Q U A N T I T A T E D (1, 25). P A N C R E A T I C P R O T E A S E S O F T H E C H I N C H I L L A A S Y E T H A V E N O T B E E N S T U D I E D . 2. T H E E F F E C T O F F E E D I N G R E G I M E N O N P A N C R E A T I C A C T I V I T Y . S E C R E T I O N O F P A N C R E A T I C J U I C E I S U N D E R B O T H N E U R A L A N D H O R M O N A L C O N T R O L . T H E P R E S E N C E O F L A R G E P O L Y P E P T I D E S O R A C I D I N T H E U P P E R D U O D E N U M R E S U L T S I N L I B E R A T I O N O F A H O R M O N E , S E C R E T I N , I N T O T H E C I R C U L A T I O N , R E S U L T I N G I N A U G M E N T E D F L O W O F P A N C R E A T I C J U I C E A N D , T O A L E S S E R E X T E N T , O F B I L E A N D I N T E S T I N A L J U I C E S . A S E C O N D I N T E S T I N A L H O R M O N E , P A N C R E O Z Y M I N , U N L I K E S E C R E T I N , S T I M U L A T E S S E C R E T I O N O F E N Z Y M E S B Y T H E P A N C R E A S (56). B Y L E T T . I N G A N I M A L S G O W I T H O U T F O O D B U T A D M I N I S T E R I N G W A T E R I T I S P O S S I B L E T O A L M O S T H A L T S E C R E T I O N B Y T H E P A N C R E A S . T H E F L O W O F P A N C R E A T I C J U I C E U N D E R C O N D I T I O N S O F S T A R V A T I O N VfA'R. ItEtS I N D I F F E R E N T S P E C I E S . 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F O R E X A M P L E , A M E A L R I C H I N F A T C A N R E S U L T I N T H E J U I C E B E I N G V E R Y R I C H I N P R O T E I N (2). P A N C R E A T I C A N D I N T E S T I N A L P R O T E A S E S A R E R E S P O N S I B L E F O R C A R R Y I N G O U T T H E D I G E S T I O N O F B O T H E X O G E N O U S A N D E N D O G E N O U S P R O T E I N . T H E R E F O R E , P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S E C R E T I O N M U S T C O N T I N U E E V E N W H E N D I E T S D E V O I D O F P R O T E I N A R E F E D . L I K E W I S E , P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S E C R E T I O N M U S T B E I N C R E A S E D W H E N P R O T E I N I S F E D T O C O M P E N S A T E F O R T H E I N C R E A S E I N T H E L O A D O F D I G E S T I O N . T H E R E I S A M P L E E V I D E N C E I N T H E L I T E R A T U R E T O S U P P O R T T H E C O N C L U S I O N T H A T T H E E X O C R I N E E N Z Y M E S O F T H E P A N C R E A S O F M O S T S P E C I E S A D A P T T O T H E C O M P O S I T I O N O F T H E D I E T . THE E F F E C T O F F E E D I N G R E G I M E N O N T H E D E V E L O P M E N T O F E N Z Y M E A C T I V I T Y I N T H E W E A N E D , G R O W I N G C H I N C H I L L A H A S N O T B E E N S T U D I E D E X T E N S I V E L Y . S M I T H (45) S H O W E D T H A T P A N C R E A T I C A M Y L A S E I N C R E A S E D S T E A D I L Y I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O M A T U R I T Y , H O W E V E R , T H E E F F E C T S O F V A R I O U S D I E T S W E R E N O T S T U D I E D . A D A P T I O N O F T H E E X O C R I N E P A N C R E A S T O C H A N G E S I N T H E A M O U N T O F P R O T E I N I N T H E D I E T H A S N O T B E E N S T U D I E D I N T H E C H I N C H I L L A T O D A T E . 9 3. T H E E F F E C T O F A M I N O A C I D S O N P A N C R E A T I C A C T I V I T Y . L Y M A N A N D W I L C O X (32) O B S E R V E D T H A T E S S E N T I A L A M I N O A C I D D E F I C I E N C I E S L O W E R E D T H E E N Z Y M E C O N T E N T O F T H E R A T P A N C R E A S W I T H C E R T A I N E N Z Y M E S B E I N G A F F E C T E D M O R E B Y O N E D E F I C I E N C Y T H A N O T H E R S , V E G H E L Y I _ E T _ A L . (52) S H O W E D T H A T T H E P A N C R E A T I C G L A N D S O F R A T S F E D M E T H I O N I N E - D E F I C I E N T D I E T S F O R F O U R W E E K S C O N T A I N E D N O R M A L A M O U N T S O F A M Y L A S E , R E D U C E D A M O U N T S O F C H Y M O T R Y P S I N A N D N O T R Y P S I N . N L A G E E A N D A N D E R S O N (33) C O N C L U D E D T H A T P A N C R E A T I C S E C R E T I O N I S M O R E D E P E N D E N T O N D U O D E N A L S T I M U L A T I O N T H A N I T I S U P O N T H E C O M P L E T E N E S S O F T H E P R O T E I N . E A T E N W I T H I N L I M I T S S H O R T , P R E S U M A B L Y , O F E X T R E M E I N A N I T I O N . M A G E E A N D H O N G (34) D E M O N S T R A T E D T H A T C O M P A R E D W I T H C O N T R O L S , I S O L E U C I N E , M E T H I O N I N E , P H E N Y L A L A N I N E , L Y S I N E O R T R Y P T O P H A N E S U P P L E M E N T S D I D N O T I N C R E A S E A M Y L A S E . M E T H I O N I N E I N C R E A S E D L I P A S E A N D P R O T E A S E A C T I V I T Y A N D P H E N Y L A L A N I N E A N D I S O L E U C I N E I N C R E A S E D P R O T E A S E A C T I V I T Y A L O N E . R A T S F E D A L O W - P R O T E I N D I E T C O N T A I N I N G A D D I T I O N A L . V A L I N E H A D H I G H E R P A N C R E A T I C A N D P R O T E O L Y T I C A C T I V I T Y I N T H E R E S T I N G P A N C R E A S T H A N C O N T R O L S F E D T H E S A M E L O W - P R O T E I N D I E T (33). 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P R O X I M A T E C O N T R O L S OF ENZYME S E C R E T I O N ( R E F L E X ,  HORMONAL, HUMORAL) A C O N S I D E R A T I O N OF T H E P O S S I B L E M E C H A N I S M S OF E N Z Y M A T I C A D A P T A T I O N TO T H E MAJOR C O N S T I T U E N T OF T H E D I E T S U G G E S T S T H R E E P O S S I B I L I T I E S : (1) A R E F L E X S E C R E T O R Y MECHANISM IN.WHICH I N C R E A S E D P R O T E I N IN T H E I N T E S T I N E WOULD R E F L E X L Y S T I M U L A T E T H E P R O D U C T I O N OF T R Y P S I N O G E N ; (2) A H O R M O N E M E C H A N I S M I N W H I C H I N C R E A S E D P R O T E I N I N T H E I N T E S T I N E W O U L D C A U S E A H O R M O N E T O B E F O R M E D W H I C H W O U L D S P E C I F I C A L L Y E X C I T E T R Y P S I N O G E N F O R M A T I O N ; A N D (3) A H U M O R A L M E C H A N I S M I N W H I C H T H E D I G E S T E D P R O D U C T S O F P R O T E I N I N T H E B L O O D S T R E A M W O U L D E X C I T E T H E F O R M A T I O N O F T R Y P S I N O G E N . 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P R O T E O S E , I S T H E S T I M U L U S . | N T H E C A S E O F A M Y L A S E A H U M O R A L M E C H A N I S M I S F U R T H E R I N D I C A T E D B Y T H E R E P R E S S I O N O F A M Y L A S E P R O D U C E D B Y M A I N T A I N I N G T H E B L O O D S U G A R A T A H Y P O N O R M A L L E V E L B Y M E A N S O F P R O T A M I N E Z I N C I N S U L I N (15). H A R P E R A N D V A S S (17) O B S E R V E D T H A T I N C A T S T H E I N J E C T I O N O F F O O D S T U F F S I N T O T H E D U O D E N U M R E S U L T E D I N A N I N C R E A S E I N E N Z Y M E O U T P U T B Y T H E P A N C R E A S E V E N W H E N A L L T H E E X T R I N S I C N E R V E S T O T H E S M A L L I N T E S T I N E H A D B E E N C U T . S U B S T I T U T I O N O F C A S E I N H Y D R O L Y S A T E F O R C A S E I N I N A B A L A N C E D D I E T P R O D U C E S A D E P R E S S I O N O F T R Y P S I N C O N T E N T O F T H E P A N C R E A T I C T I S S U E . F I G U R E 1. 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S E R U M F R O M S E V E N T E E N C H I N C H I L L A , S P E C I E S C H I N C H I L L A L A N I G E R A , H O U S E D A T T H E U N I V E R S I T Y O F B R I T I S H C O L U M B I A C H I N C H I L L A U N I T W A S A N A L Y S E D F O R C H A N G E S I N G A M M A - G L 0 B U L I N S ( I M M U N O G L O B U L I N S ) A N D A L B U M I N . T W O A N I M A L S W E R E S A C R I F I C E D A T E A C H T I M E I N T E R V A L O F S A M P L I N G : A T B I R T H , T H R E E D A Y S , E I G H T D A Y S , T W O W E E K S , S I X W E E K S , E I G H T W E E K S , T E N W E E K S , T W E L V E W E E K S , A N D A D U L T . T H E A N I M A L S W E R E E U T H A N I Z E D B Y A N I N T R A P E R I T O N I A L I N J E C T I O N O F O N E T O T W O M I L L I L I T R E S O F S U C C I N Y L C H O L I N E C H L O R I D E , D E P E N D I N G O N T H E S I Z E O F T H E C H I N C H I L L A . 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B L O O D S E R U M S A M P L E S A N D P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E S F R O M T H E F I V E Y O U N G C H I N C H I L L A ( 1 - D A Y T O 3 - D A Y S O F A G E ) F R O M T H E A B O V E E X P E R I M E N T A N D E X P E R I M E N T 2 R E S P E C T I V E L Y W E R E I N V E S T I G A T E D F O R T H E P R E S E N C E O F T R Y P S I N I N H I B I T O R . THE M E T H O D O F F R I T Z , H A R T W I C H A N D W E R L E ( 1 1 ) W A S F O L L O W E D E X A C T L Y U S I N G T H E S Y N T H E T I C S U B S T R A T E ° C - N - B E N Z 0 Y L - D L -A R G I N I N E - P - N I T R O A N I L I D E ( B A P N A ) . THE S U B S T R A T E S O L U T I O N W A S P R E P A R E D B Y D I S S O L V I N G 1 M G BAPNA P E R M L D I S T I L L E D W A T E R A T 1 0 0 ° C . T H E E N Z Y M E S O L U T I O N S W E R E P R E P A R E D B Y D I S S O L V I N G 1 M G O F T R Y P S I N P E R M L O F 0 . 0 0 1 M H C L . D I L U T I O N S T O 0 . 5 A N D 0 . 1 M G P E R M L W E R E M A D E . T H E E N Z Y M E S T A N D A R D S O L U T I O N S W E R E T H E N K E P T A T 4 ° C U N T I L U S E D ; 0 . 2 M T R I S - H C L B U F F E R , PH 7 . 8 ( 2 2 ° C ) , W A S U S E D F O R T H E D E T E R M I N A T I O N S . M E A S U R E M E N T S W E R E P E R F O R M E D A T 3 0 ° C B Y F I R S T M I X I N G 0 . 0 2 5 T O 0 . 1 0 0 M L O F T H E S A M P L E W I T H B U F F E R I N A G L A S S C U V E T T E A N D T H E N A D D I N G 0 . 0 5 0 T O 0 . 1 0 0 M L O F T H E E N Z Y M E S O L U T I O N ( 0 . 5 O R 0 .1 M G P E R M L ) . T H E V O L U M E W A S A D J U S T E D T O A F I N A L V O L U M E O F 2 . 0 M L W I T H B U F F E R S O L U T I O N A N D I N C U B A T E D A T 3 0 ° C F O R 3 M I N U T E S . T H E E N Z Y M E R E A C T I O N W A S S T A R T E D B Y A D D I N G 1 . 0 M L O F S U B S T R A T E ( 3 0 ° C ) . T H E R E L E A S E O F P - N I T R O A N I L I N E W A S T H E N R E G I S T E R E D A T 4 0 5 N M F O R 2 M I N U T E S . B. E X P E R I M E N T 2 . D E V E L O P M E N T O F E N Z Y M E P R O F I L E F R O M B I R T H T O  M A T U R I T Y 1. E X P E R I M E N T A L A N I M A L S . D A T A W E R E O B T A I N E D F R O M T H E S A M E S E V E N T E E N C H I N C H I L L A , S P E C I E S C H I N C H I L L A L A N I G E R A , U S E D I N E X P E R I M E N T 1. T H E A N I M A L S W E R E F E D A C O M M E R C I A L C H I N C H I L L A R A T I O N T H R O U G H O U T T H E D U R A T I O N O F T H E E X P E R I M E N T A N D ill H E Y O U N G W E R E N A T U R A L L Y W E A N E D . 2. P R E P A R A T I O N O F P A N C R E A T I C T I S S U E F O R E N Z Y M E A S S A Y . A F T E R W E I G H I N G T H E C A R C A S S , T H E P A N C R E A S W A S Q U I C K L Y D I S S E C T E D O U T A N D P L A C E D I N A W E I G H I N G D I S H O N C R U S H E D I C E . T H E P A N C R E A S W A S R I N S E D W I T H I C E - C O L D , 0 . 1 5 M N A C L A N D D I S S E C T E D F R E E O F A D H E R R I N G F A T . ( P A N C R E A T I C T I S S U E C A N B E D I S T I N G U I S H E D F R O M F A T T I S S U E S I N C E , W H E N C O O L E D O N ( I X E , T H E F A T T I S S U E T A K E S O N A C H A R A C T E R I S T I C A L L Y L I G H T E R C O L O R T H A N T H E M O R E P I N K C O L O R O F T H E P A N C R E A T I C T I S S U E . ) THE P A N C R E A S W A S T H E N P L A C E D I N A V I A L , S E A L E D A N D F R O Z E N A T - 2 0 ° C U N T I L A N A L Y S E D . THE L U N G S , H E A R T , S P L E E N , A D R E N A L S , L I V E R A N D K I D N E Y S W E R E A L S O D I S S E C T E D O U T A N D W E I G H E D F O R A G R O W T H C H A R T . ( U S I N G I N T E S T I N A L C O N T E N T S F O R E N Z Y M E A S S A Y S F O R A B S O L U T E T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N V A L U E S W O U L D N O T B E A S V A L I D A S U S I N G P A N C R E A T I C T I S S U E E X T R A C T S . P E L O T A N D G R O S S M A N ( 4 0 ) F O U N D T H A T C H Y M O T R Y P S I N I S I N A C T I V A T E D M O R E R A P I D L Y T H A N T R Y P S I N I N T H E R A T I N T E S T I N E , T H E R E F O R E , E N Z Y M A T I C R A T I O S W O U L D N O T B E R E L I A B L E . US I N G T I S S U E E X T R A C T S A L L O W S O N E T O M E A S U R E M A X I M U M T R Y P S I N O R C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T Y I N V I T R O B E F O R E I N A C T I V A T I 0 N , O R P R O T E O L Y S I S , B E G I N S . ) 3. S T A T I S T I C A L T R E A T M E N T . P R O T E A S E L E V E L S F O R T H E D I F F E R E N T A G E G R O U P S W E R E A N A L Y S E D B Y T H E L E A S T S Q U A R E S M E T H O D (19). I N D E P E N D E N T V A R I A B L E S U S E D W E R E A G E , S E X , A N D B O D Y W E I G H T . D E P E N D E N T V A R I A B L E S U S E D W E R E MG P R O T E I N / M L H O M O G E N A T E , MG N U C L E I C A C I D / M L H O M O G E N A T E , T R Y P S I N U N I T S , C H Y M O -T R Y P S I N U N I T S , T R Y P S I N U N I T S / B O D Y W E I G H T , C H Y M O T R Y P S I N U N I T S / B O D Y W E I G H T , T O T A L P R O T E A S E A C T I V I T Y , T O T A L P R O T E A S E A C T I V I T Y / B O D Y W E I G H T , C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N / B O D Y W E I G H T . C. E X P E R I M E N T 3. R O L E O F P R O T E I N L E V E L O F D I E T O N E N Z Y M E P R O F I L E 1. E X P E R I M E N T A L A N I M A L S . D A T A W E R E C O L L E C T E D F R O M S I X T E E N Y O U N G A D U L T C H I N C H I L L A , S P E C I E S C H I N C H I L L A L A N I G E R A , W H I C H W E R E C O L L E C T E D F R O M V A R I O U S F A R M S I N T H E V I C I N I T Y A N D T H E N H O U S E D A T T H E U N I V E R S I T Y O F B R I T I S H C O L U M B I A C H I N C H I L L A U N I T . T H E A N I M A L S W E R E D I V I D E D I N T O F I V E G R O U P S A N D F E D D I E T S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N . T H E D I F F E R E N T P R O T E I N L E V E L S W E R E 11.2$, 12.6$, 18.4$, 21.0$ A N O 24.5$. T H E A N I M A L S W E R E E T H E R I Z E D , W E I G H E D A N D T H E N K I L L E D B Y C E R V I C A L D I S L O C A T I O N . 2. P R E P A R A T I O N O F P A N C R E A T I C T I S S U E F O R E N Z Y M E A S S A Y . T H E P A N C R E A S W A S I M M E D I A T E L Y D I S S E C T E D O U T , R I N S E D I N I C E - C O L D 0.15 M N A C L , P L A C E D ON I C E A N D D I S S E C T E D F R E E O F F A T . A F T E R P L A C I N G I N A V I A L , T H E P A N C R E A S WAS F R O Z E N I N C C ^ - ME O H A N D S T O R E D A T -20°C U N T I L A N A L Y S E D . 3. E X P E R I M E N T A L D E S I G N A N D S T A T I S T I C A L T R E A T M E N T S . T H E L E A S T S Q U A R E S M E T H O D O F A N A L Y S I S O F D A T A W A S C A R R I E D O U T F O R T H E T H I R D E X P E R I M E N T F O R D I F F E R E N T L E V E L S O F P R O T E I N I N T H E D I E T . D E P E N D E N T V A R I A B L E S W E R E T H E S A M E A S F O R E X P E R I M E N T 2 E X C E P T I N O N E C A S E W H E R E T H E R E W E R E N O C O V A R I A B L E S U S E D A N D O N L Y D I E T W A S U S E D A S T H E M A I N E F F E C T . IN T H E O T H E R C A S E , B O D Y W E I G H T , S E X , F E E D I N T A K E , A N D I N I T I A L W E I G H T W E R E U S E D A S C O V A R I A B L E S . A S I M P L E L I N E A R R E G R E S S I O N W A S A L S O C O N D U C T E D O N T H E T H I R D E X P E R I M E N T U S I N G T H E A B O V E D E P E N D E N T V A R I A B L E S P L U S B I O L O G I C A L V A L U E , N I T R O G E N D I G E S T I O N , N E T P R O T E I N U T I L I Z A T I O N , N I T R O G E N R E T E N T I O N , G A I N A N D F I N A L B O D Y W E I G H T . D. B I O C H E M I C A L A N A L Y S E S F O R E X P E R I M E N T 2 A N D E X P E R I M E N T 3 1. H O M O G E N I Z A T I O N O F T H E P A N C R E A S . T H E P A N C R E A S W A S H O M O G E N I Z E D W I T H A M O R T A R A N D P E S T L E W I T H A B O U T O N E G R A M O F W A S H E D , I G N I T E D S E A S A N D A N D A B O U T 5 M L O F 0.15 M N A C L . T H E M O R T A R A N D P E S T L E A N D N A C L S O L U T I O N W E R E C O O L E D O N I C E B E F O R E U S E . ( T R I T O N X-100 W A S N O T U S E D W I T H T H E N A C L S O L U T I O N S I N C E I T S H O W E D A P E A K O N T H E S P E C T R O P H O T O M E T E R 800 W H I C H I N T E R F E R E D W I T H T H E D E T E R M I N A T I O N O F T H E A M O U N T O F P R O T E I N S H O W N P E R S A M P L E . T H O U G H I T I S P R E S U M E D T O L Y S E T H E Z Y M O G E N G R A N U L E S A N D S H O W A P P R O X I M A T E L Y 30$ I N C R E A S E D A C T I V I T Y I N T H E H O M O G E N A T E (12), I T S A D D I T I O N W A S N O T N E C E S S A R Y S I N C E T H I S S T U D Y W A S C O M P A R I N G O N L Y R E L A T I V E A N D N O T A B S O L U T E E N Z Y M E V A L U E S . ) T H E H O M O G E N A T E W A S T H E N C E N T R I F U G E D A T 7,000 R P M . F O R 15 M I N U T E S T O O B T A I N A R E L A T I V E L Y C L E A R S U P E R N A T A N T , T H E S U P E R N A T A N T W A S T H E N U S E D O R R E F R O Z E N U N T I L R E Q U I R E D F O R A N A L Y S I S . R E F R E E Z I N G H A D N O E F F E C T O N E N Z Y M E A C T I V I T Y . IN S O M E C A S E S I N C R E A S E D A C T I V I T Y F O L L O W E D P R E S U M A B L Y D U E T O L Y S I N G O F T H E Z Y M O G E N G R A N U L E S (12). 2. A C T I V A T I O N B Y E N T E R O K I N A S E . T H E E N T E R O K I N A S E S O L U T I O N W A S P R E P A R E D M A I N L Y B Y T H E M E T H O D O F G O R R I L L A N D T H O M A S (12). T E C H N I C A L G R A D E E N T E R O K I N A S E W A S P R E P A R E D I N 0.1 M T R I S - H C L B U F F E R , P H 7.2, C O N T A I N I N G 0.1 M C A C L £ . ( M A X I M U M A C T I V I T Y A N D S T A B I L I T Y O F B O T H T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N A R E E N H A N C E D B Y C AC L g . I T A L S O P R E V E N T S T R Y P S I N F R O M B E I N G C O N V E R T E D I I I N T O T H E N O N - A C T I V E F O R M (12). I T W A S P R E - I N C U B A T E D A T 37°C I N A W A T E R B A T H F O R 30 M I N U T E S A N D T H E N C E N T R I F U G E D A T 5,000 R P M . F O R 15 M ' L N U T E S T O R E M O V E S O L I D M A T E R I A L . T H I S S T O C K S O L U T I O N C O U L D T H E N B E S T O R E D F O R A B O U T O N E W E E K A T 4°C . 3. D E T E R M I N A T I O N O F P R O T E I N S . T H E A M O U N T O F P R O T E I N I N T H E P A N C R E A T I C S A M P L E W A S D E T E R M I N E D S P E C T R 0 P H 0 T 0 M E T R I C A L L Y B Y T H E M E T H O D O F W A R B U R G A N D C H R I S T I A N (55). THE P R E S E N C E O F T I Y R O S I N E A N D T R Y P T O P H A N I N P P R O T E I N S R E S U L T S I N A S T R O N G A B S O R P T I O N I N T H E R E G I O N O F 280 M / J . N U C L E I C A C I D S A L S O A B S O R B L I G H T I N T H I S R E G I O N B U T H A V E A S T R O N G E R A B S O R P T I O N I N T H E R E G I O N O F 260 M ; U . THE E N Z Y M E S A M P L E W A S D I L U T E D W I T H S U F F I C I E N T 0.15 M N A C L T O O B T A I N O P T I C A L D E N S I T Y R E A D I N G S O N T H E S P E C . 800. R E A D I N G S W E R E T H E N T A K E N A T 280 M/U A N D 260 M / J . T H E R A T I O 280M/U/260M^ I S T H E W A R B U R G C O R R E C T I O N F A C T O R U S E D I N T H E E Q U A T I O N : 280MXJ/260MW X 280MJU X D I L U T I O N F A C T O R = M G . P R O T E I N / M L . T O C A L C U L A T E T H E M I L L I G R A M S O F P R O T E I N P R E S E N T P E R M I L L I L I T R E O F S U P E R N A T A N T . 4. A C T I V A T I O N O F E N Z Y M E S . A C T I V A T I O N O F T H E P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S O F T H E P A N C R E A S W A S C A R R I E D O U T B Y M I X I N G E Q U A L V O L U M E S O F P A N C R E A S S U P E R N A T A N T A N D T H E 1 $ E N T E R O K I N A S E S T O C K S O L U T I O N . D E P E N D I N G U P O N T H E A M O U N T O F P R O T E I N P R E S E N T I N T H E S A M P L E , T H E M I X T U R E W A S I N C U B A T E D F O R A B O U T 5 T O 6 H O U R S F O R T R Y P S I N A N D 3 T O 4 H O U R S F O R C H Y M O T R Y P S I N ( O R U N T I L M A X I M U M A C T I V A T I O N ) A T 3 7 ° C I N A W A T E R B A T H . THE T R Y P S I N S A M P L E C O N T A I N E D F R O M A B O U T 1 T O 4 M G P R O T E I N / M L O F I N C U B A T I O N M I X T U R E . THE C H Y M O -T R Y P S I N S A M P L E C O N T A I N E D L E S S P R O T E I N T H A N T H E T R Y P S I N M I X T U R E , A B O U T 0 . 5 T O 1 . 5 M G / M L I N C U B A T I O N M I X T U R E . 5. E N Z Y M E A S S A Y S . ( A ) T O T A L P R O T E A S E . - - T O T A L P R O T E O L Y T I C A C T I V I T Y O F T H E P A N C R E A T I C H 0 M 0 G E N A T E S W A S M E A S U R E D B Y T H E R E L E A S E O F T R I C H L O R O A C E T I C ( T C A ) S O L U B L E P R O D U C T S D U R I N G T H E H Y D R O L Y S I S O F C A S E I N B Y T R Y P S I N ( 4 2 ) . T H E C A S E I N W A S A C I D - P R E C I P I T A T E D , S E M I - P U R I F I E D . T H E T Y R O S I N E A N D T R Y P T O P H A N C O N T E N T O F T H E S E E N D P R O D U C T S W A S D E T E R M I N E D B Y T H E M E A S U R E M E N T O F T H E O P T I C A L D E N S I T Y A T 2 8 0 M / J . T H E B L A N K W A S P R E P A R E D B Y A D D I N G 3 M L S . O F 5 $ TCA T O 1 M L O F T H E S U B S T R A T E S O L U T I O N ( C A S E I N D I S S O L V E D I N 0 .1 M P H O S P H A T E B U F F E R E D S A L I N E ( P B S ) T O 1 M G P E R M L , PH 7 . 6 ) . A F T E R S H A K I N G O N A V O R T E X - J R . 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A F T E R S T A N D I N G A T R O O M T E M P E R A T U R E F O R A T L E A S T 3 0 M I N U T E S T H E S A M P L E S W E R E F I L T E R E D T H R O U G H W H A T M A N #2 F I L T E R P A P E R A N D R E A D O N A S P E C . 8 0 0 . T H E O P T I C A L D E N S I T Y O F T H E E X P E R I M E N T A L T U B E A F T E R S U B T R A C T I O N O F T H E B L A N K W A S U S E D T O C A L C U L A T E T H E E N Z Y M E A C T I V I T Y . A C T I V I T Y W A S E X P R E S S E D A S C H A N G E I N A B S O R B A N C E P E R M G O F P A N C R E A T I C P R O T E I N . AN A V E R A G E O F A T L E A S T T H R E E V A L U E S W A S U S E D . 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T H E R A T E O F H Y D R O L Y S I S O F TAME I S M E A S U R E D B Y T H E I N C R E A S E I N A B S O R B A N C Y A T 2 4 7 M / U , B A S E D O N T H E M E T H O D O F H U M M E L ( 2 4 ) . S U B S T R A T E ( 0 . 3 M L O F 0 . 0 1 M TAME) A N D B U F F E R ( 2 . 6 M L S T R I S , 0 . 0 4 6 M, PH 8 . 1 , C O N T A I N I N G 0 . 0 1 1 5 M C A C L 2 ) W E R E P I P E T T E D I N T O A G L A S S V I A L A N D T H E N T A K E N U P I N T O A 3 M L S Y R I N G E . AT Z E R O T I M E , 0 .1 M L O F T H E A C T I V A T E D E N Z Y M E S O L U T I O N W A S P I P E T T E D I N T O A O N E C M D I A M E T E R S I L I C A C U V E T T E A N D T H E S U B S T R A T E A N D B U F F E R A D D E D . ( T H E F O R C E O F T H E S Y R I N G E M I X E D . T H E S A M P L E A D E Q U A T E L Y . T H E B L A N K W A S P R E P A R E D T H E S A M E W A Y E X C E P T 0 .1 M L O F 0 . 0 0 1 N H C L W A S S U B S T I T U T E D F O R T H E 0.1 M L O F E N Z Y M E . A B S O R P T I O N W A S T A K E N F O R A B O U T 10 M I N U T E S O N A S P E C . 800. | F A S T R A I G H T L I N E W A S N O T O B T A I N E D F O R A T L E A S T 3 M I N U T E S T H E A C T I V A T E D E N Z Y M E S O L U T I O N W A S D I L U T E D W I T H 0.15 N N A C L . A C T I V I T Y W A S M E A S U R E D A S C H A N G E I N A B S O R B A N C Y / M I N U T E / M G . P R O T E I N , U S I N G T H E E Q U A T I O N : / A ? A 7 P E R M I N . X 1000 X 3 M L . U N I T S / M G . P R O T E I N = *540 x M G . P R O T E I N I N C U V E T T E C H Y M O T R Y P S I N P R E F E R E N T I A L L Y C A T A L Y S E S T H E H Y D R O L Y S I S O F P E P T I D E B O N D S I N V O L V I N G T H E L - I S O M E R S O F T Y R O S I N E , P H E N Y L A L A N I N E A N D T R Y P T O P H A N . T H E R A T E O F H Y D R O L Y S I S O F BTEE I S D E T E R M I N E D F R O M T H E C H A N G E I N A B S O R B A N C Y A T 256 M U A C C O R D I N G T O H U M M E L (24). S U B S T R A T E (1.4 M L O F 0.00107 M BTEE I N 50$ M E T H A N O L ) A N D B U F F E R (1.5 M L O F 0.08 M T R I S , 0.1 M C A C L 2 , P H 7.8) W E R E P R E P A R E D A S F O R T R Y P S I N . A T Z E R O T I M E , 0.1 M L A C T I V A T E D E N Z Y M E S O L U T I O N W A S P I P E T T E D I N T O T H E C U V E T T E A N D T H E S A M E P R O C E D U R E W A S F O L L O W E D A S F O R T R Y P S I N . A C T I V I T Y W A S M E A S U R E D A S C H A N G E I N A B S O R B A N C Y P E R M I N U T E P E R M G P R O T E I N U S I N G T H E E Q U A T I O N : / A 2 5 6 / M I N . x 1000 x 3 M L . U N I T S / M G P R O T E I N = ' **964 X M G . P R O T E I N I N C U V E T T E *540 E Q U A L S T H E M O L A R A B S O R B A N C Y I N D E X O F TAME A T T H A T W A V E L E N G T H . **964 E Q U A L S M O L A R E X T I N C T I O N C O E F F I C I E N T F O R BTEE. R E S U L T S AND D I S C U S S I O N A. P R O T E A S E A C T I V I T Y A N D A B S O R P T I O N O F I M M U N O G L O B U L I N B Y  N E W B O R N C H I N C H I L L A 1. I M M U N O G L O B U L I N A B S O R P T I O N . T H E E L E C T R O P H O R E T I C P R O F I L E O F T H E B L O O D S E R A S A M P L E S W A S R E L A T I V E L Y C O N S T A N T O V E R T H E T I M E P E R I O D S T U D I E D ( F L G . 2 A N D A P P E N D I X l ) . A L B U M I N L E V E L S W E R E U N I F O R M L Y H I G H A N D I M M U N O G L O B U L I N L E V E L S W E ' R E C O N S T A N T E X C E P T F O R A S L I G H T D R O P A T O N E W E E K O F A G E A N D A G A I N A T E I G H T W E E K S O F A G E . T H E S E C O N S T A N T L E V E L S O F I M M U N O G L O B U L I N S C O U L D B E E X P L A I N E D B Y T H E F A C T T H A T T H E C O L O S T R U M O F T H E R O D E N T I S N O T T H E M A J O R P A T H W A Y O F A N T I B O D Y T R A N S F E R F R O M T H E M O T H E R T O T H E Y O U N G ( 1 0 ) ( T A B L E l ) . R O U T E S O F T R A N S M I S S I O N O F M A T E R N A L A N T I B O D Y I N V A R I O U S S P E C I E S T A B L E I S P E C i E S R O U T E O F T R A N S M I S S I O N H O R S E , C O W , S H E E P , P I G D O G R A T , M O U S E R A B B I T , G U I N E A P I G , B I R D S M A N , M O N K E Y C O L O S T R A L - I N T E S T I N A L P L A C E N T A L A N D C O L O S T R A L - I N T E S T I N A L Y O L K S A C A N D C O L O S T R A L - I N T E S T I N A L Y O L K S A C P L A C E N T A L * S O L O M A N (49). 23 24 F I G U R E 2. R A N G E or C H A N G E S I N L E V E L S O F ^ - G L O B U L I N S I N S E R U M O F C H I N C H I L L A S F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S O F A G E . L E V E L S W E R E N O T L O W A T B I R T H A N D H I G H E R T H E R E A F T E R W H E N A B S O R P T I O N F R O M C O L O S T R U M C O U L D H A V E O C C U R R E D A S I T W O U L D H A V E B E E N I N O T H E R S P E C I E S S U C H A S B O V I N E , O V I N E O R P O R C I N E . N E W B O R N L A M B S U S U A L L Y H A V E L I T T L E O R N O I M M U N O G L O B U L I N I N T H E I R S E R A B U T A R E A B L E T O A B S O R B I T I N T A C T A C R O S S T H E I N T E S T I N E F R O M T H E L A R G E A M O U N T S , P R E D O M I N A N T L Y O F I G G . | , I N T H E E W E S C O L O S T R U M (6). G U T P E R M E A B I L I T Y U S U A L L Y L A S T S U N T I L T H E E N D O F T H E F I R S T O R S E C O N D D A Y , B U T M A Y B E E X T E N D E O I F T H E L A M B I S S T A R V E D F O R A T I M E B E F O R E I T S F I R S T F E E D (28). T H E N A T U R E O F T H E P L A C E N T A T I O N O F S O M E A N I M A L S , C A T T L E , G O A T , S H E E P , P I G A N D H O R S E , M A Y P R E V E N T T H E T R A N S F E R O F M A T E R N A L I M M U N E B O D I E S I N T O T H E F E T A L C I R C U L A T I O N , W H I L E , F O R E X A M P L E I N H U M A N S , A P R E N A T A L T R A N S M I S S I O N O F P A S S I V E I M M U N I T Y T A K E S P L A C E (10). 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I F T H E R E I S A C O R R E L A T I O N B E T W E E N T H E A M O U N T O F I M M U N O G L O B U L I N A B S O R B E D B Y T H E N E W B O R N C H I N C H I L L A A N D T H E P R E S E N C E A N D A M O U N T O F P A N C R E A T I C P R O T E A S E S P R O D U C E D , A R E D U C E D A M O U N T O F P A N C R E A T I C P R O T E A S E W O U L D P R E S U M A B L Y F A C I L I T A T E A B S O R P T I O N O F T H E L A R G E P R O T E I N M O L E C U L E S I N T A C T . T R A N S F E R E N C E M O S T L I K E L Y W O U L D D E P E N D U P O N Y O L K - S A C T R A N S F E R A S I N T H E R A B B I T A N D G U I N E A P I G S I N C E T H E G E S T A T I O N P E R I O D O F T H E C H I N C H I L L A I S M O R E T H E I R L E N G T H T H A N T H A T OF T H E R A T OR M O U S E . S O L O M A N (49) N O T E S T H A T I T I S S I G N I F I C A N T T H A T A N I M A L S S U C H A S T H E M O U S E AND R A T B O R N A F T E R S H O R T P E R I O D S OF G E S T A T I O N H A V E A P R O L O N G E D P O S T - N A T A L P E R I O D OF I N T E S T I N A L A B S O R P T I O N OF M A T E R N A L A N T I B O D I E S F R O M T H E C O L O S T R U M W H E R E A S I N T E S T I N A L A B S O R P T I O N IN A R T I O D A C T Y L A I S L I M I T E D TO A D A Y OR S O A F l T E R B I R T H AND I N P R I M A T E S D O E S NOT O C C U R TO A N Y S I G N I F I C A N T E X T E N T . T A B L E I I* P L A C E N T A L T Y P E S No. L A Y E R S S P E C I E S M A T E R N A L T I S S U E S F E T A L T l S S U E S H O R S E , C A T T L E , R A B B 1 T , S W I N E S H E E P R A T , G U I N E A P I G 3 2 0 1 3 3 O R 2 * W l N D L E ( 5 8 ) . DO C O N D I T I O N S W I T H I N T H E S T O M A C H AND I N T E S T I N E P E R M I T O R A L L Y I N G E S T E D G A M M A - G L O B U L I N S TO R E M A I N I N T A C T I N T H E C H I N C H I L L A I F T H I S I S T H E R O U T E OF T R A N S F E R ON W H I C H I T RE L Y S ? H l L L (20) N O T E D T H A T I N S P E C I E S S U C H A S T H E R A T , T H E R E I S A D E F I C I E N C Y OF P E P S I N O G E N I N T H E P E P T I C C E L L S U N T I L F I F T E E N D A Y S A F T E R B I R T H M A K I N G T H E L A C K OF E N Z Y M E S AND H I G H PH U N R E L I A B L E F O R D I G E S T I O N O F T H E M A T E R N A L A N T I B O D I E S . L E C C E E_T _ A L . (29) T H O U G H T I T P O S S I B L E T H A T A H O R M O N E I N T H E M I L K M A Y S T I M U L A T E I M P E R M E A B I L I T Y O F T H E I N T E S T I N A L W A L L A F T E R 24-36 H O U R S S I N C E T H E Y F O U N D T H A T S T A R V E D N E W - B O R N P I G L E T S C A N A B S O R B A N T I B O D I E S F O R A L O N G E R P E R I O D O F T I M E T H A N T H E U N S T A R V E D . 2. T R Y P S I N I N H I B I T O R S . T R Y P S I N I N H I B I T O R S F R O M T H E P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E S O F T H E Y O U N G C H I N C H I L L A W E R E N O T L A R G E E N O U G H T O B E S I G N I F I C A N T L Y D E T E C T E D . T H I S C O U L D A G A I N B E E X P L A I N E D B Y T H E N A T U R E O F A N T I B O D Y T R A N S F E R ; T H E Y O L K S A C A L L O W S F R E E T R A N S F E R O F M A T E R N A L A N T I B O D I E S T O T H E P R E N A T A L A N I M A L T H E R E B Y R E D U C I N G T H E I M P O R T A N C E O F T H E C O L O S T R A L I M M U N O G L O B U L I N T R A N S F E R S Y S T E M . I N O T H E R M A M M A L S , S U C H A S C A T T L E A N D P I G S , T H E T R Y P S I N I N H I B I T O R P R E S E N T I N C O L O S T R U M F U R T H E R I N C R E A S E S T H E E F F E C T I V E N E S S O F T H I S S Y S T E M B Y R E D U C I N G D I G E S T I O N O F P R O T E I N S I N T H E G U T L U M E N (35, 36). | N H U M A N C O L O S T R U M T H E C O N T E N T O F T H E T R Y P S I N I N H I B I T O R I S M U C H L O W E R T H A N I N T H E C A S E O F O T H E R M A M M A L S . T H I S C A N B E E X P L A I N E D B Y D I F F E R E N T P A T H W A Y S O F A N T I B O D Y T R A N S F E R ; P R E D O M I N A N T L Y V I A T H E P L A C E N T A I N M A N A N D V I A C O L O S T R U M I N O T H E R M A M M A L S (44). T H E C O L O S T R U M T R Y P S I N I N H I B I T O R I S M O R E O V E R P R O B A B L Y A B S O R B E D V I A T H E I N T E S T I N A L E P I T H E L I U M I N T O T H E B L O O D , A N D I N T H I S W A Y R E D U C E S T H E C A T A B O L I S M O F T H E P R O T E I N S I N T H E S E R U M . S L I G H T I N H I B I T I O N W A S D E T E C T E D I N O N E O F T H E T H R E E - D A Y C H I N C H I L L A B L O O D S E R U M S A M P L E S . T H E I N C R E A S I N G T R Y P S I N I N H I B I T I N G C A P A C I T Y O F S E R U M D U R I N G T H E F I R S T W E E K A F T E R B I R T H M U S T B E O F G R E A T I M P O R T A N C E E S P E C I A L L Y F O R T H E I M M U N E S Y S T E M , S I N C E T H E P A S S I V E L Y T R A N S F E R R E D C O L O S T R A L I M M U N O G L O B U L I N S A R E P R O T E C T E D F R O M C A T A B O L I S M . T H I S M E C H A N I S M M A Y T H U S S E R V E T O O V E R R I D E T H E L A G P E R I O D E X I S T I N G B E F O R E T H E S Y N T H E S I S O F I M M U N O G L O B U L I N S S T A R T S D E N O V O I N T H E N E W B O R N (5). B. D E V E L O P M E N T o r E N Z Y M E P R O F I L E F R O M B I R T H T O M A T U R I T Y 1 . R E S U L T S . I N T H E S E C O N D E X P E R I M E N T , P R O T E A S E L E V E L S W E R E N O T S T A T I S T I C A L L Y S I G N I F I C A N T L Y D I F F E R E N T F O R A N Y O F T H E A G E G R O U P S S T U D I E D . T R Y P S I N U N I T S / M G P R O T E I N / G M B O D Y W E I G H T W E R E H I G H A T 0 D A Y S O F A G E , D R O P P E D R A P I D L Y A T 3 D A Y S O F A G E , R O S E S L I G H T L Y A T 8 D A Y S A N D T H E N C O N T I N U E D T O D E C L I N E O V E R T H E P E R I O D T E S T E D . C H Y M O T R Y P S I N U N I T S / M G P R O T E I N / G M B O D Y W E I G H T F O L L O W E D A S I M I L A R P A T T E R N A S T R Y P S I N E X C E P T T O T A L A M O U N T S W E R E L E S S T H A N F O R T R Y P S I N ( F l G . 3 A N D A P P E N D I X 2 ) . T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N U N I T S / M G P R O T E I N , C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N , C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N / G M B O D Y W E I G H T , A N D T O T A L P R O T E A S E / M G H O M O G E N A T E S H O W E D S I M I L A R P A T T E R N S T O T H E A B O V E E X C E P T A S L I G H T D R O P O C C U R R E D A T T H E E I G H T T O T E N W E E K P E R I O D ( F l G S . 4, 5, 6 A N D A P P E N D I C E S 2 A N D 3 ) . T H E R E W A S N O S E X E F F E C T F O R T H E P R O T E A S E L E V E L S . R A T I O S O F C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N / G M B O D Y W E I G H T W E R E S I G N I F I C A N T ( P *= 0 . 0 5 ) F O R T H E A G E G R O U P S S T U D I E D ( F I G . 5 ) . M I L L I G R A M S O F P R O T E I N / M L H O M O G E N A T E W E R E S I G N I F I C A N T ( P < 0 . 0 1 ) F O R B O D Y W E I G H T . 2 . D I S C U S S I O N . V A R I O U S A U T H O R S F O U N D T H A T I N T H E Y O U N G P I G P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S I N C R E A S E W I T H A D V A N C I N G A G E D U R I N G T H E P O S T P A R T U M P E R I O D S S T U D I E D ( 3 0 , 3 9 ) . W A L K E R ( 5 3 ) , W H O P R I M A R I L Y F O U N D C H A N G E S I N T H E C A R B O H Y D R A S E S O F Y O U N G L A M B S A N D P I G S , A L S O S H O W E D D I F F E R E N C E S I N C O N C E N T R A T I O N S O F C E R T A I N P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S . 30 • F I G U R E 3. R E L A T I V E C H A N G E S I N T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S . ( T R Y P S I N U N I T S / M G P R O T E I N / G M B O D Y W E I G H T C H Y M O T R Y P S I N U N I T S / M G P R O T E I N / G M B O D Y W E I G H T - - - - - - . ) 31 32 F I G U R E 4. R E L A T I V E C H A N G E S I N T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N F R O M T H E P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E O F T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S . ( T R Y P S I N U N I T S / M G P R O T E I N F R O M P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E = C H Y M O T R Y P S I N U N I T S / M G P R O T E I N F R O M P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E = - - - - - - - - ) 34 F I G U R E 5. R E L A T I V E C H A N G E S I N T H E R A T I O O F C H Y M O T R Y P S I N A N D T R Y P S I N W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S . ( C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N - - - - - - -C H Y M O T R Y P S i N : T R Y P S i N / K G B O D Y W E I G H T 35 C H : T / B . W . . C H : T 36 F I G U R E 6. R E L A T I V E C H A N G E S I N T O T A L P R O T E A S E A C T I V I T Y P E R M G P R O T E I N I N P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S . ( T O T A L P R O T E A S E / M G P R O T E I N I N P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E T O T A L P R O T E A S E / M G P R O T E I N / K G B O D Y W E I G H T - - - - - - . ) 10 12 T I M E ( W E E K S ) to A D R O P I N P R O T E A S E A C T I V I T Y W A S N O T E D A T A B O U T E I G H T T O T E N W E E K S O F A G E I N T H E C H I N C H I L L A ( F L G S . 3, 5, 6). S I M I L A R L Y , H A R T M A N _ E T _ A L . (18) N O T E D T H A T C H A N G E O F D I E T ( W E A N I N G ) I N Y O U N G P I G S C A U S E D A D E P R E S S I O N I N E N Z Y M E S E C R E T I O N W H I C H W A S S U B S E Q U E N T L Y R E G A I N E D . P R O T E A S E A C T I V I T Y F R O M T H E I N T E S T I N E I N C R E A S E D F R O M B I R T H T O A M A X I M U M A T A B O U T S E V E N W E E K S . D E C R E A S E D E N Z Y M E L E V E L S W E R E N O T E D I N S O M E I N S T A N C E S I N T H E E I G H T - W E E K - O L D A N I M A L S I N D I C A T I N G T H A T T H E M A T U R E P I G D O E S N O T H A V E H I G H E R L E V E L S O F C E R T A I N D I G E S T I V E E N Z Y M E S I N T H E G A S T R 0 - I N T E S T I N A L T R A C T T H A N D O E S T H E O N E - T O - T W O M O N T H O L D P I G . E N Z Y M A T I C A S P E C T S O F D I G E S T I O N A R E C O R R E L A T E D , P A R T L Y , W I T H P O O R E R U T I L I Z A T I O N O F P L A N T P R O T E I N S T H A N M I L K P R O T E I N S B Y T H E N E O N A T A L A N I M A L . H O W E V E R , T H I S D O E S N O T S E R V E C O M P L E T E L Y T O E L U C I D A T E T H E R E A S O N S F O R B E T T E R U T I L I Z A T I O N O F C E R T A I N > R O T E I N S B Y T H E O L D E R A N I M A L T H A N B Y T H E . 0 N E - M O N T H - 0 L D A N I M A L . P A N C R E A T I C P R O T E A S E L E V E L S W E R E F O U N D T O B E H I G H E S T A T B I R T H I N T H E C H I N C H I L L A . | N C O N T R A S T , O T H E R A U T H O R S F O U N D E N Z Y M E L E V E L S T O B E L O W E S T A T B I R T H O R O N E D A Y A G E . H U B E R _ E T _ A L . (22) R E P O R T E D T H A T I N C A L V E S P A N C R E A T I C A M Y L A S E , L I P A S E A N D P R O T E A S E A C T I V I T Y W E R E L O W E S T A T O N E D A Y , I N C R E A S E D D U R I N G T H E F I R S T W E E K , A N D C H A N G E D L I T T L E T H E R E A F T E R . T H E Y A L S O C O N C L U D E D T H A T D I E T A P P A R E N T L Y E X E R T E D N O M A J O R E F F E C T O N L E V E L S O F A N Y O F T H E D I G E S T I V E E N Z Y M E S . H O W A R D A N D Y U D K I N (2(1)), W O R K I N G W I T H R A T S , F O U N D A M U C H G R E A T E R I N C R E A S E W I T H A G E I N A M Y L A S E A C T I V I T Y T H A N T H A T O F T R Y P S I N , A N D R A P I D C H A N G E I N T R Y P S I N A C T I V I T Y W I T H D I E T A R Y C H A N G E C O M P A R E D W I T H T H E M U C H S L O W E R C H A N G E I N A M Y L A S E A C T I V I T Y . E M B R Y O N I C E X T R A C T S O F D I G E S T I V E G L A N D T I S S U E S F R O M T H E B A B Y P I G S H O W E D I N C R E A S E D C O N C E N T R A T I O N O F P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S . O T H E R E N Z Y M E S , P A R T I C U L A R L Y L A C T A S E , W E R E F O U N D T O D E C R E A S E I N C O N C E N T R A T I O N W I T H A D V A N C I N G A G E D U R I N G E A R L Y P O S T P A R T U M P E R I O D S (39). G O R R I L L _E_T _ A L . (13) C O M P A R E D T H E P R O T E O L Y T I C A C T I V I T Y I N S M A L L I N T E S T I N A L C O N T E N T S F R O M R U M I N A N T S A N D N 0 N - R U M I N A N T S O F D I F F E R E N T A G E S . T H E Y F O U N D T H A T T R Y P S I N A C T I V I T Y R E M A I N E D F A I R L Y C O N S T A N T I N R A T D I G E S T A F R O M O N E T O N I N E M O N T H S O F A G E , B U T C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T Y D E C L I N E D . L E S S C H Y M O T R Y P S I N T H A N T R Y P S I N A C T I V I T Y W A S R E T A I N E D D U R I N G I N C U B A T I O N O F T H E D I G E S T A . R A T I O S O F C H Y M O T R Y P S I N - T O - T R Y P S I N A C T I V I T I E S R A N G E D F R O M 0.6 T O 0.8 I N T H E B O V I N E A N D O V I N E D I G E S T A , A N D F R O M 0 . 9 6 T O 2 . 4 6 I N T H E R A T D I G E S T A . L E V E L S O F P R O T E A S E I N T H E P A N C R E A S O F T H E C H I N C H I L L A A G R E E P A R T I A L L Y W I T H T H E A B O V E W O R K E R S . T R Y P S I N A C T I V I T Y R E M A I N E D F A I R L Y C O N S T A N T ( N O T S I G N I F I C A N T L Y D I F F E R E N T ) . I N T H I S E X P E R I M E N T , C H Y M O T R Y P S I N V A L U E S W E R E A L S O L O W E R T H A N T R Y P S I N V A L U E S , B U T T H E Y W E R E P A R A L L E L . S N O O K _E_T _ A J _ . ( 4 7 ) S T U D I E D T H E C H A N G E S I N T H E P A N C R E A T I C C O N T E N T O F RNA, DNA, A M Y L A S E , C H Y M 0 T R Y P S I N O G E N , T R Y P S I N O G E N A N D L I P A S E I N R A T S B E T W E E N 0 D A Y S A N D 2 8 D A Y S O F A G E . T H E R A T S W E R E W E A N E D A T 21 D A Y S O F A G E . T H E Y F O U N D T H A T P A N C R E A S W E I G H T , RNA, A N D DNA I N C R E A S E D S L O W L Y D U R I N G T H E F I R S T F O U R T E E N D A Y S A N D A T A N A C C E L E R A T E D R A T E T H E R E A F T E R . C H Y M O T R Y P S I N O G E N A N D A M Y L A S E B U T N O T T R Y P S I N O G E N A N D L I P A S E W E R E H I G H A T B I R T H B U T F E L L D R A M A T I C A L L Y A F T E R O N E D A Y . ( C H I N C H I L L A C H Y M O T R Y P S I N L E V E L S F E L L A F T E R O N E D A Y O F A G E B U T T R Y P S I N L E V E L S A L S O D E C L I N E D . ) T H E Y F O U N D T H A T E N Z Y M E L E V E L S I N C R E A S E D W I T H P A N C R E A S S I Z E D U R I N G T H E L A S T T W O W E E K S O F T H E N U R S I N G P E R I O D A L T H O U G H E N Z Y M E C O N C E N T R A T I O N A L S O A P P E A R E D T O I N C R E A S E A F T E R F O U R T E E N D A Y S . S I N C E R A T M I L K H A S A H I G H F A T / L O W C A R B O H Y D R A T E C O N T E N T , T H E A U T H O R S O F T H I S S T U D Y L O O K E D A T T H E E F F E C T O F C A R B O H Y D R A T E O N P A N C R E A S D E V E L O P M E N T A N D E N Z Y M E S Y N T H E S I S I N T H E N E O N A T A L A N D Y O U N G A D U L T R A T S . T H E Y F O U N D T H A T W H E N A C C E S S T O T H E M A T E R N A L D I E T W A S P R E V E N T E D A N D T H E N U R S I N G P E R I O D W A S P R O L O N G E D , A M Y L A S E C O N C E N T R A T I O N A N D T H E O T H E R T H R E E E N Z Y M E S W E R E E L E V A T E D . T H E S A M E E F F E C T W A S N O T E D I N A D U L T R A T S F E D I S O C A L 0 R I C , I S O N I T R O G E N O U S M E A L S WliTiH A T O T A L F A T : C A R B O H Y D R A T E R A T I O E X C E E D I N G 50$. P R E L I M I N A R Y S T U D I E S I N D I C A T E D T H A T G L U C O S E S U P P L E M E N T A T I O N H A D L I T T L E E F F E C T O N P A N C R E A S D E V E L O P -M E N T O R E N Z Y M E S Y N T H E S I S I N R A T S Y O U N G E R T H A N F O U R T E E N D A Y S . S C H I N G O E T H E _ E T _ A L . (43) M A D E A C O M P A R I S O N O F S I Z E A N D P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E A C T I V I T Y O F T H E P A N C R E A S O F S E V E R A L S P E C I E S O F V E R T E B R A T E A N I M A L S . T H E Y F O U N D T H A T P A N C R E A S S I Z E P E R K I L O G R A M O F L I V E B O D Y W E I G H T WAS G R E A T E R F O R T H E N O N - R U M I N A N T T H A N F O R T H E R U M I N A N T . IN C A T T L E , C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T Y P E R U N I T O F P A N C R E A S D R Y M A T T E R W A S H I G H E S T I N T H E N E W B O R N C A L F , D R O P P E D T O O N E - H A L F T H E L E V E L W I T H I N O N E W E E K A F T E R B I R T H , A N D T H E N I N C R E A S E D O N L Y S L I G H T L Y W I T H A G E U P T O O N E Y E A R . T H E R A T I O S O F C H Y M O T R Y P S I N T O T R Y P S I N A C T I V I T I E S I N T H E P A N C R E A S R A N G E D F R O M 0.39 T O 1.20 I N T H E R U M I N A N T S , E X C E P T F O R T H E N E W B O R N C A L F (1.60), A N D W E R E G R E A T E R T H A N 2.0 F O R T H E O T H E R S P E C I E S . A L L A G E G R O U P S O F C A T T L E H A D A B O U T T H E S A M E P A N C R E A S S I Z E A N D E N Z Y M E A C T I V I T I E S P E R K I L O G R A M B O D Y W E I G H T , B U T S O M E V A R I A T I O N S W E R E O B S E R V E D . C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T Y V A R I E S M O R E T H A N E I T H E R P A N C R E A S S I Z E O R T R Y P S I N A C T I V I T Y . C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T Y W A S H I G H E R 41 I N T H E N E W B O R N C A L F , D R O P P E D R A P I D L Y B Y O N E W E E K O F A G E , A N D T H E N I N C R E A S E D A F T E R T W O M O N T H S O F A G E . P A N C R E A T I C T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T I E S I N S H E E P I N C R E A S E D W I T H A G E . F E M A L E R A T S , M I C E A N D C A T T L E H A D L A R G E R P A N C R E A S E S T H A N R E S P E C T I V E M A L E S . T H E R E W A S N O S E X E F F E C T W I T H I N S P E C I E S O N T R Y P S I N A C T I V I T Y P E R U N I T W E I G H T O F P A N C R E A S . O N L Y I N S O M E A G E G R O U P S D I D F E M A L E C A T T L E H A V E A S I G N I F I C A N T L Y G R E A T E R C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T Y A N D C H Y M O T R Y P S I N T O T R Y P S I N R A T I O T H A N D I D T H E M A L E S . T H E S E A U T H O R S T H O U G H T T H A T T H E H I G H C H Y M O T R Y P S I N A C T I V I T Y I N T H E O N E - D A Y - O L D C A L F M A Y B E A R E F L E C T I O N O F T H E P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E R E S P O N S E T O ILL H EL P R E N A T A L N U T R I T I O N A L E N V I R O N M E N T O R T O C O L O S T R U M . P O N D _ E T _ A L . (41) O B S E R V E D T H A T P A N C R E A T I C W E I G H T I N C R E A S E D S I X - F O L D F R O M B I R T H T O T W E N T Y - T H R E E D A Y S . O F A G E I N P I G S . T H E Y N O T E D T H A T C H Y M O T R Y P S I N O G E N P E R G R A M O F P A N C R E A S D E C L I N E D S L I G H T L Y F R O M B I R T H T O T W E N T Y - T H R E E D A Y S B U T T O T A L A C T I V I T Y P E R P A N C R E A S I N C R E A S E D T H R E E - F O L D . T R Y P S I N O G E N A C T I V I T Y P E R G R A M O F P A N C R E A S I N C R E A S E D T H R E E - F O L D A N D T O T A L A C T I V I T Y I N C R E A S E D T W E N T Y - F O L D . T E R N O U T H EJ_ _ A L_. (50) O B S E R V E D T H A T P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S A P P E A R E D T O B E S E C R E T E D A T R E L A T I V E L Y H I G H R A T E S W I T H I N T H E F I R S T D A Y S O F L I F E A N D S U B S E Q U E N T C H A N G E S W E R E S M A L L , W H E R E A S T H E Q U A N T I T I E S O F N O N - P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E S S E C R E T E D I N C R E A S E D R A P I D L Y W I T H A G E . L E B A S _ E T _ A L . ( 2 7 ) D E M O N S T R A T E D T H A T T H E G R O W T H R A T E O F T H E P A N C R E A S O F R A B B I T S T O B E L O W E R T H A N T H A T O F T H E A N I M A L U P T O D A Y F O U R T E E N A N D P A R A L L E L T O I T A F T E R T H A T A G E . T H E V A R I O U S E N Z Y M E S I N V E S T I G A T E D W E R E P R E S E N T F R O M B I R T H . T H E Y O B S E R V E D A M A R K E D I N C R E A S E I N L I P A S E , A M Y L A S E A N D C H Y M O T R Y P S I N T O T A L A C T I V I T I E S F R O M D A Y 24 O N ; W H E R E A S T R Y P S I N T O T A L A C T I V I T Y R E M A I N E D C O N S T A N T T H R O U G H -O U T iii H E R A N G E O F T H E E X P E R I M E N T . C . R O L E O F P R O T E I N L E V E L O F D I E T O N E N Z Y M E P R O F I L E 1 . R E S U L T S . | N T H E T H I R D E X P E R I M E N T , T H O U G H T H E R E W A S A T E N D E N C Y F O R T H E H I G H E R P R O T E I N D I E T S T O G I V E H I G H E R P R O T E A S E A C T I V I T I E S , P R O T E A S E A C T I V I T Y W A S N O T S I G N I F I C A N T L Y D I F F E R E N T F O R E A C H D I E T . R E S U L T S A R E G I V E N I N F I G U R E S 7, 8, 9 A N D 10 A N D A P P E N D I C E S 4 A N D 5. | N T H E A N A L Y S I S B Y R E G R E S S I O N , N O N E O F T H E V A R I A B L E S W E R E C O R R E L A T E D E X C E P T C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N A N D G A I N W H I C H O N L Y A P P R O A C H E D S I G N I F I C A N C E ( P «=0.05) W I T H A N F - V A L U E O F 0.0741 . ( A P P E N D I X U S I N G T H E L E A S T S Q U A R E S M E T H O D O F A N A L Y S I S W I T H D I E T A S T H E M A I N E F F E C T A N D B O D Y W E I G H T , S E X , F E E D I N T A K E A N D I N I T I A L W E I G H T A S C O V A R I A B L E S ( I N O T H E R W O R D S , U S I N G E A C H A N I M A L A S I T S O W N C O N S T A N T ) D I D N O T R E S U L T I N S I G N I F I C A N T F - V A L U E S F O R D I E T . BY D E L E T I N G T H E C O V A R I A B L E S A N D J U S T U S I N G D I E T A S T H E M A I N E F F E C T , F - V A L U E S W E R E H I G H E R B U T S T I L L N O T S I G N I F I C A N T W I T H R E S P E C T T O D I E T . 2. D I S C U S S I O N . E V I D E N C E F R O M T H E L I T E R A T U R E O N W O R K D O N E O N O T H E R R O D E N T S P E C I E S A N D R A B B I T S S H O W S T H A T T H E Y D O A D A P T T O C H A N G E S I N T H E D I E T B Y A L T E R I N G T H E I R O U T P U T R A T I O S O F P A N C R E A T I C E N Z Y M E S . WORK D O N E B Y G R O S S M A N A N D G R E E N G A R D (14) D E M O N S T R A T E D T H A T I N R A T S M A I N T A I N E D 43 F I G U R E 7. R A N G E O F V A L U E S F O R T R Y P S I N U N I T S F R O M C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N . T R Y P S I N U N I T S D I E T 1 D I E T 2 D I E T 3 D i E T 4 D i E T 5 45 FDGURE 8. R A N G E O F V A L U E S F O R C H Y M O T R Y P S I N U N I T S F R O M C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N . i n f-Ld CO bj O CO CL > or o 2 >-X o O J i -LJ o UJ o C U / M L P R O T E I N I N P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E 47 F I G U R E 9. R A T I O C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N . R A N G E A N D A V E R A G E V A L U E S F R O M C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N . C H Y M O T R Y P S i N : T R Y P S i N » 1 1 i i D I E T 1 D I E T 2 D I E T 3 D I E T 4 D I E T 5 49 F I G U R E 10. R A N G E O F V A L U E S F O R T O T A L P R O T E A S E A C T I V I T Y F R O M C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N . 5 4-^  T O T A L P R O T E A S E •> < 3-—i 73 O H D I E T 1 L _ D I E T 2 D I E T 3 D i E T 4 D I E T 5 o 51 O N A C O N S T A N T D I E T A N A D A P T A T I O N O F T H E C H I E F P A N C R E A T I C E N Z Y M E S T O T H E P R E D O M I N A N T C O N S T I T U E N T O F T H E D I E T O C C U R R E D . T H U S , A H I G H C A R B O H Y D R A T E D I E T P R O D U C E D A P R O N O U N C E D I N C R E A S E I N T H E A M Y L A S E C O N T E N T O F P A N C R E A T I C T I S S U E , A H I G H P R O T E I N D I E T R E S U L T E D I N G R E A T L Y I N C R E A S E D T R Y P S I N C O N T E N T , W H E R E A S A H I G H F A T D I E T C A U S E D N O I M P O R T A N T A L T E R A T I O N I N L I P A S E C O N T E N T O F T H E P A N C R E A T I C T I S S U E . | T W A S F U R T H E R D E M O N S T R A T E D I N T H E D O G T H A T T H E R E L A T I V E C O N C E N T R A T I O N O F T H E C H I E F P A N C R E A T I C E N Z Y M E S I N P A N C R E A T I C J U I C E P A R A L L E L S T H A T E X I S T I N G I N P A N C R E A T I C T I S S U E . B E N A B D I L J L I L A N D D E S N U E L L E (3) G A V E A M P L E P R O O F W I T H R A T S T H A T B O T H A M Y L O L Y T I C A N D P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E A C T I V I T Y C A N B E I N F L U E N C E D B Y T H E N A T U R E O F T H E D I E T . T H E Y S H O W E D T H A T T H E S P E C I F I C A C T I V I T Y O F A M Y L A S E I S H I G H E R I N T H E P A N C R E A S O F R A T S I N G E S T I N G A S T A R C H - R I C H D I E T T H A N I N R A T S I N G E S T I N G A P R O T E I N -R I C H D I E T . ON T H E O T H E R H A N D , T H E S P E C I F I C A C T I V I T Y O F C H Y M O T R Y P S I N O G E N , T R Y P S I N O G E N A N D O T H E R P R O T E O L Y T I C P R E C U R S O R S W A S F O U N D T O B E H I G H E R I N T H E P A N C R E A S O F R A T S E A T I N G T H E P R O T E I N - R I C H D I E T . O T H E R S T U D I E S B Y H O W A R D A N D Y U D K I N (21) I N D I C A T E D T H A T A M Y L A S E A N D T R Y P S I N L E V E L S I N T I S S U E E X T R A C T S V A R Y I N D E P E N D E N T L Y I N T H E R A T , A M Y L A S E B E I N G R E L A T E D T O T H E L E V E L O F D I E T A R Y C A R B O H Y D R A T E A N D T R Y P S I N T O D E I T A R Y P R O T E I N . T H I S S T U D Y I S O N L Y C O N C E R N E D W I T H T H E E F F E C T O F D I E T A R Y P R O T E I N O N P A N C R E A T I C E N Z Y M E L E V E L S . S I N C E T H E E N Z Y M E C O N T E N T O F P A N C R E A T I C J U I C E P A R A L L E L S T H A T E X I S T I N G I N P A N C R E A T I C T I S S U E (14) S T U D I E S C A N B E U N D E R T A K E N U S I N G F I S T U L A T E D A N I M A L S T O D E T E R M I N E T H E T I M E I T T A K E S F O R A N A N I M A L T O A D A P T T O A G I V E N D I E T . C O R R I N G _ E T _ A L . ( 8 ) , E X P E R I M E N T I N G W I T H C O N T E N T I N T H E D I E T A N D T H E D I F F E R E N C E S O F A C T I V I T I E S R E C O R D E D F O R H I G H A N D L O W P R O T E I N D I E T S A R E G R E A T . M O R E O V E R , C H Y M O T R Y P S I N R E S P O N S E O C C U R R E D R E G U L A R L Y 48 H O U R S A F T E R E A C H C H A N G E I N D I E T . V A R I A T I O N S O F T R Y P S I N A N D A M Y L A S E E N Z Y M A T I C A C T I V I T I E S W E R E R E L A T I V E L Y I N S I G N I F I C A N T . | N A G E N E R A L W A Y , T H E N , H E S A I D T H A T A H I G H P R O T E I N D I E T S T I M U L A T E S T O T A L P R O T E I N S Y N T H E S I S I N T H E E X O C R I N E P A N C R E A S . S N O O K A N D M E Y E R (46) D E T E R M I N E D T H E E N Z Y M E A C T I V I T I E S O F T H E C O N T E N T S O F T H E S M A L L I N T E S T I N E S I N R A T S P A I R - F E D P R O T E I N - F R E E , 15$ C A S E I N O R 15$ W H O L E E G G P R O T E I N D I E T S D U R I N G 1 - H O U R I N T E R V A L S S P A C E D 12 H O U R S A P A R T . C A S E I N A N D W H O L E - E G G P R O T E I N I N C R E A S E D T H E T O T A L P R O T E O L Y T I C A N D T H E T O T A L E N D O G E N O U S N I T R O G E N C O N T E N T O F T H E D I G E S T A A F T E R S E V E N D A Y S O F E X P E R I M E N T A L F E E D I N G . W H O L E - E G G P R O T E I N W A S S H O W N T O I N C R E A S E T H E S Y N T H E S I S A N D S E C R E T I O N O F T R Y P S I N , C H Y M O T R Y P S I N A N D A M Y L A S E W H E N E X P E R I M E N T A L D I E T S W E R E F E D F O R 1, 7, 15 A N D 25 F E E D I N G S . T H E P R E S E N C E O F C A S E I N A N D W H O L E E G G P R O T E I N A P P E A R E D T O R E T A R D T H E R A T E O F T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N I N A C T I V A T I O N W I T H I N T H E S M A L L I N T E S T I N E . T H E Y C O N C L U D E D T H A T D I E T A R Y P R O T E I N D I R E C T L Y S T I M U L A T E S E N Z Y M E S E C R E T I O N B E C A U S E T H E E N Z Y M E A C T I V I T Y O F T H E D I G E S T A W A S A L T E R E D A F T E R O N L Y O N E F E E D I N G O F T H E T E S T D I E T . D I E T A R Y P R O T E I N N O T O N L Y I N C R E A S E S T H E S Y N T H E S I S A N D S E C R E T I O N O F V A R I O U S D I G E S T I V E E N Z Y M E S B U T R E T A R D S T H E R A T E O F B R E A K D O W N O F T H E S E E N Z Y M E S W I T H I N T H E I N T E S T I N E . M O R E R E C E N T W O R K A G A I N C O N F I R M S T H A T D I E T A F F E C T S T H E P A N C R E A T I C E N Z Y M E L E V E L S . T R Y P S I N O G E N A N D C H Y M O T R Y P S I N O G E N L E V E L S W E R E F O U N D T O R E S P O N D D I F F E R E N T L Y IDO A H I G H P R O T E I N D I E T I N R A T S . S N O O K (48) S H O W E D T H A T T H R E E - O R F O U R - F O L D I N C R E A S E S I N D I E T A R Y C A S E I N R A I S E D T H E P R O T E A S E C O N T E N T O F T H E R A T P A N C R E A S A S M U C H A S 100$ W I T H C H Y M O T R Y P S I N O G E N B E I N G A F F E C T E D M O R E T H A N T R Y P S I N O G E N . L E B A S _ E T _ A L . (27) W E R E I N C L I N E D T O T H E V I E W T H A T T H E F E E D G R E A T L Y S T I M U L A T E S A M Y L A S E B I O S Y N T H E S I S , C H Y M O T R Y P S I N O G E N B I O -S Y N T H E S I S T O A L E S S E R E X T E N T A N D I S I N E F F E C T U A L O N T R Y P S I N O G E N I N T H E R A B B I T . T H E V A R I A T I O N S O F L I P A S E , T H E Y D E M O N S T R A T E D W E R E R A T H E R P E C U L I A R A N D S E E M E D T O B E I R R E S P E C T I V E O F T H E D I E T A N D I T S L I P I D C O N S T I T U E N T S . C O R R I N G ET XL. (7) A T T E M P T E D T O C O N F I R M T H E H Y P O T H E S I S T H A T T H E E X O C R I N E P A N C R E A S I N Y O U N G S U C K L I N G R A B B I T S A D A P T S T O V A R I A T I O N S I N T H E D I E T A T W E A N I N G . R A B B I T S W E R E F E D E I T H E R M A T E R N A L M I L K T O 30 D A Y S T H E N S U D D E N L Y W E A N E D T O A S T A R C H D I E T O R T H E Y W E R E F E D M A T E R N A L M I L K T O 21 D A Y S T H E N S U D D E N L Y W E A N E D T O A S T A R C H D I E T . T R Y P S I N , C H Y M O T R Y P S I N , L I P A S E A N D A M Y L A S E A C T I V I T I E S W E R E S L I G H T L Y H I G H E R I N A N I M A L S W E A N E D A T 21 D A Y S O F A G E . T H I S S E E M E D T O I N D I C A T E T H A T T H E F E E D W A S N O T T H E F A C T O R S T I M U L A T I N G P A N C R E A T I C E N Z Y M E D E V E L O P M E N T . H O W E V E R , I T C O U L D P O S S I B L Y M O D I F Y T H E A M O U N T O F R E S P O N S E T O T H I S S T M I M L I I I A T O ' Q N . R E S U L T S O F T H I S E X P E R I M E N T M A Y H A V E B E E N N O N - S I G N I F I C A N T D U E T O T H E F A C T T H A T R A T I O N S W E R E N O T A S V A R I A B L E I N C A R B O H Y D R A T E C O N T E N T A N D P R O T E I N C O N T E N T A S T H E R A T I O N S U S E D B Y O T H E R W O R K E R S S T U D Y I N G T H E S A M E P R O B L E M . A S I N E X P E R I M E N T 2, R A T I O S O F C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N W E R E S I G N I F I C A N T L Y D I F F E R E N T W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T . T H I S C O U L D B E D U E T O T H E H I G H E R V A R I A B I L I T Y O F C H Y M O T R Y P S I N T H A N T R Y P S I N A S A R E S U L T O F T H E D I E T . OR, P E R H A P S F E E D P A L A T A B I L I T Y A N D C O M P E N S A T O R Y F E E D C O N S U M P T I O N P L A Y E D A N I M P O R T A N T R O L E I N I N F L U E N C I N G T H E S E R E S U L T S . A N I M A L S C O N S U M I N G T H E L O W - P R O T E I N R A T I O N S A T E S L I G H T L Y M O R E T H A N T H E A N I M A L S C O N S U M I N G T H E H I G H - P R O T E I N R A T I O N S . P E R H A P S T H I S C O M P E N S A T E D F O R T H E D I F F E R E N C E S I N P R O T E I N L E V E L S I N T H E D I F F E R E N T R A T I O N S . SUMMARY AND C O N C L U S I O N S T H E C H I N C H I L L A D I F F E R S I N V A R I O U S WAYS F R O M O T H E R S P E C I E S W I T H R E S P E C T T O I T S T H R E E M A J O R P E R I O D S O F A D A P T A T I O N I N R E L A T I O N T O P R O T E I N U T I L I Z A T I O N . S E R U M I M M U N O G L 0 U L I N L E V E L S D I D N O T I N C R E A S E F R O M B I R T H O N W A R D S . T H I S C O U L D I N D I C A T E T H A T T H E Y O L K S A C A N D / O R P L A C E N T A I S I M P O R T A N T I N T H E P R E - N A T A L C H I N C H I L L A F O R A N T I B O D Y T R A N S F E R F R O M T H E M O T H E R . T H I S I S A L S O S E E N I N R A B B I T S A N D S O M E R O D E N T S R A T H E R T H A N C O L O S T R A L T R A N S F E R W H I C H I S I M P O R T A N T I N G R O U P S S U C H A S A R T I O D A C T Y L A ( A P P E N D I X 6, F I G . 1 ) . T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N I N H I B I T O R S W E R E N O T F O U N D I N A P P R E C I A B L E L E V E L S I N T H E P A N C R E A T I C H O M O G E N A T E F R O M N E W B O R N T O T H R E E - D A Y - O L D C H I N C H I L L A . T H E S U D D E N D R O P I N P R O T E O L Y T I C E N Z Y M E A C T I V I T Y A T T H R E E D A Y S O F A G E C O U L D H A V E B E E N E X P L A I N E D B Y H I G H L E V E L S O F I N H I B I T O R I N T H E P A N C R E A T I C J U I C E A F T E R B I R T H . T H E S E I N H I B I T O R S C O U L D H A V E C O M B I N E D W I T H T H E E N Z Y M E S T H E R E B Y P R E V E N T I N G C O L O S T R A L A N T I B O D Y D E G R A D A T I O N . S U C H I N H I B I T O R S , H O W E V E R , W E R E N O T D E T E C T E D . P R O T E A S E D E V E L O P M E N T I N T H E N E W B O R N C H I N C H I L L A MAY N O T B E A S I M P O R T A N T AS I N R A B B I T S A N D S O M E R O D E N T S S I N C E C H I N C H I L L A A R E B O R N I N A M O RE A D V A N C E D C O N D I T I O N . E N Z Y M E S Y S T E M S C O U L D I N I T I A L L Y B E M O R E F U N C T I O N A L A N D L E S S D E P E N D E N T U P O N T H E M O T H E R ' S M I L K A S A S T I M U L U S F O R E N Z Y M E S E C R E T I O N . S L N C E Y O U N G M A M M A L S A R E B O R N A T W I D E L Y D I F F E R E N T S T A G E S O F P H Y S I O L O G I C A L M A T U R I T Y A N D T H E M I L K S O F 55 D I F F E R E N T S P E C I E S D I F F E R G R E A T L Y I N P R O T E I N C O M P O S I T I O N , I T I S L O G I C A L T O S U G G E S T A R E L A T I O N S H I P B E T W E E N M I L K C O M P O S I T I O N A N D S T A G E O F M A T U R I T Y O F T H E N E W B O R N . H O W E V E R , U P O N C O M P I L A T I O N O F T H E O B S E R V A T I O N S , T H I S I S N O T A T A L L A P P A R E N T ( A P P E N D I X 6, F L G . 2 ) . P R O T E A S E L E V E L S O F T H E N E W B O R N O F D I F F E R E N T S P E C I E S A R E A L S O W I D E L Y V A R I A B L E R E G A R D L E S S O F P H Y S I O L O G I C A L S T A G E O F M A T U R I T Y A T B I R T H ( A P P E N D I X 6, F I G . 3 ) . I N T H E Y O U N G C H I N C H I L L A , D I E T A R Y P R O T E I N L E V E L C O U L D B E C O N S T A N T L Y M A I N T A I N E D S I N C E I T Q U I C K L Y S U P P L E M E N T S I T S D I E T W I T H F O O D O T H E R T H A N M I L K . I N S T U D I E S ON D I E T A D A P T I O N , I N V E S T I G A T O R S W O R K I N G W I T H R A T S A N D M I C E U S U A L L Y D E M O N S T R A T E D A P A N C R E A T I C E N Z Y M E L E V E L OR E N Z Y M A T I C R A T I O R E S P O N S E . T H I S M A Y H A V E B E E N B E C A U S E R A T S A N D M I C E A R E M O R E O M N I V O R O U S T H A N C H I N C H I L L A A N D C A N B E T T E R A D A P T T O D I F F E R E N T D I E T S . 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A P P E N D I C E S A P P E N D I X 1 SERUM P R O T E I N L E V E L S IN THE C H I N C H I L L A FROM B I R T H TO TWELVE WEEKS AG E PEAK H E I G H T ( R E L A T I V E A B S O R B A N C E ) (DAYS ) A L B U M i N T R A N S F E R R I N GAMMA-GLOBUL1N 0 DAY 9.2 3.8 .82 0 DAY 9.8 4.1 4.9 0 DAY 9.2 3.5 1 .5 3 DAYS 9.8 3.5 1 .48 3 DAYS 9.3 4.2 1 .2 1 WK . 9.6 6.3 .96 1 WK. 9.6 6.2 1 .02 2 WKS. 8.8 3.2 1 .28 2 WKS . 9.5 4.1 1 .02 6 WKS . 9.7 5.2 1 .5 6 WKS . 9.8 4.2 1 .22 8 WKS . 9.8 6.3 1 .18 8 WKS . 9.8 5.1 1 .30 10 WKS. 9.8 6.7 1 .42 12 WKS. 9.7 5.6 1 .56 12 WKS. 9.7 5.6 1 .22 A P P E N D I X 2 R E L A T I V E C H A N G E S I N T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S T R Y P S I N U N I T S / M G . C H Y M O T R Y P S I N U N I T S / M G . P A N C R E A T I C P R O T E I N P A N C R E A T I C P R O T E I N T U/KG C U / K G A G E ( T U ) ( C U ) B O D Y W E I G H T B O D Y W E I G H T 0 D A Y 3.26 1 .73 94.4 50.1 0 D A Y 3.84 1 .37 98.6 35.2 0 D A Y 2.47 1 .08 61 .9 26.9 3 D A Y S 2.19 .374 43.074 7.30 3 D A Y S 1 .85 .603 32.9 10.8 1 WK . 3.31 .457 54.2 7.49 1 WK. 2.30 .096 29.5 1 .20 2 WKS . 3.28 .520 52.0 8.30 2 WKS . 1 .68 .839 19.1 9.50 6 WKS . 1 .83 2.64 9.4 13.5 6 WKS . 2.91 2.04 14.0 9.80 8 WKS . 1 .08 1 .34 4.30 5.40 8 W K S . 1 .87 .631 7.20 2.40 10 W K S . 1 .25 1 .27 33.67 3.74 10 W K S . .588 1 .91 8 3.10 10.3 12 W K S . .938 .128 2.70 .370 12 W K S . 2.28 1 .34 7.20 4.20 A P P E N D I X 3 T O T A L P R O T E A S E A C T I V I T Y A N D C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N W I T H R E S P E C T T O B O D Y W E I G H T I N T H E C H I N C H I L L A F R O M B I R T H T O T W E L V E W E E K S T O T A L P R O T E A S E / M G . P A N C R E A T I C P R O T E I N T O T . P R O T E A S E / K G C H Y M O T R Y P S I N : C : T / K G B O D Y A G E ( T O T . P R O T E A S E ) B O D Y W E I G H T T R Y P S I N ( C : T ) W E I G H T 0 D A Y .247 7.17 .531 15.4 0 D A Y .273 6.99 .356 9.14 0 D A Y .256 6.40 .436 10.9 3 D A Y S .141 2.77 .171 3.35 3 D A Y S .142 2.53 .327 5.83 1 WK. .192 3.15 .138 2.27 1 WK. .051 .656 .042 .535 2 WKS . .147 2.33 .159 2.52 2 WKS . .103 1.17 .501 5.69 6 WKS . .166 .853 1 .44 7.39 6 WKS . .193 .927 .701 3.37 8 WKS . .093 .373 1 .24 4.96 8 WKS . .066 .254 .338 1 .29 10 W K S . .109 .319 1 .02 2.99 10 W K S . .155 .827 3.26 17.5 12 W K S . .098 ,5285 .137 .396 12 W K S . .136 .431 .588 1 .86 A P P E N D I X 4 T R Y P S I N A N D C H Y M O T R Y P S I N U N I T S I N R E L A T I O N T O B O D Y W E I G H T I N C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N T R Y P S I N U N I T S / M G . C H Y M O T R Y P S I N U N I T S / M G . T U / K G . B O D Y C U / K G . B O D Y P A N C R E A T I C P R O T E I N P A N C R E A T I C P R O T E I N D I E T ( T U ) (cu) WE 1 G H T W E I G H T 1 2.73 1 .53 7.92 4.44 1 .724 .529 2.59 1 .90 2 1.13 .920 2.21 1 .80 2 1 .99 .981 5.03 2.47 2 4.10 2.30 10.1 5.67 3 2.66 1 .48 5.70 3.19 3 2.16 1 .61 6.65 4.94 3 2.08 .925 5.23 2.32 4 2.02 1 .87 5.35 4.97 4 2.31 1.13 5.32 2.61 4 3.64 2.24 9.42 5.81 4 1 .74 1 .08 4.11 2.56 5 4.41 4.94 10.4 11 .6 5 2.93 1 .53 6.01 3.14 5 3.13 1 .92 7.52 4.60 • 5 3.66 1 .48 8.78 3.56 D I E T 1 = 11 .i Ifo P R O T E I N D I E T 4 = 21.0$ P R O T E I N D i E T 2 = 12. i 3$ P R O T E I N D I E T 5 = 24.5$ P R O T E I N D I E T 3 = 18.' \ % P R O T E I N A P P E N D I X 5 T O T A L P R O T E A S E A N D C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N I N R E L A T I O N T O B O D Y W E I G H T O F C H I N C H I L L A F E D R A T I O N S W I T H V A R Y I N G L E V E L S O F P R O T E I N T O T A L P R O T E A S E / M G . T O T . P R O T E A S E / K G . C: T / K G . P A N C R E A T I C P R O T E I N C H Y M O T R Y P S I N : T R Y P S I N D I E T ( T O T . P R O T E A S E ) B O D Y W E I G H T (C:.T) B O D Y W E I G H T 1 2.83 8.20 .560 1 .62 1 .949 3.40 .731 2.62 2 1 .31 2.56 .816 1 .63 2 1 .93 4.87 .491 1 .24 2 3.52 8.68 .561 1 .38 3 2.60 5.58 .559 1 .20 3 2.21 6.78 .744 2.29 3 2.35 5.89 .443 1.11 4 2.67 7.09 .929 2.47 4 2.10 4.85 .491 1 .13 4 2.99' 7.72 .617 1 .59 4 2.75 6.47 .622 1 .47 5 4.15 9.79 1 .12 2.64 5 2.39 4.90 .522 1 .07 5 2.63 6.32 .612 1 .47 5 3.19 7.66 .405 .970 D I E T 1 = 11.2$ P R O T E I N D I E T 4 = 21.0$ P R O T E I N D I E T 2 = 12.6$ P R O T E I N D I E T 5 = 24.5$ P R O T E I N D I E T 3 = 18.4$ P R O T E I N A P P E N D I X 6 P R O T E A S E A C T I V I T Y O F D I F F E R E N T S P E C I E S W I T H R E S P E C T T O fo I M M U N O G L O B U L I N S A C Q U I R E D A F T E R B I R T H , P R O T E I N C O N T E N T O F T H E M I L K , A N D P H Y S I O L O G I C A L A G E A T B I R T H F I G . 1 O V E R : 100 100 P R O T E A S E A C T I -V I T Y A S A fo O F A D U L T P R O T E A S E , C H i N C H i L L A C H I C K E N - R A B B I T A C T I V I T Y 50 R A T C A L F L A M B 25 50 75 100 2 fo I M M U N O G L O B U L I N A C Q U I R E D A F T E R B I R T H F I G . 2 O V E R , 100 100 P R O T E A S E A C T I V I T Y A S A fo O F A D U L T P R O T E A S E , A C T I V I T Y 50 C H I N C H I. L L A R A B B I T COW COW S H E E P 3 6 9 12 P R O T E I N C O N T E N T [%) O F M I L K ^ A P P E N D I X 6 C O N ' T . F I G . 3 O V E R TOO 100 P R O T E A S E A C T T V T T Y A S A fo O F A D U L T P R O T E A S E , A C T I V I T Y 50 < CO CO < CC CO < < x o I o LJ >c o X o P H Y S I O L O G I C A L A G E A T B I R T H D. J . S C H I N G O E T H E , A . D. L . G O R R I L L , J . W. T H O M A S , A N D M. G. Y A N G . 1970. C A N A D I A N J O U R N A L O F P H Y S I O L O G Y A N D P H A R M A C O L O G Y 48:43. J . B. S O L O M O N . F A C T A L A N D N E O N A T A L I M M U N O L O G Y . N O R T H - H O L L A N D P U B L . C O . , L O N D O N . 1 971 . 'R. V O L C A N I , R. Z I S L I N G , D. S K L A N , A N D Z. N I T Z A N . 1973. T H E B R I T I S H J O U R N A L O F N U T R I T I O N . 29:121. 'A. W H I T E , P. H A N D L E R A N D E . L . S M I T H . 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