UBC Theses and Dissertations

UBC Theses Logo

UBC Theses and Dissertations

Histamine receptors in rabbit atria Polanin, Alicia 1979

Your browser doesn't seem to have a PDF viewer, please download the PDF to view this item.

Notice for Google Chrome users:
If you are having trouble viewing or searching the PDF with Google Chrome, please download it here instead.

Item Metadata

Download

Media
831-UBC_1980_A6_7 P65.pdf [ 3.39MB ]
Metadata
JSON: 831-1.0094937.json
JSON-LD: 831-1.0094937-ld.json
RDF/XML (Pretty): 831-1.0094937-rdf.xml
RDF/JSON: 831-1.0094937-rdf.json
Turtle: 831-1.0094937-turtle.txt
N-Triples: 831-1.0094937-rdf-ntriples.txt
Original Record: 831-1.0094937-source.json
Full Text
831-1.0094937-fulltext.txt
Citation
831-1.0094937.ris

Full Text

HISTAMINE RECEPTORS I N RABBIT ATRIA by A L I C I A POLANIN B.Sc. ( P h a r m . ) , U n i v e r s i t y o f B r i t i s h C o l u m b i a , 1976 A THESIS SUBMITTED I N OF THE REQUIREMENTS MASTER OF PARTIAL FULFILLMENT FOR THE DEGREE OF SCIENCE i n THE FACULTY OF GRADUATE STUDIES D i v i s i o n o f P h a r m a c o l o g y and T o x i c o l o g y o f t h e F a c u l t y o f P h a r m a c e u t i c a l S c i e n c e s We a c c e p t t h i s t h e s i s a s c o n f o r m i n g t o t h e r e q u i r e d s t a n d a r d THE UNIVERSITY OF B R I T I S H COLUMBIA December, 197 9 © A l i c i a P o l a n i n , 1979 In p r e s e n t i n g t h i s t h e s i s i n p a r t i a l f u l f i l m e n t o f t h e r e q u i r e m e n t s f o r an a d v a n c e d d e g r e e a t t h e U n i v e r s i t y o f B r i t i s h C o l u m b i a , I a g r e e t h a t t h e L i b r a r y s h a l l make i t f r e e l y a v a i l a b l e f o r r e f e r e n c e and s t u d y . I f u r t h e r a g r e e t h a t p e r m i s s i o n f o r e x t e n s i v e c o p y i n g o f t h i s t h e s i s f o r s c h o l a r l y p u r p o s e s may be g r a n t e d by t h e Head o f my D e p a r t m e n t o r by h i s r e p r e s e n t a t i v e s . I t i s u n d e r s t o o d t h a t c o p y i n g o r p u b l i c a t i o n o f t h i s t h e s i s f o r f i n a n c i a l g a i n s h a l l n o t be a l l o w e d w i t h o u t my w r i t t e n p e r m i s s i o n . D e p a r t m e n t o f 2k The U n i v e r s i t y o f B r i t i s h C o l u m b i a ~^LJ 2 0 7 5 W e s b r o o k P l a c e V a n c o u v e r , C a n a d a V 6 T 1W5 Date J A .fs 1 A B S T R A C T I n o r d e r t o c h a r a c t e r i z e t h e t y p e s o f h i s t a m i n e r e c e p t o r s ( H ^ o r i n r a b b i t a t r i a , i s o l a t e d a t r i a l p r e p a r a t i o n s w e r e e x p o s e d t o s e l e c t i v e h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s , a l o n e a n d i n t h e p r e s e n c e o f s e l e c t i v e h i s t a m i n e r e c e p t o r a n t a g o n i s t s . T h e r a t e o f i s o l a t e d r i g h t a t r i a w a s i n c r e a s e d b y h i s t a m i n e ( H ^ a n d H 2 ) » 4 - m e t h y l h i s t a m i n e ( I ^ ) , a n d i m p r o m i d i n e (H^) . 2 - P y r i d y l e t h y l a m i n e ( P E A , H ^ ) h a d v e r y l i t t l e e f f e c t o n a t r i a l r a t e . C i m e t i d i n e p r e t r e a t m e n t ( s e l e c t i v e H 2 r e c e p t o r b l o c k a d e ) c o m p e t i t i v e l y a n t a g o n i z e d t h e p o s i t i v e c h r o n o t r o p i c e f f e c t s o f h i s t a m i n e , 4 - m e t h y l h i s t a m i n e , a n d i m p r o m i d i n e . P r o m e t h -a z i n e p r e t r e a t m e n t ( s e l e c t i v e r e c e p t o r b l o c k a d e ) c o m p e t i -t i v e l y b l o c k e d t h e c h r o n o t r o p i c e f f e c t s o f h i s t a m i n e , b u t h a d n o e f f e c t o n t h e r e s p o n s e s t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e o r i m p r o -m i d i n e . T h e f o r c e o f i s o l a t e d l e f t a t r i a w a s i n c r e a s e d b y a l l f o u r a g o n i s t s . C i m e t i d i n e p r e t r e a t m e n t c o m p e t i t i v e l y b l o c k e d t h e i n o t r o p i c e f f e c t s o f h i s t a m i n e , 4 - m e t h y l h i s t a m i n e , a n d i m p r o m i d i n e , a n d h a d n o e f f e c t o n t h e r e s p o n s e t o P E A . P r o m e t h a z i n e p r e t r e a t m e n t c o m p e t i t i v e l y b l o c k e d t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e a n d t o P E A , a n d h a d n o e f f e c t o n t h e r e s p o n s e s t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e o r i m p r o m i d i n e . T h e p h o s p h o -- 4 d i e s t e r a s e i n h i b i t o r t h e o p h y l l i n e ( 3 x 1 0 M ) p o t e n t i a t e d t h e i n o t r o p i c b u t n o t t h e c h r o n o t r o p i c e f f e c t s o f 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . ( 1 x 1 0 - 4 M ) , i m p r o m i d i n e ( 1 x 1 0 _ 8 M ) a n d P E A ( 1 x 1 0 " ' 4 M ) . _5 H i s t a m i n e ( 1 x 1 0 M ) e x p o s u r e f o r 2 0 s e c o n d s d i d n o t a l t e r the c y c l i c AMP l e v e l s o f i s o l a t e d r a b b i t r i g h t and l e f t a t r i a . We r e p o r t t h a t both types (H^ and E^) of histamine r e c e p t o r s are present i n r a b b i t r i g h t and l e f t a t r i a . However, I cannot c o n f i r m r e p o r t s (Hughes,1978) t h a t both and histamine r e c e p t o r a g o n i s t s a c t through the g e n e r a t i o n of c y c l i c AMP. i v TABLE.OF CONTENTS Page ABSTRACT i i L I S T OF TABLES v i L I S T OF FIGURES v i INTRODUCTION 1 1. H i s t o r y 1 2. D i s c o v e r y o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s and a n t a g o n i s t s 3 METHODS 10 1. P r e p a r a t i o n o f t i s s u e s 10 2. R a t e and f o r c e r e c o r d i n g 10 3. D e p l e t i o n o f c a t e c h o l a m i n e s 11 4. S t u d i e s o f r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s and a n t a g o n i s t s 11 5. Measurement o f pA2 12 6. S t u d i e s w i t h t h e o p h y l l i n e . 13 7. C y c l i c AMP a s s a y ' 13 8. A n a l y s e s and s t a t i s t i c s 15 9. P r e p a r a t i o n o f d r u g s 16 RESULTS 17 1. C h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s o f r a b b i t r i g h t a t r i a 17 a. C u m u l a t i v e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s 17 b. E f f e c t o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a n t a g o n i s t s 20 2. I n o t r o p i c r e s p o n s e s o f r a b b i t l e f t a t r i a t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s . . . . . . 37 a. C u m u l a t i v e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s 37 b. E f f e c t o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a n t a g o n i s t s 4-9 c. p A 2 s t u d i e s 58 3. The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e c h r o n o t r o p i c and i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s .....63 V Page a. E f f e c t s o f t h e o p h y l l i n e on a t r i a l r a t e and f o r c e d e v e l o p m e n t 63 b. E f f e c t o f t h e o p h y l l i n e ( 3 x l O - l 4 M ) on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t i n t h e r i g h t a t r i a 63 c. E f f e c t o f t h e o p h y l l i n e ( 3 x l O ~ 4 M ) on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s i n t h e l e f t a t r i a . ....... ... • 68 4. The e f f e c t o f h i s t a m i n e on a t r i a l c y c l i c AMP c o n c e n t r a t i o n s . 68 DISCUSSION 84 BIBLIOGRAPHY 9 5 v i L I S T OF TABLES Page T a b l e I . The e f f e c t o f h i s t a m i n e -on c y c l i c AMP c o n c e n t r a t i o n s 83 v i i LIST. OF FIGURES Page F i g u r e 1. The e f f e c t s o f h i s t a m i n e r e c e p t o r . a g o n i s t s on. a t r i a l r a t e 18 F i g u r e 2. The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o -p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e 21 F i g u r e 3. The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o -p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . . . . 23 F i g u r e 4. The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e 2 5 F i g u r e 5. The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA 27 F i g u r e 6. The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e and p r o -m e t h a z i n e p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e .29 F i g u r e 7 . The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e and p r o m e t h - ." a z i n e p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e 31 F i g u r e 8. The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e and p r o -m e t h a z i n e p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o impromidine.. 3 3 v i i i P age F i g u r e 9. The e f f e c t o f p r o m e t h a z i n e p r e -t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA 35 F i g u r e 10. The e f f e c t s o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s on t h e f o r c e o f c o n t r a c t i o n o f r a b b i t l e f t a t r i a . . . 3 8 F i g u r e 1 1 . The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e 41 F i g u r e 12. The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e 43 F i g u r e 13. The e f f e c t s . o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e 45 F i g u r e 14. The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA 47 F i g u r e 15. The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e and p r o m e t h -a z i n e p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e 50 F i g u r e 16. The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e and p r o m e t h -a z i n e p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e 52 i x Page F i g u r e 17. The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e and p r o m e t h -a z i n e p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e . 54 F i g u r e 18. The e f f e c t o f p r o m e t h a z i n e • and c i m e t i d i n e p r e t r e a t m e n t on t h e r e s p o n s e t o - P E A 56 F i g u r e 19. The p A 2 v a l u e f o r c i m e t i d i n e i n t h e r i g h t a t r i a 59 F i g u r e 20. The p A 2 v a l u e f o r c i m e t i d i n e i n t h e l e f t a t r i a 61 F i g u r e 21. The e f f e c t o f r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o t h e o p h y l l i n e . . . . 64 F i g u r e 22. The e f f e c t s o f r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o t h e o p h y l l i n e 6 6 F i g u r e 23. The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . . . . 70 F i g u r e 24. The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e 7 2 F i g u r e 25. The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA 74 F i g u r e 26. The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e 7 6 X Page F i g u r e 27. The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e 7 8 F i g u r e 28. The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA. 80 x i TO MY MOTHER who h e l p e d make t h i s d a y p o s s i b l e x i i ACKNOWLEDGEMENTS I am v e r y g r a t e f u l t o D r . J.H. M c N e i l l f o r h i s v a l u a b l e a d v i c e a n d e n c o u r a g e m e n t t h r o u g h o u t t h i s s t u d y . I owe s p e c i a l t h a n k s t o D r . R.L. R o d g e r s f o r h i s g u i d a n c e d u r i n g t h e w r i t i n g o f t h i s t h e s i s , and t o B e v e r l y W e n k s t e r n f o r h e r e x p e r t t e c h n i c a l c o n t r i b u t i o n s . 1 INTRODUCTION 1 ; H i s t o r y H i s t a m i n e [ 5 - ( 2 - a m i n o e t h y l ) - i m i d a z o l e ] was f i r s t s y n -t h e s i z e d i n 1907 by W i n d a u s and V o g t . I n 1927 i t was r e p o r t e d t o be a n a t u r a l c o n s t i t u e n t o f o u r body ( B e s t e t a l . ) . H i s t -amine h a s b e e n shown t o be d i s t r i b u t e d i n v a r y i n g amounts i n m o s t , i f n o t a l l , mammalian t i s s u e s i n amounts r a n g i n g f r o m l e s s t h a n 100 ng/ml i n b l o o d t o o v e r 50 y g / g i n g u i n e a p i g l u n g and dog g a s t r i c mucosa (Vugman and R o c h a e S i l v a , 1 9 6 6 ) . I t s p h a r m a c o l o g i c a l e f f e c t s on t h e mammalian t i s s u e were f i r s t i n v e s t i g a t e d by D a l e and L a i d l a w ( 1 9 1 0 , 1 9 1 1 , 1 9 1 9 ) . They d i s c o v e r e d t h a t t h e o v e r a l l e f f e c t s o f h i s t a m i n e v a r i e d b e t w e e n s p e c i e s . I n t h e g u i n e a p i g b r o n c h i o l a r c o n s t r i c t i o n was t h e m a i n e f f e c t • b u t i n o t h e r s p e c i e s t h e e f f e c t on t h e v a s c u l a r s y s t e m p r e d o m i n a t e d . H i s t a m i n e was a l s o f o u n d t o h a v e a d i r e c t s t i m u l a t o r y a c t i o n on c a r d i a c c o n t r a c t i o n i n some s p e c i e s . The p e r i p h e r a l v a s c u l a r e f f e c t s o f h i s t a m i n e a l s o v a r i e d b e t w e e n s p e c i e s . H i s t a m i n e p r o d u c e d a s t r o n g c o n t r a c t i o n o f a r t e r i o l e s i n r a t and r a b b i t , a s l i g h t c o n t r a c t i o n i n t h e c a t , and d i l a t i o n i n d o g , monkey a n d man ( D a l e a nd L a i d l a w , 1 9 2 9 ) . I n most s p e c i e s h i s t a m i n e c a u s e d a g e n e r a l i z e d d i l a t i o n o f c a p i l l a r i e s i n t h e p e r i p h e r a l o r g a n s . The v a s c u l a r e f f e c t s o f h i s t a m i n e w e re f o u n d t o be an i m p o r t a n t a s p e c t o f t h e " t r i p l e r e s p o n s e " f i r s t r e p o r t e d by 2 L e w i s i n 1927. L e w i s o b s e r v e d t h a t l o c a l c u t a n e o u s i n j e c -t i o n s o f h i s t a m i n e c a u s e d a r e d s p o t , due t o l o c a l d i l a t i o n o f s m a l l b l o o d v e s s e l s , f o l l o w e d by a w h e a l f o r m a t i o n due t o a d i r e c t a c t i o n o f t h e d r u g on t h e w a l l s o f t h e f i n e b l o o d v e s s e l s , a n d s u c c e e d e d f i n a l l y by a f l u s h due t o w i d e -s p r e a d d i l a t i o n o f n e i g h b o u r i n g a r t e r i o l e s t h r o u g h an a x o n r e f l e x . H i s t a m i n e was a l s o f o u n d t o s t i m u l a t e g a s t r i c s e c r e t i o n i n t h e dog a n d c a t ( P o p i e l s k i , 1 9 2 0 ) . Today h i s t a m i n e i s c o n s i d e r e d t o be a v e r y p o t e n t s t i m u l u s t o g a s t r i c a c i d p r o d u c t i o n and i t e v o k e s s e c r e t i o n o f g a s t r i c j u i c e o f h i g h a c i d i t y . I n man t h e o u t p u t o f p e p s i n i s a l s o i n c r e a s e d a l o n g w i t h t h a t o f a c i d ( I v y and B a c h r a c h , 1966; K a h l s o n and R o s e n g r e n , 1 9 6 8 ) . I n c o n t r a s t t o t h e e f f e c t s o f h i s t a m i n e on t h e p e r i -p h e r a l v a s c u l a r s y s t e m a n d o t h e r o r g a n s y s t e m s , t h e d i r e c t e f f e c t s o f h i s t a m i n e on t h e h e a r t h a v e b e e n s t u d i e d r e l a t i v e l y r e c e n t l y . T r e n d e l e n b u r g ( 1 9 6 0 ) showed t h a t h i s t a m i n e h a d a d i r e c t p o s i t i v e i n o t r o p i c and c h r o n o t r o p i c e f f e c t on g u i n e a p i g , c a t and r a b b i t a t r i a , a s t h e e f f e c t s w e r e n o t a l t e r e d b y d e p l e t i o n o f n o r e p i n e p h r i n e s t o r e s w i t h r e s e r p i n e , a n t a g o n i s m o f n o r e p i n e p h r i n e w i t h d i c h l o r o i s o p r o t e r e n o l , o r c o m p e t i t i v e g a n g l i o n i c b l o c k a d e w i t h h e x a m e t h o n i u m . On t h e o t h e r h a n d , L a h e r and M c N e i l l ( 1 9 7 9 ) w ere a b l e t o b l o c k t h e c h r o n o t r o p i c and i n o t r o p i c e f f e c t s on c a t a t r i a w i t h l a r g e _ 3 c o n c e n t r a t i o n s o f h i s t a m i n e ( 1 x 10 M) by t h e 3 - a d r e n o c e p t o r _7 a n t a g o n i s t p r o p r a n o l o l (1 x 10 M). 3 2, • D i s c o v e r y • o L: h i s t a m i n e - r e c e p t o r a g o n i s t s , and a n t a g o n i s t s H i s t a m i n e b l o c k i n g a c t i v i t y was f i r s t d e m o n s t r a t e d by B o v e t a nd S t a u b i n 19 37 when t h e y s e l e c t i v e l y b l o c k e d h i s t -a mine t o x i c i t y i n g u i n e a p i g s by a p h e n o l i c e t h e r d e r i v a t i v e (compound 9 2 9 F ) . T h i s o b s e r v a t i o n s t a r t e d t h e e r a o f a n t i -h i s t a m i n e s y n t h e s i s and t h e two a n t i h i s t a m i n i c compounds p h e n b e n z a m i n e a nd p y r i l a m i n e m a l e a t e were i n t r o d u c e d f o r c l i n i c a l u s e ( H a l p r e n , 1 9 4 2 ; B o v e t e t a l , 1 9 4 4 ) . L a t e r o t h e r h i g h l y e f f e c t i v e a n t a g o n i s t s , d i p h e n h y d r a m i n e (Loew e t a l , 1946) a n d t r i p e l e n n a m i n e (Yonkman e t a l , 1946) were d e v e l o p e d i n t h e U.S.A. I n man t h e s e a n t i h i s t a m i n e s a l l e v i a t e d symptoms a s s o c i a t e d w i t h a l l e r g i c r h i n i t i s , h a y f e v e r o r u r t i c a r i a b u t t h e y d i d n o t p r e v e n t t h e f a l l i n b l o o d p r e s s u r e i n a n a p h y -l a c t i c s h o c k , t h e b r o n c h o s p a s m i n a s t h m a (Yonkman e t a l , 1946) o r t h e i n o t r o p i c a n d c h r o n o t r o p i c e f f e c t s o f h i s t a m i n e on t h e h e a r t ( T r e n d e l e n b u r g , 1 960; A s h and S c h i l d , 1 9 6 6 ; M c N e i l l and M u s c h e k , 1 9 7 2 ) . I n 1 9 4 8 , F o l k o w e t a l . f i r s t s u g g e s t e d t h a t t h e r e may be more t h a n one t y p e o f h i s t a m i n e r e c e p t o r p r e s e n t w h i c h w o u l d a c c o u n t f o r t h e o b s e r v e d d i s c r e p a n c i e s i n t h e a n t i h i s t -a m i n i c a c t i v i t y . I n 1 9 6 6 , A s h a n d S c h i l d p r o p o s e d t h e name f o r r e c e p t o r s b l o c k e d by t h e known a n t i h i s t a m i n i c compounds. They c o n c l u d e d t h a t a c t i o n s o f h i s t a m i n e on i s o l a t e d a t r i a , r a t u t e r u s and g a s t r i c a c i d s e c r e t i o n , w h i c h w ere n o t b l o c k e d by t h e known a n t i h i s t a m i n e s , w e re m e d i a t e d t h r o u g h a s e c o n d t y p e o f r e c e p t o r . I n 1972 B l a c k e_t a l . d i s c o v e r e d a new s e r i e s o f com-pounds t h a t b l o c k e d t h e a c t i o n s o f h i s t a m i n e t h o u g h t t o be m e d i a t e d t h r o u g h t h e s e c o n d t y p e o f r e c e p t o r and g ave t h e name E^ f o r t h e s e r e c e p t o r s . T h e s e new d r u g s d i d n o t i n h i b i t t h e a c t i o n s o f h i s t a m i n e w h i c h were p r e v i o u s l y c h a r a c t e r i z e d by A s h and S c h i l d ( 1 9 6 6 ) as . The f i r s t E^ r e c e p t o r a n t a -g o n i s t s t o be d i s c o v e r e d were b u r i m a m i d e and m e t i a m i d e . L a t e r c i m e t i d i n e , a l s o an E^ r e c e p t o r a n t a g o n i s t , was s y n t h e s i z e d t o r e p l a c e m e t i a m i d e , a s t h e l a t t e r p r o v e d t o be t o o t o x i c f o r c l i n i c a l u s e (Wood a n d S i m k i n s , 1 9 7 3 ) . B u r i m a m i d e , m e t i -a mide and c i m e t i d i n e a p p e a r t o be s p e c i f i c a nd c o m p e t i t i v e E^ r e c e p t o r a n t a g o n i s t s (Wood and S i m k i n s , 1 9 7 3 ) . B l a c k a n d h i s c o l l e a g u e s a l s o d e m o n s t r a t e d t h a t a c t i v a -t i o n o f and E^ r e c e p t o r s c o u l d be d i s t i n g u i s h e d by 2 new compounds 2 - m e t h y l h i s t a m i n e a n d 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . 2 - M e t h y l -h i s t a m i n e i s a r e l a t i v e l y s p e c i f i c r e c e p t o r a g o n i s t and i s a b o u t 16% a s a c t i v e a s h i s t a m i n e i n s t i m u l a t i n g r e c e p t o r s . 4 - M e t h y l h i s t a m i n e i s a h i g h l y s e l e c t i v e E^ r e c e p t o r a g o n i s t and i s 4 3 % a s a c t i v e as h i s t a m i n e i n s t i m u l a t i n g E^ r e c e p t o r s . L a t e r o t h e r r e c e p t o r a g o n i s t s w e re d i s c o v e r e d . D u r a n t e t a l . ( 1 9 7 5 ) r e p o r t e d t h a t 2 - ( 2 - p y r i d y l ) e t h y l a m i n e (PEA) had some s p e c i f i c i t y f o r r e c e p t o r s t i m u l a t i o n and was 13% a s a c t i v e as h i s t a m i n e i n s t i m u l a t i n g r e c e p t o r s . V e r y r e c e n t l y Owen e_t a l . (197 9) h a v e r e p o r t e d i m p r o m i d i n e (SK £ F 92676) t o be a v e r y p o t e n t and s p e c i f i c h i s t a m i n e E^ r e c e p t o r a g o n i s t . T h i s new compound was f o u n d t o be e v e n more p o t e n t 5 t h a n h i s t a m i n e i n s t i m u l a t i n g r e c e p t o r s ( D u r a n t e t a l , 1 9 7 8 ) . R e c e n t l y a number o f t i s s u e p r e p a r a t i o n s h a v e b e e n shown t o c o n t a i n e i t h e r o r H 2 r e c e p t o r s , and s t i l l o t h e r p r e -p a r a t i o n s c o n t a i n b o t h t y p e s o f r e c e p t o r s . The t y p e o f h i s t a m i n e r e c e p t o r h a s b e e n r e v e a l e d by t h e u s e o f r e p u t e d l y s p e c i f i c H-^  o r H 2 r e c e p t o r a g o n i s t s and a n t a g o n i s t s . Some a c t i o n s o f h i s t a m i n e h a v e b e e n m i s t a k e n l y a s c r i b e d t o r e c e p t o r s t i m u l a t i o n b e c a u s e o f t h e i r b l o c k a d e by f a i r l y l a r g e amounts o f r e c e p t o r a n t a g o n i s t . T h i s may be due t o t h e f a c t t h a t t h e c l a s s i c a l a n t i h i s t a m i n e s e x h i b i t a v a r i e t y o f p h a r m a c o l o g i c a l a c t i v i t i e s . I n a d d i t i o n t o t h e i r a n t i -h i s t a m i n i c a c t i v i t y , t h e y a l s o p o s s e s s a n t i c h o l i n e r g i c , a n t i -a d r e n e r g i c and l o c a l a n a e s t h e t i c a c t i v i t y (Dews and Graham, 1946; D u t t a , 1 9 4 9 ; T r e n d e l e n b u r g , 1 9 6 0 ; M c N e i l l and Verma, 1 9 7 4 c ; D o u g l a s , 1 9 7 5 ) . T h e r e i s n o t enough i n f o r m a t i o n a v a i l a b l e t o s t a t e t h a t a l l r e s p o n s e s o f r e c e p t o r s a r e m e d i a t e d by one t y p e o f m e c h a n i s m and t h a t o f H 2 r e c e p t o r s a r e m e d i a t e d by a n o t h e r t y p e . T h e r e i s e v i d e n c e t h a t c y c l i c n u c l e o t i d e s may be i n v o l v e d i n t h e r e s p o n s e m e c h a n i s m ( K u k o v e t z and P o c h , 1 9 7 2 ; M c N e i l l and Verma, 1 9 7 8 ) . I t i s b e l i e v e d t h a t r e s p o n s e s w h i c h a r e m e d i a t e d t h r o u g h H 2 r e c e p t o r s t i m u l a t i o n a r e a s s o c i a t e d w i t h i n c r e a s e d c y c l i c a d e n o s i n e - 3 ' , 5 ' - m o n o p h o s -p h a t e ( c y c l i c AMP) l e v e l s ( K l e i n and L e v y , 1 9 7 1 ; Verma and M c N e i l l , 1975 , 1976 ; 0 y e , 1975 ; T e n n e r and M c N e i l l , 1 9 7 8 a ) . 6 T h e s e e f f e c t s i n c l u d e c a r d i a c a c c e l e r a t i o n ( R e i n h a r d t e t a l , 1974; Verma and M c N e i l l , 1 9 7 7 a ) , i n c r e a s e d c a r d i a c f o r c e o f c o n t r a c t i o n (Verma and M c N e i l l , 1 9 7 7 a ) , g a s t r i c a c i d s e c r e t i o n ( M c N e i l l and Verma, 1974b; S o i l a n d W o l l i n , 1 9 7 7 ) , i n h i b i t i o n o f h i s t a m i n e a nd SRS-A r e l e a s e f r o m human l e u k o c y t e s ( L i c h -t e n s t e i n a n d G i l l e s p i e , 1 9 7 5 ) , a n d i n h i b i t i o n o f T c e l l -i n d u c e d c y t o l y s i s ( P l a u t e t a l , 1 9 7 5 ) . The a v a i l a b i l i t y o f s p e c i f i c and H 2 r e c e p t o r a g o n i s t s a n d a n t a g o n i s t s h a s e n a b l e d i n v e s t i g a t o r s t o s t u d y t h e t y p e s o f h i s t a m i n e r e c e p t o r s p r e s e n t i n . v a r i o u s t i s s u e s i n c l u d i n g t h o s e o f t h e h e a r t . The t y p e s o f c a r d i a c r e c e p t o r s h a v e b e e n f o u n d t o v a r y w i t h s p e c i e s a nd t h e p a r t o f t h e h e a r t b e i n g e x a m i n e d . Verma and M c N e i l l ( 1 9 7 7 a ) h a v i n g c h a r a c t e r i z e d t h e h i s t a m i n e r e c e p t o r t y p e s i n t h e g u i n e a p i g h e a r t a s p r e d o m i n a n t l y b e g a n t o d e f i n e t h o s e o f t h e New. Z e a l a n d w h i t e r a b b i t ( M c N e i l l a nd Verma, 1 9 7 8 ) . They f o u n d t h a t h i s t a m i n e r e c e p t o r s r e g u l a t i n g t h e i n o t r o p i c a c t i o n i n t h e l e f t a t r i a , v e n t r i c l e and p a p i l l a r y m u s c l e , were o f t h e H-^  t y p e . H^ r e c e p t o r s t i m u l a t i o n a l s o p r o d u c e d a p o s i t i v e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e i n t h e r i g h t a t r i a . r e c e p t o r s w e re f o u n d o n l y i n t h e r i g h t a t r i a , a n d t h e y w e re a s s o c i a t e d w i t h a p o s i t i v e c h r o n o t r o p i c e f f e c t . They a l s o showed t h a t o n l y H2 5 and n o t , r e c e p t o r s t i m u l a t i o n was a s s o c i a t e d w i t h i n c r e a s e d c y c l i c AMP l e v e l s . On t h e o t h e r h a n d , Hughes ( 1 9 7 8 ) , u s i n g r a b b i t a t r i a l p a i r s , s u g g e s t e d t h a t b o t h H, and H r e c e p t o r a c t i v a t i o n "7 7 l e a d t o i n c r e a s e d c y c l i c AMP l e v e l s . She h o w e v e r , d i d n o t m e a s u r e c y c l i c AMP l e v e l s t o s u p p o r t h e r h y p o t h e s i s . H e r c o n c l u s i o n was b a s e d on t h e o b s e r v a t i o n t h a t p r e t r e a t m e n t w i t h t h e p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t o r s t h e o p h y l l i n e and p a p a v e r i n e p o t e n t i a t e d t h e c h r o n o t r o p i c e f f e c t s o f b o t h H^ and H£ r e c e p t o r a g o n i s t s . M c N e i l l , e t a l . ( 1 9 7 2 ) f o u n d t h a t t h e d i r e c t e f f e c t s o f p a p a v e r i n e and m e t h y l x a n t h i n e s s u c h as t h e o p h y l l i n e i n t h e i s o l a t e d g u i n e a p i g h e a r t d i d n o t c o r r e l a t e w e l l w i t h t h e i r r e l a t i v e a b i l i t i e s t o i n h i b i t p h o s p h o d i e s t e r a s e . They c o n c l u d e d t h a t t h e a c t i o n o f t h e m e t h y l x a n t h i n e s may n o t be m e d i a t e d t h r o u g h c y c l i c AMP. L a t e r , M c N e i l l e t a l . ( 1 9 7 4 ) showed t h a t t h e o p h y l l i n e can' p r o d u c e an i n c r e a s e i n c a r d i a c c o n t r a c t i l e f o r c e and p h o s p h o r y l a s e a w i t h o u t e l e v a t i n g t h e l e v e l s o f c y c l i c AMP i n g u i n e a p i g and r a t h e a r t s p e r f u s e d by t h e L a n g e n d o r f f t e c h n i q u e . . F u r t h e r m o r e , M a r t i n e z and M c N e i l l ( 1 9 7 7 ) were a b l e t o a b o l i s h t h e c y c l i c AMP i n c r e a s e p r o d u c e d w i t h t h e o p h y l l i n e i n t h e r a t l e f t a t r i a w i t h r e s e r p i n e p r e -t r e a t m e n t . T h e s e f i n d i n g s s u g g e s t t h a t m e c h a n i s m s o t h e r t h a n p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t i o n may be r e s p o n s i b l e f o r t h e c a r d i a c e f f e c t s p r o d u c e d by t h e o p h y l l i n e . T h e r e i s e v i d e n c e t h a t c a l c i u m i s i n v o l v e d i n t h e m e c h a n i s m o f a c t i o n o f t h e o p h y l l i n e . S c h o l z ( 1 9 7 1 ) c o n c l u d e d t h a t t h e p o s i t i v e i n o t r o p i c e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e , a s s e e n i n t h e g u i n e a p i g l e f t a t r i u m , was m a i n l y due t o an i n c r e a s e i n c a l c i u m i n f l u x f r o m t h e e x t r a c e l l u l a r s p a c e d u r i n g e x c i t a t i o n c a u s e d by an enhancement o f membrane p e r m e a b i l i t y 2 + t o c a l c i u m . M e i n e r t z a n d S c h o l z ( 1 9 6 9 ) showed t h a t Mn , an 2 + i o n t h a t d i s p l a c e s b ound Ca , i n h i b i t s t h e e f f e c t s o f t h e o -p h y l l i n e on peak t e n s i o n . K u k o v e t z a nd P o c h (197 2) c o n c l u d e d , f r o m t h e i r s t u d i e s on i s o l a t e d g u i n e a p i g a t r i a , t h a t an 2 + m c r e a s e m u p t a k e o f Ca a c r o s s t h e c e l l membrane i s t h e most l i k e l y m e c h a n i s m o f t h e p o s i t i v e i n o t r o p i c a c t i o n o f t h e o p h y l l i n e . M a r t i n e z a n d M c N e i l l ( 1 9 7 7 ) a l s o p o s t u l a t e d t h a t t h e e f f e c t o f t h e m e t h y l x a n t h i n e s on t h e r a t l e f t a t r i a may be a s c r i b e d t o c a l c i u m i n v o l v e m e n t s i n c e t h e y c o u l d n o t f i n d a c o r r e l a t i o n b e t w e e n t h e c o n t r a c t i l e a n d t h e c y c l i c AMP e f f e c t s o f t h e o p h y l l i n e . Hughes ( 1 9 7 8 ) , i n h e r s t u d y u s e d 2 - ( 2 - a m i n o e t h y l ) p y r a -z o l e a s t h e E^ r e c e p t o r a g o n i s t a n d 3 - ( 2 - a m i n o e t h y l ) t r i a z o l e a s t h e H-^  r e c e p t o r a g o n i s t . H o w e v e r , D u r a n t e_t a l . ( 1 9 7 5 ) and B l a c k e t a l . ( 1 9 7 2 ) s u g g e s t e d t h a t t h e s e two h i s t a m i n e a n a l o g s a r e n o t v e r y s e l e c t i v e . B o t h compounds h a v e some H^ and E^ r e c e p t o r a g o n i s t p r o p e r t i e s . T h e r e f o r e , t h e i n c r e a s e i n a t r i a l r a t e t h a t Hughes (197 8) a t t r i b u t e d t o H-^  r e c e p t o r s t i m u l a t i o n may h a v e b e e n , i n p a r t , a l s o due t o E^ r e c e p t o r s t i m u l a t i o n . B e c a u s e o f t h e d i s c r e p a n c i e s , i n r e s u l t s d i s c u s s e d a b o v e we d e c i d e d t o r e - i n v e s t i g a t e t h e t y p e o f h i s t a m i n e r e c e p t o r s p r e s e n t i n t h e i s o l a t e d r i g h t and l e f t r a b b i t a t r i a , a n d t o s t u d y t h e i n t e r a c t i o n o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s w i t h t h e o p h y l l i n e . F i n a l l y , b i o c h e m i c a l s t u d i e s t o d e t e r m i n e t h e 9 i n v o l v e m e n t o f c y c l i c AMP i n and r e c e p t o r i n d u c e d r e s p o n s e s w e re c a r r i e d o u t . 10 METHODS 1. P r e p a r a t i o n o f t i s s u e s W h i t e New Z e a l a n d r a b b i t s o f e i t h e r s e x w e i g h i n g 2.5 (+ 0.5) k g w e re u s e d t h r o u g h o u t t h e s t u d y . They r e c e i v e d P u r i n a R a b b i t Chow and w a t e r ad l i b i t u m . The a n i m a l s w e re i n j e c t e d w i t h h e p a r i n s o d i u m 8 mg/kg i n t r a - p e r i t o n e a l l y ( i . p . ) 30 m i n u t e s b e f o r e s a c r i f i c e . T h ey w e r e k i l l e d b y a s h a r p b l o w on t h e h e a d and e x s a n g u i n a t e d by c u t t i n g t h e c a r o t i d a nd j u g u l a r b l o o d v e s s e l s . T h o r a c o t o m y was p e r f o r m e d and t h e h e a r t s w e re q u i c k l y e x c i s e d and p l a c e d i n C h e n o w e t h - K o e l l e ( C . K . ) s o l u t i o n ( C h e n o w e t h a n d K o e l l e , 1946) o f t h e f o l l o w i n g com-p o s i t i o n : N a C l , 120 mM; KC1, 5.6 mM; C a C l 2 2 H 2 0 , 2.2 mM; M g C l 2 6 H 2 0 , 2.1 mM; NaHCOg, 19.2 mM; and d - g l u c o s e , 10 mM. The C.K. s o l u t i o n was o x y g e n a t e d w i t h a gas m i x t u r e o f 95% o x y g e n a n d 5% c a r b o n d i o x i d e t h r o u g h a s i n t e r e d g l a s s t u b e . The a t r i a w e r e d i s s e c t e d away f r o m t h e v e n t r i c l e s by t h e m e t h o d o f L e v e y ( 1 9 7 1 ) . The l e f t a n d r i g h t a t r i a w e r e s e p a r a t e d , a n d t h e f a t a n d e x c e s s t i s s u e was c u t away. The a t r i a w e r e s u s p e n d e d i n a 2 0 ml v o l u m e t i s s u e b a t h c o n t a i n i n g t h e o x y -g e n a t e d C.K. b u f f e r a t 35° C. 2. R a t e and f o r c e r e c o r d i n g The w i d e s t p o r t i o n s o f i n d i v i d u a l a t r i a w e r e a t t a c h e d t h r o u g h f i n e h o o k s t o a p l a t i n u m e l e c t r o d e . A P a l m e r c l i p was p l a c e d on t h e o p p o s i t e e n d o f e a c h o f t h e a t r i a f o r r e c o r d i n g . A r e s t i n g t e n s i o n o f 1.0 gm was a p p l i e d t o e a c h o f t h e 11 p r e p a r a t i o n s a n d k e p t c o n s t a n t b y r e a d j u s t i n g d u r i n g t h e e q u i l i b r a t i o n p e r i o d . Ten m i n u t e s l a t e r t h e l e f t a t r i a w e r e e l e c t r i c a l l y d r i v e n w i t h a G r a s s M o d e l S6 s t i m u l a t o r a t a f r e q u e n c y o f 1.0 Hz. w i t h 5 m i l l i s e c o n d s q u a r e wave p u l s e s a t d o u b l e t h e t h r e s h o l d v o l t a g e . The s p o n t a n e o u s l y b e a t i n g r i g h t a t r i a a n d e l e c t r i c a l l y s t i m u l a t e d l e f t a t r i a w e r e a l l o w e d t o e q u i l i b r a t e a t 35°C f o r one h o u r p r i o r t o u s e o f d r u g s . D u r i n g t h i s t i m e t h e b a t h i n g s o l u t i o n was c h a n g e d e v e r y 5 m i n u t e s . A G r a s s M o d e l 7 9D p o l y g r a p h was u s e d f o r r e c o r d i n g t h e a t r i a l r a t e a n d f o r c e o f c o n t r a c t i o n . 3. D e p l e t i o n o f c a t e c h o l a m i n e s I n an a t t e m p t t o m i n i m i z e t h e i n d i r e c t e f f e c t s o f c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e some r a b b i t s were p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e ; 1.5 mg/kg i . p . 2 7 h o u r s , a n d 0.7 5 mg/kg i . p . 3 h o u r s b e f o r e s a c r i f i c e . Some a t r i a w e r e c h a l l e n g e d w i t h t y r a m i n e -4 ( 1 x 10 M) t o c h e c k f o r c o m p l e t e n e s s o f c a t e c h o l a m i n e d e p l e t i o n . 4. S t u d i e s o f r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s a n d  a n t a g o n i s t s When t h e p r e p a r a t i o n s w e r e s t a b l e t h e e f f e c t s o f h i s t -a mine a nd i t s a n a l o g s w e re s t u d i e d . C h r o n o t r o p i c d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were o b t a i n e d i n t h e r i g h t a t r i a a n d i n o t r o p i c d o s e -r e s p o n s e c u r v e s i n t h e l e f t a t r i a u s i n g t h e c u m u l a t i v e m e thod d e s c r i b e d by Van Rossum a n d Van Den B r i n k ( 1 9 6 3 ) . E a c h t i s s u e was u s e d f o r o n l y one c o m p l e t e d o s e - r e s p o n s e c u r v e . M a x i m a l r e s p o n s e s were a s s u m e d t o h a v e o c c u r r e d when a t h r e e - f o l d 12 h i g h e r d o s e t h a n t h e p r e c e d i n g one f a i l e d t o p r o d u c e a f u r t h e r i n c r e a s e i n t h e r e s p o n s e . When b l o c k i n g a g e n t s w e r e u s e d , t h e y w e re a d d e d t o t h e b a t h i n g s o l u t i o n 3 0 m i n u t e s p r i o r t o t h e a d d i t i o n o f t h e a g o n i s t . 5. M e a s u r e m e n t o f pA2 M e a s u r e m e n t s o f p A 2 ( A r u n l a k s h a n a and S c h i l d , 1 9 5 9 ) c a n be e m p l o y e d t o q u a n t i f y t h e a f f i n i t y o f a n t a g o n i s t s f o r a r e c e p t o r s i t e , a n d a l s o t o c h a r a c t e r i z e r e c e p t o r t y p e s i n v i t r o . The p A 2 i s d e f i n e d a s t h e ' n e g a t i v e l o g a r i t h m o f t h e m o l a r d o s e o f a n t a g o n i s t w h i c h r e d u c e s t h e e f f e c t o f a d o u b l e d o s e o f a g o n i s t t o t h a t o f a s i n g l e d o s e . A c c o r d i n g t o A r u n l a k s h a n a a n d S c h i l d ( 1 9 5 9 ) t i s s u e s w i t h s i m i l a r r e c e p t o r s w o u l d be e x p e c t e d t o g i v e t h e same p A 2 v a l u e s . F u r t h e r m o r e , a p l o t o f l o g ( a g o n i s t d o s e r a t i o -1) a g a i n s t t h e n e g a t i v e l o g m o l a r c o n c e n t r a t i o n o f t h e a n t a g o n i s t w h i c h y i e l d s a s l o p e o f -1 i n d i c a t e s c o m p e t i t i v e a n t a g o n i s m . A p A 2 s t u d y was c a r r i e d o u t t o c ompare t h e a f f i n i t y o f c i m e t i d i n e f o r t h e H 2 r e c e p t o r s i t e i n t h e r i g h t a t r i a w i t h t h a t o f t h e l e f t a t r i a . The a g o n i s t u s e d was h i s t a m i n e . The f o l l o w i n g c o n c e n t r a t i o n s o f c i m e t i d i n e w e r e u s e d i n e a c h a t r i u m , ' — 6 — 6 — 5 1 x 10 M, 3 x 10 M, a n d 1 x 10 M. I n o r d e r t o m i n i m i z e t h e e f f e c t s o f c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e t h e C.K. b u f f e r c o n t a i n e d -7 . . . p r o p r a n o l o l 1 x 10 M. S e q u e n t i a l h i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n e a c h t i s s u e w i t h w a s h i n g i n b e t w e e n . I n one s e r i e s i n c r e a s i n g d o s e s o f t h e b l o c k i n g a g e n t , c i m e t i d i n e , 13 w e r e a d d e d . A p a r a l l e l s e r i e s w i t h no b l o c k i n g a g e n t was a l s c a r r i e d o u t t o c o n t r o l f o r t i m e - r e l a t e d c h a n g e s i n t h e s e n s i t i v i t y o f t h e t i s s u e s . The ED r r, v a l u e s a t e a c h d o s e o f 5 0 a n t a g o n i s t were p l o t t e d a n d t h e ~pA^ was c a l c u l a t e d f o r e a c h t i s s u e . The pA^ v a l u e s w e re t h e n p l o t t e d a n d e x p r e s s e d a s t h e mean + S.E. 6. S t u d i e s w i t h t h e o p h y l l i n e S e p a r a t e a n d c o m b i n e d e f f e c t s o f t h e o p h y l l i n e and h i s t a m i ne a n a l o g s were a l s o s t u d i e d on i s o l a t e d r i g h t a n d l e f t a t r i a . A s e r i e s o f e x p e r i m e n t s w e re done b y a d m i n i s t e r i n g a s u b m a x i m a l c o n c e n t r a t i o n o f a h i s t a m i n e a n a l o g . When t h e r e s p o n s e h a d r e a c h e d a s t e a d y - s t a t e l e v e l , t h e t i s s u e was w a s h e d w i t h t h e o x y g e n a t e d C.K. b u f f e r . A f t e r t h e a t r i u m r e t u r n e d t o a b a s a l l e v e l , a s u b - m a x i m a l c o n c e n t r a t i o n o f t h e o p h y l l i n e was a d d e d a n d when t h e r e s p o n s e r e a c h e d a s t e a d y s t a t e l e v e l t h e i n i t i a l d o s e o f t h e h i s t a m i n e a n a l o g u n d e r s t u d y was a g a i n a d m i n i s t e r e d . The a d d e d c h a n g e i n r e s p o n s e , due t o e a c h o f t h e a g o n i s t s , was p l o t t e d a n d s t a t i s t i c a l l y c o m p a r e d t o t h e c o m b i n e d e f f e c t s o f t h e a g o n i s t s . 7 . C y c l i c AMP a s s a y T i s s u e s were f r o z e n by c l a m p i n g w i t h W o l l e n b e r g e r t o n g s ( W o l l e n b e r g e r e t a l , 1 9 6 0 ) , p r e v i o u s l y c h i l l e d i n l i q u i n i t r o g e n , 2 0 s e c o n d s f o l l o w i n g t h e a d m i n i s t r a t i o n o f a s u b -m a x i m a l c o n c e n t r a t i o n o f h i s t a m i n e ( 1 x 10 ^M). The a t r i a were r a p i d l y r e m o v e d f r o m t h e t i s s u e b a t h and d r o p p e d i n t o 14 l i q u i d n i t r o g e n . A l l s a m p l e s w ere s u b s e q u e n t l y s t o r e d a t -80°C u n t i l a s s a y e d f o r cAMP. C y c l i c AMP c o n t e n t o f t h e a t r i a was m e a s u r e d u s i n g t h e B e c t o n D i c k i n s o n C y c l i c AMP r a d i o -125 i m m u n o a s s a y k i t I . T h i s k i t c o n t a i n s an a n t i b o d y w h i c h i s h i g h l y s p e c i f i c f o r c y c l i c AMP. The g e n e r a l p r i n c i p l e o f t h e a s s a y i s : H a p t e n T J . 1 2 5 T H a p t e n I + A n t i b o d y ^ H a p t e n - A n t i b o d y ^ H a p t e n I - A n t i b o d y T i s s u e s were i n c u b a t e d w i t h t h e C y c l i c AMP I a n d t h e a n t i -b o d y f o r 18-20 h o u r s a t + 4°C. The a n t i b o d y h a s a n e q u a l a f f i n i t y f o r t h e s t a n d a r d and t h e h a p t e n w h i c h i s p r e s e n t i n t h e s a m p l e . The u n l a b e l l e d h a p t e n c o m p e t e s w i t h l a b e l e d h a p t e n f o r t h e l i m i t e d number o f a v a i l a b l e a n t i b o d y b i n d i n g s i t e s t h e r e b y r e d u c i n g t h e amount o f l a b e l e d h a p t e n b o u n d t o t h e a n t i b o d y . The l e v e l o f r a d i o a c t i v i t y b o u n d w i l l be i n v e r s e l y r e l a t e d t o t h e c o n c e n t r a t i o n o f h a p t e n i n t h e t i s s u e s a m p l e o r s t a n d a r d . F o l l o w i n g t h e 18-20 h o u r i n c u b a t i o n p e r i o d t h e b o u n d a n d f r e e f r a c t i o n s were s e p a r a t e d by p r e c i p i t a t i n g t h e b o u n d h a p t e n m o l e c u l e s w i t h ammonium s u l p h a t e . N e x t t h e p r e c i -p i t a t e d h a p t e n - a n t i b o d y c o m p l e x was c e n t r i f u g e d a n d t h e s u p e r n a t a n t was d e c a n t e d o f f . The b o u n d r a d i o a c t i v i t y o f 15 t h e l a b e l e d h a p t e n - a n t i b o d y c o m p l e x was c o u n t e d u s i n g a s c i n t i l a t i o n c o u n t e r . C o n c e n t r a t i o n o f t h e c y c l i c AMP i n t h e s a m p l e s was d e t e r m i n e d f r o m a s t a n d a r d c u r v e . 9• A n a l y s e s a n d s t a t i s t i c s L e f t a t r i a l p r e p a r a t i o n s w e r e d i s c a r d e d i f t h e b a s a l d e v e l o p e d t e n s i o n was l e s s t h a n 0.15 gm o r more t h a n 0.7 gm. R i g h t a t r i a l p r e p a r a t i o n s w e r e d i s c a r d e d i f t h e b a s a l d e v e l o p e d a t r i a l r a t e was l e s s t h a n 8 0 b e a t s p e r m i n u t e o r more t h a n 160 b e a t s p e r m i n u t e . E D J - Q v a l u e s w e re o b t a i n e d by g r a p h i c a l l y c a l c u l a t i n g t h e c o n c e n t r a t i o n o f a n a g o n i s t p r o d u c i n g 5 0% o f i t s maximum r e s p o n s e . The c a l c u l a t e d E D ^ v a l u e s f o r h i s t a m i n e i n t h e p r e s e n c e and a b s e n c e o f c i m e t i d i n e w e re u s e d t o c o n s t r u c t a S c h i l d p l o t ( 1 9 5 7 ) . A p l o t o f l o g ( d o s e r a t i o -1) a g a i n s t - l o g c o n c e n t r a t i o n o f t h e a n t a g o n i s t , y i e l d s a l i n e w h i c h i n t e r s e c t s t h e x a x i s a t a p o i n t c o r r e s p o n d i n g t o t h e p A 2 . The p A 2 v a l u e s f o r e a c h t i s s u e , a s w e l l a s a l l o t h e r v a l u e s i n t h e s t u d y , w e re p l o t t e d a s t h e mean + S . E . S t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e was d e t e r m i n e d by t h e u s e o f t h e S t u d e n t ' s t - t e s t . The p a i r e d t e s t was u s e d i n t h e p A 2 and t h e o p h y l l i n e s t u d i e s a n d t h e u n p a i r e d t e s t f o r a l l o t h e r v a l u e s . D i f f e r e n c e s w e r e c o n s i d e r e d s i g n i f i c a n t i f p < 0.05 f o r a t w o - t a i l e d t e s t . 16 10. P r e p a r a t i o n s o f d r u g s The d r u g s w e r e f r e s h l y r e c o n s t i t u t e d w i t h d i s t i l l e d w a t e r on t h e d a y o f t h e e x p e r i m e n t . The d r u g s u s e d w e r e : c i m e t i d i n e , i m p r o m i d i n e , 4 - m e t h y l h i s t a m i n e d i h y d r o c h l o r i d e a nd 2 - p y r i d y l e t h y l a m i n e d i h y d r o c h l o r i d e , o b t a i n e d f r o m S m i t h K l i n e a n d F r e n c h L a b o r a t o r i e s L t d . ; h i s t a m i n e d i h y d r o c h l o r i d d l - i s o p r o t e r e n o l h y d r o c h l o r i d e , d l - p r o p r a n o l o l h y d r o c h l o r i d e r e s e r p i n e , t y r a m i n e h y d r o c h l o r i d e and h e p a r i n , o b t a i n e d f r o m t h e S i g m a C h e m i c a l Company; p r o m e t h a z i n e h y d r o c h l o r i d e f r o m P o u l e n c ; and t h e o p h y l l i n e f r o m B.D.H. 17 RESULTS 1. C h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s o f r a b b i t r i g h t a t r i a t o h i s t a m i n e  r e c e p t o r a g o n i s t s a. C u m u l a t i v e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s The e f f e c t o f i n c r e a s i n g d o s e s o f h i s t a m i n e , 4 - m e t h y l -h i s t a m i n e , i m p r o m i d i n e a n d PEA on r a t e o f i s o l a t e d r a b b i t a t r i a i s shown i n f i g u r e 1. A l l f o u r a g o n i s t s s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d a t r i a l r a t e . The t h r e s h o l d c o n c e n t r a t i o n f o r -7 h i s t a m i n e was 1 x 10 M and f o r 4 - m e t h y l h i s t a m m e a nd PEA _ 5 1 x 10 M, a c o n c e n t r a t i o n 2 00 t i m e s h i g h e r t h a n was n e c e s s a r y f o r h i s t a m i n e . The t h r e s h o l d c o n c e n t r a t i o n f o r i m p r o m i d i n e was 3 x 10~"1'0M, w h i c h was s i g n i f i c a n t l y l o w e r t h a n , t h a t n e e d e d f o r h i s t a m i n e . The m o l a r c o n c e n t r a t i o n s o f e a c h a g o n i s t w h i c h c a u s e d t h e maximum c h a n g e i n r a t e w e r e a s f o l l o w s : -4 H i s t a m i n e , 1 x 10 M (228 ± 7 b e a t s p e r m i n u t e ) ; 4 - m e t h y l --4 h i s t a m i n e , 3 x 10 M (210 ± 6 b e a t s p e r m i n u t e ) ; i m p r o m i d i n e , 1 x 10~ 6M (188 ± 5 b e a t s p e r m i n u t e ) ; a n d PEA, 1 x 1 0 ~ 3 M (208 ± 5 b e a t s p e r m i n u t e ) . The p o t e n c y o f i m p r o m i d i n e a p p e a r e d t o be h i g h e r , b u t t h e maximum r e s p o n s e was l o w e r t h a n f o r t h e o t h e r h i s t a m i n e a g o n i s t s . The d i f f e r e n c e s i n r e s p o n s e s may p a r t i a l l y be due t o c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e ( B r o a d l e y , 1 9 7 8 ; C o l e b a t c h , 1 9 7 0 ) . T h e r e f o r e we o b s e r v e d t h e c h r o n o t r o p i c e f f e c t s o f t h e s e a g o n i s t s i n t h e p r e s e n c e o f t h e b e t a a d r e n -_7 e r g i c a n t a g o n i s t p r o p r a n o l o l ( 1 x 10 M ) , a n d i n a n i m a l s w h i c h w e r e d e p l e t e d o f c a t e c h o l a m i n e s t h r o u g h r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t . 18 F i g u r e 1 The e f f e c t s o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s on a t r i a l r a t e . The e f f e c t s o f h i s t a m i n e , PEA, 4 - m e t h y l h i s t a m i n e and i m p r o m i d i n e on r a t e were s t u d i e d i n r a b b i t r i g h t a t r i a . A l l f o u r a g o n i s t s i n c r e a s e d r i g h t a t r i a l r a t e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) +_ S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 19 D o s e o f A g o n i s t ( - l o g M ) 20 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l ( 1 x 1 0 - / M ) p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e , 4 - m e t h y l h i s t a m i n e , i m p r o m i d i n e , a n d PEA a r e shown i n f i g u r e s _7 2-5. N e i t h e r r e s e r p i n e n o r p r o p r a n o l o l ( 1 x 10 M) p r e t r e a t -ment s i g n i f i c a n t l y a f f e c t e d t h e t h r e s h o l d o f h i s t a m i n e , 4-m e t h y l h i s t a m i n e o r i m p r o m i d i n e . H o w e v e r , b o t h p r e t r e a t m e n t s s l i g h t l y d e p r e s s e d t h e maximum r e s p o n s e t o h i s t a m i n e , 4-m e t h y l h i s t a m i n e , a n d i m p r o m i d i n e . . The e f f e c t w as, h o w e v e r , n o t s i g n i f i c a n t . I n c o n t r a s t e i t h e r r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l _7 (1 x 10 M) p r e t r e a t m e n t c a u s e d a s i g n i f i c a n t d e c r e a s e i n t h e maximum c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA. T h e s e r e s u l t s s u g g e s t t h a t c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e a c c o u n t e d f o r a l a r g e p o r t i o n o f t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA. T h e r e f o r e , s u b s e q u e n t s t u d i e s o f t h e e f f e c t s o f t h e a n d H 2 r e c e p t o r b l o c k i n g a g e n t s on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s t o t h e s e a g o n i s t s w e r e p e r f o r m e d i n a t r i a o f r e s e r p i n e p r e t r e a t e d r a b b i t s i n o r d e r t o m i n i m i z e t h e c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e . b. E f f e c t o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a n t a g o n i s t s The e f f e c t s o f t h e s p e c i f i c H^ r e c e p t o r a n t a g o n i s t p r o -m e t h a z i n e a nd o f t h e s p e c i f i c H^ r e c e p t o r a n t a g o n i s t c i m e t i d i n e on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e , 4 - m e t h y l h i s t a m i n e , i m p r o m i d i n e , a n d PEA i n t h e r i g h t a t r i a a r e shown i n f i g u r e s — 6 6-9. B o t h a n t a g o n i s t s ( p r o m e t h a z i n e 2 x 10 M and c i m e t i d i n e — 6 1 x 10 M ) , s i g n i f i c a n t l y s h i f t e d t h e h i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e t o t h e r i g h t ( f i g . 6 ) . An e v e n f u r t h e r s h i f t t o t h e 21 F i g u r e 2 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e  c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e . H i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s w e re p e r f o r m e d i n r a b b i t r i g h t a t r i a p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l -7 1 x 10 M as d e s c r i b e d m t h e m e t h o d s . N e i t h e r p r e t r e a t m e n t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) a f f e c t e d t h e r e s p o n s e t o h i s t a m i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) + S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 22 Dose of Histamine (-log M) F i g u r e 3 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e  c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . 4 - M e t h y l h i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n r a b b i t r i g h t a t r i a p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e o r p r o --7 . • p r a n o l o l 1 x 10 M as d e s c r i b e d m t h e m e t h o d s . N e i t h e r p r e t r e a t m e n t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) a f f e c t e d t h e r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) + S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 24 25 F i g u r e 4 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l , p r e t r e a t m e n t on t h e  c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e . I m p r o m i d i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were, p e r f o r m e d i n r a b b i t r i g h t a t r i a p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l -7 1 x 10 M a s d e s c r i b e d m t h e methods.' N e i t h e r . p r e t r e a t m e n t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) a f f e c t e d t h e r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) + S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 26 C 9 8 7 6 Dose of Impromidine (-log M) 27 F i g u r e 5 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l . p r e t r e a t m e n t on t h e  c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA. PEA d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n r a b b i t r i g h t -7 a t r i a p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l 1 x 10 M as d e s c r i b e d i n t h e m e t h o d s . B o t h p r e t r e a t m e n t s c a u s e d a s i g n i f i c a n t (P < 0.05) d e c r e a s e i n t h e maximum r e s p o n s e t o PEA. E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) + S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l a t P < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 28 • Control 4 3 Dose of PEA (-log M) F i g u r e 6 The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e . and p r o m e t h a z i n e . p r e t r e a t m e n t on  t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e . H i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s w e re p e r f o r m e d i n r i g h t a t r i a f r o m r a b b i t s p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) +_ S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l a t P < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 30 Dose of Histamine (-log M) 31 F i g u r e 7 The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e and, p r o m e t h a z i n e p r e t r e a t m e n t on  t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . 4 - M e t h y l h i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s w e re p e r f o r m e d i n r i g h t a t r i a f r o m r a b b i t s p r e t r e a t e d w i t h . r e s e r p i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) +_ S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l a t P < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 32 200 H £ \ (D -Q S 150 QC • Control O Cimetidine 10"6M • Cimetidine 3x10"6M A Promethazine 2X10" 6 M 100 H (3) I 5 1 3 Dose of 4-Methylhistamine (-logM) 33 F i g u r e 8 The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e a n d , p r o m e t h a z i n e p r e t r e a t m e n t on  t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e . I m p r o m i d i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n r i g h t a t r i a f r o m r a b b i t s p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) +_ S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l a t P < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . • Control O Cimetidine 10'6M • Cimetidine 10~5M A Promethazine 2X1 0 " 6 M Dose of Impromidine (-log M) F i g u r e 9 The e f f e c t o f p r o m e t h a z i n e p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c  r e s p o n s e t o PEA. PEA d o s e - r e s p o n s e c u r v e s w e re p e r f o r m e d i n r i g h t a t r i a f r o m r a b b i t s p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) +_ S.E.M. P r o m e t h a z i n e h a d no s i g n i f i c a n t (P > 0 . 0 5 ) - e f f e c t on t h e r e s p o n s e t o PEA. A l a r g e r e f f e c t ( a l t h o u g h s t i l l n o t s i g n i f i c a n t ) i s s e e n i f t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e i s p l o t t e d i n t e r m s o f ch a n g e i n r a t e ( f i g . 9 a ) . Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 36 • Control A Promethazine 2 X 1 0 " 6 M § 3 0 -( 0 £ ^ £ 1 5 -<o oc <l Fig 9a A 4 3 Dose of PEA (-tog) 1 5 0 H c E \ V) to n £ 1 0 0 cc C 4 Dose of PEA (-log M) 37 r i g h t o f t h e d o s e - r e s p o n s e c u r v e was n o t e d i n t h e p r e s e n c e o f c i m e t i d i n e 1 x 10 M. C i m e t i d i n e ( 1 x 10 M and 3 x 10~ M) s i g n i f i c a n t l y s h i f t e d t h e 4 - m e t h y l h i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e — 6 c u r v e t o t h e r i g h t ( f i g . 7 ) . H o w e v e r , p r o m e t h a z i n e (2 x 10 M) h a d no s i g n i f i c a n t e f f e c t on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o — 6 4 - m e t h y l h i s t a m i n e ( f i g . 7 ) . C i m e t i d i n e ( 1 x 10~ M and _5 1 x 10 M) a l s o c a u s e d a s i g n i f i c a n t s h i f t t o t h e r i g h t o f t h e — 6 i m p r o m i d i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e , w h i l e p r o m e t h a z i n e (2 x 10 M) d i d n o t s i g n i f i c a n t l y a l t e r t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o — 6 i m p r o m i d i n e ( f i g . 8 ) . P r o m e t h a z i n e (2 x 10~ M) h a d no s i g n i -f i c a n t e f f e c t on t h e PEA d o s e - r e s p o n s e c u r v e ( f i g . 9 ) . S i n c e t h e c h r o n o t r o p i c e f f e c t o f PEA was v e r y s m a l l , i t may be d i f f i c u l t t o d e t e c t a s i g n i f i c a n t c h a n g e . A l a r g e r c h a n g e ( a l t h o u g h s t i l l n o t s i g n i f i c a n t ) c a n be s e e n i f t h e c h r o n o -t r o p i c r e s p o n s e i s p l o t t e d i n t e r m s o f c h a n g e i n r a t e — 6 ( f i g . 9a). C i m e t i d i n e (3 x 10 M) h a d no e f f e c t on PEA r e s p o n s e i n t h e r i g h t a t r i a o f a n o n - r e s e r p i n i z e d r a b b i t ( n o t s h o w n ) . 2. I n o t r o p i c r e s p o n s e s o f r a b b i t l e f t a t r i a t o h i s t a m i n e  r e c e p t o r a g o n i s t s a. C u m u l a t i v e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s The e f f e c t o f i n c r e a s i n g d o s e s o f h i s t a m i n e , 4 - m e t h y l -h i s t a m i n e , i m p r o m i d i n e a n d PEA on f o r c e o f c o n t r a c t i o n , i n i s o l a t e d r a b b i t l e f t a t r i a , i s shown i n f i g u r e 10. A l l f o u r a g o n i s t s s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d t h e a t r i a l f o r c e o f c o n -t r a c t i o n . The t h r e s h o l d c o n c e n t r a t i o n f o r h i s t a m i n e was 38 F i g u r e 10 The e f f e c t s o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s on t h e f o r c e o f  c o n t r a c t i o n o f r a b b i t l e f t a t r i a . The e f f e c t s o f h i s t a m i n e , PEA, 4 - m e t h y l h i s t a m i n e a nd i m p r o m i d i n e on f o r c e o f c o n t r a c t i o n were s t u d i e d i n r a b b i t l e f t a t r i a . A l l f o u r a g o n i s t s i n c r e a s e d a t r i a l t e n s i o n . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gm) +_ S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e " s h o w n i n p a r e n t h e s e s . 3 9 Dose of Agonist (-log M) 40 1 x 10~'M and f o r 4 - m e t h y l h i s t a m i n e a n d PEA, 3 x 10~ bM. The t h r e s h o l d c o n c e n t r a t i o n f o r i m p r o m i d i n e was 3 x 10 "^M, a c o n c e n t r a t i o n much l o w e r t h a n t h a t n e e d e d f o r h i s t a m i n e . The m o l a r c o n c e n t r a t i o n s o f e a c h a g o n i s t w h i c h c a u s e d a maximum c h a n g e i n r a t e w e r e a s f o l l o w s : H i s t a m i n e , 3 x 10 (1. 0 ± 0.06 gm); 4 - m e t h y l h i s t a m i n e , 3 x 1 0 _ 3 M ( 2 . 1 ± 0.12 gm); i m p r o m i d i n e 3 x 1 0 ~ ? M , ( 0 . 7 3 ± 0.05 gm) a n d PEA, 1 x 1 0 ~ 3 M (2. 0 ± 0.14 gm). A s i n t h e r i g h t , a t r i a , t h e p o t e n c y o f i m p r o m i d i n e a p p e a r e d t o be g r e a t e r , b u t t h e maximum r e s p o n s e was l o w e r t h a n f o r t h e o t h e r h i s t a m i n e a g o n i s t s . T h e s e d i f f e r e n c e s i n r e s p o n s e s may p a r t i a l l y h a v e b e e n due t o c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e . We, t h e r e f o r e , s t u d i e d t h e i n o t r o p i c e f f e c t s o f t h e s e a g o n i s t s i n t h e p r e s e n c e o f p r o p r a n o l o l _7 ( 1 x 10 M) a n d r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t . The e f f e c t s o f p r o p r a n o l o l a n d r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e , 4 - m e t h y l h i s t a m i n e i m p r o m i d i n e a n d PEA a r e shown i n f i g u r e s 11-14. N e i t h e r _7 p r o p r a n o l o l ( 1 x 10 M) n o r r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t s i g n i f i c a n t l y a f f e c t e d t h e t h r e s h o l d o f , o r t h e maximum r e s p o n s e t o , h i s t -a m i n e o r i m p r o m i d i n e ( f i g s . 11 and 1 3 ) . I n c o n t r a s t , e i t h e r r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t c a u s e d a s i g n i f i c a n t d e c r e a s e i n t h e maximum i n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e ( 1 . 0 ± 0.09 gm; 1.05 ± 0.08 gm) a n d t o PEA ( 1 . 0 ± 0.1 gm) 1.0 ± 0.07 gm). T h e s e r e s u l t s s u g g e s t t h a t some o f t h e i n o -t r o p i c r e s p o n s e o f PEA a n d 4 - m e t h y l h i s t a m i n e i s m e d i a t e d t h r o u g h c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e . T h e r e f o r e , s u b s e q u e n t s t u d i e s 41 F i g u r e 11 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e  i n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e . H i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e . c u r v e s were p e r f o r m e d i n r a b b i t l e f t a t r i a p r e t r e a t e d . w i t h r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l -7 . . 1 x 10 M as. d e s c r i b e d m t h e m e t h o d s . N e i t h e r p r e t r e a t m e n t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) a f f e c t e d t h e r e s p o n s e .to h i s t a m i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gm) +_ S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 42 Dose of Histamine (-log M) 43 F i g u r e 12 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e  i n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . 4 - M e t h y I h i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n r a b b i t l e f t a t r i a p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l -7 . . 1 x 10 M as d e s c r i b e d m t h e m e t h o d s . B o t h . p r e t r e a t m e n t s s i g n i f i c a n t l y (P < 0.05) d e c r e a s e d t h e r e s p o n s e t o 4-m e t h y I h i s t a m i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gm) + S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l a t P.< 0.05. Dose of 4-Methylhistamine (-logM) F i g u r e 13 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e  i n o t r o p i c r e s p o n s e t o i m p r o m i d i n e . I m p r o m i d i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n r a b b i t l e f t a t r i a p r e t r e a t e d . w i t h r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l -7 . . 1 x 10 M as d e s c r i b e d m t h e m e t h o d s . N e i t h e r p r e t r e a t m e n t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) a f f e c t e d t h e r e s p o n s e t o . i m p r o m i d i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gm) +_ S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 46 • Control • Reserpine • Propranolol 10~7M C 8 7 6 Dose of Impromidine (-log M) 47 F i g u r e 14 The e f f e c t s o f . r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l p r e t r e a t m e n t on t h e  i n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA. PEA d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n r a b b i t l e f t -7 a t r i a p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e o r p r o p r a n o l o l 1 x 10 M as d e s c r i b e d i n t h e m e t h o d s . B o t h . p r e t r e a t m e n t s c a u s e d a s i g n i f i c a n t (P < 0.05) d e c r e a s e , i n t h e maximum r e s p o n s e t o PEA. E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gm). +_ S.E.M. * S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l a t P < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 48 4 3 Dose of PEA (-log M) 49 o f t h e e f f e c t s o f t h e and r e c e p t o r b l o c k i n g a g e n t s , on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o t h e s e a g o n i s t s , w e r e c a r r i e d o u t i n a t r i a f r o m r e s e r p i n e p r e t r e a t e d r a b b i t s i n o r d e r t o m i n i m i z e t h e c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e . b. E f f e c t o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a n t a g o n i s t s The e f f e c t s o f t h e r e c e p t o r a n t a g o n i s t , p r o m e t h a z i n e and o f t h e r e c e p t o r a n t a g o n i s t c i m e t i d i n e on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e , 4 - m e t h y l h i s t a m i n e , i m p r o m i d i n e , a n d PEA i n t h e l e f t a t r i a a r e shown i n f i g u r e s 1 5 - 1 8 . B o t h p r o -— 6 — 6 m e t h a z i n e (2 x 10 M) and c i m e t i d i n e ( 1 x 10 M) p r o d u c e d a c o m p e t i t i v e b l o c k o f t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e ( f i g . 1 5 ) . I n c r e a s i n g t h e c o n c e n t r a t i o n o f c i m e t i d i n e t o _ 5 1 x 10 M c a u s e d a n e v e n f u r t h e r d i s p l a c e m e n t o f t h e h i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e t o t h e r i g h t ( f i g . 1 5 ) . C i m e t i d i n e , — 6 — 6 1 x 10 M and 3 x 10 M, s h i f t e d t h e 4 - m e t h y l h i s t a m i n e d o s e -r e s p o n s e c u r v e t o t h e r i g h t ; h o w e v e r , o n l y t h e s h i f t p r o d u c e d — 6 w i t h 3 x 10 M c o n c e n t r a t i o n o f c i m e t i d i n e was s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t ( f i g . 1 6 ) . P r o m e t h a z i n e (2 x 10 M) h a d l i t t l e e f f e c t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e o f 4 - m e t h y l h i s t a m i n e ( f i g . 1 6 ) . -6 -5 C i m e t i d i n e , 1 x 10 M and 1 x 10 M, p r o d u c e d a p a r a l l e l s h i f t o f t h e i m p r o m i d i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e , b u t o n l y t h e h i g h e r _ 5 c o n c e n t r a t i o n ( 1 x 10 M) c a u s e d a s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t d i s p l a c e m e n t o f t h e d o s e - r e s p o n s e c u r v e t o t h e r i g h t ( f i g . 1 7 ) . — 6 P r o m e t h a z i n e (2 x 10 M) d i d n o t s i g n i f i c a n t l y a l t e r t h e — 6 i m p r o m i d i n e r e s p o n s e ( f i g . 1 7 ) . P r o m e t h a z i n e (2 x 10 M) d i d 50 F i g u r e 15 The e f f e c t s ..of c i m e t i d i n e a n d p r o m e t h a z i n e p r e t r e a t m e n t on  t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t a m i n e . H i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n l e f t a t r i a f r o m r a b b i t s p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gm) +_.S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l , a t P < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 51 1.5 - I Dose of Histamine (-log M) 52 F i g u r e 16 The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e and p r o m e t h a z i n e p r e t r e a t m e n t on  t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e . 4 - M e t h y I h i s t a m i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n l e f t a t r i a f r o m r a b b i t s p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gm). +_ S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l a t . P < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . ,53 A Control O Cimetidine 1 0 " 6 M • Cimetidine 3 X 1 0 " 6 M A Promethazine Dose of 4-Methylhistamine (-logAA) 54 F i g u r e 17 The e f f e c t s o f c i m e t i d i n e a n d p r o m e t h a z i n e . p r e t r e a t m e n t on  t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e to' i m p r o m i d i n e . I m p r o m i d i n e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s w e re p e r f o r m e d i n l e f t a t r i a f r o m r a b b i t s p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gnr) +_ S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t . f r o m c o n t r o l a t P. < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 55 A Control O Cimetidine 1 0 ~ 6 M • Cimetidine 10 _ 5 M A Promethazine 2X1 0 " 6 M *T**—\ 1 I C 8 7 6 Dose of Impromidine (-log F i g u r e 18 •The e f f e c t o f p r o m e t h a z i n e and c i m e t i d i n e p r e t r e a t m e n t on t h e r e s p o n s e t o PEA. . PEA d o s e - r e s p o n s e c u r v e s were p e r f o r m e d i n l e f t a t r i a f r o m r a b b i t s p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean t e n s i o n (gm) +_ S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m c o n t r o l a t P < 0.05. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 57 Dose of PEA (-log M) 58 c a u s e a s i g n i f i c a n t d e c r e a s e i n t h e maximum i n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA ( f i g . 1 8 ) . I n c o n t r a s t , c i m e t i d i n e ( 1 x 10~ M) had no e f f e c t on t h e PEA r e s p o n s e ( f i g . 1 8 ) . A h i g h e r c o n c e n t r a -.-5 t i o n o f c i m e t i d i n e ( T x 10 M) a l s o d i d n o t a l t e r t h e PEA d o s e - r e s p o n s e c u r v e i n a t r i a o f n o n - r e s e r p i n i z e d r a b b i t s ( n o t s h o w n ) . c. pA2 s t u d i e s The above r e s u l t s s u g g e s t t h a t b o t h H^ and h i s t a m i n e r e c e p t o r s a r e p r e s e n t i n l e f t a t r i a . H o w e v e r , M c N e i l l a n d Verma (1978 ) r e p o r t e d t h e p'resence o f o n l y H-^ , and n o t , r e c e p t o r s i n r a b b i t l e f t a t r i a . T h e r e f o r e a p A 2 s t u d y ( A r u n l a k s h a n a and S c h i l d , 1959) u s i n g r i g h t and l e f t a t r i a was c a r r i e d o u t i n an a t t e m p t t o c o n f i r m o u r r e s u l t s . H i s t -amine was t h e a g o n i s t and c i m e t i d i n e was t h e a n t a g o n i s t . The p A 2 v a l u e i n t h e r i g h t a t r i a was 7.2 7 +_ 0.12 w i t h a c o r r e l a -t i o n c o e f f i c i e n t o f 0.971 +_ 0.008 , b u t i n t h e l e f t a t r i a t h e p A 2 v a l u e was 6.68 +_ 0.09 w i t h a c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t o f 0.984 + 0.004 ( f i g s . 19 and 2 0 ) . The p A 2 v a l u e i n t h e ' l e f t a t r i a was s t a t i s t i c a l l y d i f -f e r e n t t h a n t h a t i n t h e r i g h t a t r i a . A c c o r d i n g t o S c h i l d ( 1 9 5 7 ) d r u g s w h i c h a c t on t h e same r e c e p t o r s a r e e x p e c t e d t o g i v e r i s e t o t h e same p A 2 v a l u e . T h e r e f o r e , f r o m t h e r e s u l t s o f t h e p r e s e n t s t u d y , one c a n s p e c u l a t e t h a t d i f f e r e n t r e c e p t o r s may be i n v o l v e d i n t h e two r e s p o n s e s s t u d i e d . A 59 F i g u r e 19 The pA2 v a l u e f o r c i m e t i d i n e i n t h e r i g h t a t r i a . H i s t a m i n e was t h e a g o n i s t . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e l o g ( d r - 1 ) c a l c u l a t e d f r o m t h e mean E D 5 Q o f 5 o b s e r v a t i o n s . The p A 2 v a l u e was c a l c u l a t e d t o be 7.27+_ 0.12 w i t h a c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t o f 0.971 +_ 0.008 and a s l o p e o f -1.09 + 0.06. 60 3.0 H —\ 1 r 7 6 5 Dose of Cimetidine (- log M) 61 F i g u r e 2 0 The pAg, v a l u e , f o r c i m e t i d i n e i n the. . l e f t , a t r i a H i s t a m i n e was t h e a g o n i s t . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e l o g ( d r - 1 ) c a l c u l a t e d f r o m t h e mean ED^g o f 5 o b s e r v a t i o n s . The p A 2 v a l u e was c a l c u l a t e d t o be 6.68 +_ 0.09 w i t h a c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t o f 0.984 +_ 0.004 and a s l o p e o f -0.97 + 0.04. 62 3 . 0 H i 1 I 7 6 5 Dose of Cimetidine '(-log M ) 63 s t u d y by P a r s o n s ( 1 9 7 7 ) , i n v o l v i n g h i s t a m i n e s t i m u l a t i o n o f g u i n e a p i g a t r i u m , r e v e a l e d a pA~ o f 6.1 f o r c i m e t i d i n e . 3. The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e c h r o n o t r o p i c and i n o - t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s a. E f f e c t s o f t h e o p h y l l i n e on a t r i a l r a t e and f o r c e d e v e l o p m e n t The e f f e c t s o f t h e o p h y l l i n e on t h e r a t e and f o r c e o f • i s o l a t e d r a b b i t r i g h t and l e f t a t r i a , r e s p e c t i v e l y , a r e shown i n f i g u r e s 21 a n d 22. T h e o p h y l l i n e s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d a t r i a l r a t e and t e n s i o n . T h e s e e f f e c t s w e re n o t a l t e r e d by r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t . From t h e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s i n -4 f i g u r e s 21 and 22 a s u b m a x i m a l d o s e o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) was c h o s e n i n o r d e r t o i n v e s t i g a t e t h e e f f e c t s o f t h e o p h y l l i n e p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c and i n o t r o p i c e f f e c t s o f h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s . A l l o f t h e r e s p o n s e s w e re s t u d i e d i n r e s e r p i n e p r e t r e a t e d a n i m a l s . -4 b. E f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) on t h e c h r o n o t r o p i c  r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s i n t h e r i g h t a t r i a T h e o p h y l l i n e p r e t r e a t m e n t i n c r e a s e d t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o s u b m a x i m a l c o n c e n t r a t i o n s o f 4 - m e t h y l h i s t a m i n e (1 x 1 0 - l 4 M ) , i m p r o m i d i n e (1 x 10~ 8M) , and PEA (1 x l O ' ^ M ) , 64 F i g u r e 21 The e f f e c t o f . r e s e r p i n e . p r e t r e a t m e n t on t h e c h r o n o t r o p i c  r e s p o n s e t o t h e o p h y l l i n e . The c h a n g e i n r i g h t a t r i a l r a t e , p r o d u c e d by t h e o -p h y l l i n e , was n o t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) a f f e c t e d by r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t . E a c h p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean c h a n g e i n . r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) +_ S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 65 F i g u r e 2 2 The e f f e c t s o f r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t on t h e i n o t r o p i c  r e s p o n s e t o t h e o p h y l l i n e . The c h a n g e i n l e f t a t r i a l t e n s i o n , p r o d u c e d by t h e o -p h y l l i n e , was n o t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) a f f e c t e d by r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t . E a c h . p o i n t r e p r e s e n t s t h e mean c h a n g e i n t e n s i o n (gm) +_ S.E.M. Number o f a n i m a l s a r e shown i n p a r e n t h e s e s . 67 Control • Reserpine 5 4 3 Dose of Theophylline Hog M) 68 a s shown i n f i g u r e s 2 3-25. The c o m b i n e d e f f e c t o f t h e o --4 p h y l l i n e (3 x 10 M) and a n y one o f t h e h i s t a m i n e a g o n i s t s was g r e a t e r t h a n t h e r e s p o n s e t o e i t h e r a g o n i s t a l o n e . How-e v e r , t h e c o m b i n e d e f f e c t s were n o t s t a t i s t i c a l l y g r e a t e r t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l r e s p o n s e s . T h e r e f o r e , t h e c h r o n o -t r o p i c e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e was a d d i t i v e w i t h t h e c h r o n o -t r o p i c e f f e c t o f any one o f t h e s e h i s t a m i n e a g o n i s t s . T heo-p h y l l i n e d i d n o t p o t e n t i a t e t h e r e s p o n s e ( f i g s . 2 3 - 2 5 ) . -4 c. E f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s i n t h e l e f t a t r i a I n c o n t r a s t t o t h e r e s u l t s i n t h e r i g h t a t r i a , t h e com--4 b m e d e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) w i t h a n y one o f t h e h i s t a m i n e ( H ^ o r H 2 ) a g o n i s t s was n o t o n l y g r e a t e r t h a n t h e r e s p o n s e t o e i t h e r a g o n i s t a l o n e , b u t was a l s o s t a t i s t i c a l l y g r e a t e r t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l r e s p o n s e s ( f i g s . 2 6 - 2 8 ) . T h e r e f o r e , t h e o p h y l l i n e p o t e n t i a t e d t h e i n o t r o p i c e f f e c t s o f t h e h i s t a m i n e a g o n i s t s . T h i s p o t e n t i a t i o n r o f t h e i n o t r o p i c -4 r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e ( 1 x 10 M) and i m p r o m i d i n e — 8 —4 (1 x 10 M) by t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) was s i g n i f i c a n t l y _ 5 d e c r e a s e d by c i m e t i d i n e (1 x 10 M, n o t s h o w n ) . H o w e v e r , t h e -4 p o t e n t i a t i o n o f t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA (l.'.x 10 M) by -4 t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) was n o t s i g n i f i c a n t l y a f f e c t e d by - 5 - 6 c i m e t i d i n e ( 1 x 10 M) o r by p r o m e t h a z i n e (2 x 10 M, n o t s h o w n ) . H o w e v e r , t h i s p o t e n t i a t i o n was d e c r e a s e d by p r o p r a n o l o l — 6 (1 x 10 M, n o t s h o w n ) . 69 4. The e f f e c t o f h i s t a m i n e on r a b b i t a t r i a l c y c l i c AMP c o n - c e n t r a t i o n s _5 The e f f e c t o f h i s t a m i n e ( 1 x 10 M) on c y c l i c AMP l e v e l s i n i s o l a t e d r a b b i t r i g h t a n d l e f t a t r i a a r e shown i n T a b l e 1. T i s s u e s were f r o z e n a f t e r e x p o s u r e t o t h e d r u g f o r a t i m e (20 s e c o n d s ) w h i c h h a s b e e n p r e v i o u s l y r e p o r t e d t o shown i n c r e a s e d c y c l i c AMP l e v e l s ( M c N e i l l a n d Verma, 1 9 7 8 ) . C y c l i c AMP l e v e l s i n t h e h i s t a m i n e t r e a t e d r i g h t a n d l e f t a t r i a were n o t s t a t i s t i c a l l y d i f f e r e n t f r o m t h e c o n t r o l g r o u p . 70 F i g u r e 23 The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o  4 - m e t h y l h i s t a m i n e . The c o m b i n e d e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) a n d ' -4 and 4 - m e t h y l h i s t a m i n e ( 1 x 10. M) was n o t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) g r e a t e r t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l r e s p o n s e s . E a c h b a r g r a p h r e p r e s e n t s t h e mean c h a n g e i n r i g h t a t r i a l r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) +_ S.E.M. Numbers a s s o c i a t e d w i t h e r r o r b a r s i n d i c a t e number o f a n i m a l s . 71 4-Methylhistamine 10 - 4 M Theophylline 3 X 1 0 - 4 M Ztl Theophylline 3 x i 0 - 4 M + 4-Methylhistamine 10~ 4 M /(6) > 72 F i g u r e 24 . The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o  i m p r o m i d i n e . -4 The c o m b i n e d e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) and _ g i m p r o m i d i n e ( 1 x 10 M) was n o t s i g n i f i c a n t l y (P > 0.05) g r e a t e r t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l r e s p o n s e s . . E a c h b a r g r a p h r e p r e s e n t s t h e mean c h a n g e i n r i g h t a t r i a l r a t e ( b e a t s p e r m i n u t e ) +_ S.E.M. Numbers a s s o c i a t e d w i t h e r r o r b a r s i n d i c a t e number o f a n i m a l s . 73 74 F i g u r e 2 5 The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e c h r o n o t r o p i c , r e s p o n s e t o  PEA. -4 The c o m b i n e d e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) and PEA ( 1 x 10~ 4M) was n o t s i g n i f i c a n t l y .(P > 0.05) g r e a t e r t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l r e s p o n s e s . E a c h b a r g r a p h r e p r e s e n t s t h e mean c h a n g e i n r i g h t a t r i a l r a t e . ( b e a t s p e r m i n u t e ) + S.E.M. Numbers a s s o c i a t e d w i t h e r r o r b a r s i n d i c a t e number o f a n i m a l s . 75 PEA 1 0" 4M F i g u r e 26 The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o  4 - m e t h y I h i s t a m i n e . -4 The c o m b i n e d e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) and -4 4 - m e t h y l h i s t a m i n e ( 1 x 10 M) was s i g n i f i c a n t l y (P < 0.05) g r e a t e r t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l , r e s p o n s e s . E a c h b a r g r a p h r e p r e s e n t s t h e mean c h a n g e i n l e f t a t r i a l t e n s i o n (gm) + S.E.M. * S i g n i f i c a n t l y g r e a t e r (P < 0.05) t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l r e s p o n s e s . Numbers a s s o c i a t e d w i t h e r r o r b a r s i n d i c a t e number o f a n i m a l s . 77 — — 4-Methylhistamine 10~4M E B B Theophylline 3 x 10 ~ 4 M Theophylline 3X 1 0 - 4M + 4-Methylhistamine 10" T-78 F i g u r e 27 The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e ' on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o  i m p r o m i d i n e . -4 The c o m b i n e d e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) and _ g i m p r o m i d i n e ( 1 x 10 M) was s i g n i f i c a n t l y (P < 0.05) g r e a t e r t h a n t h e sum o f t h e . i n d i v i d u a l . r e s p o n s e s . E a c h b a r g r a p h r e p r e s e n t s t h e mean cha n g e i n l e f t a t r i a l t e n s i o n (gm) + S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y g r e a t e r (P < 0.05) t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l - r e s p o n s e s . Numbers a s s o c i a t e d w i t h e r r o r b a r s i n d i c a t e number o f a n i m a l s . 79 80 F i g u r e 2 8 The e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA. -4 The c o m b i n e d e f f e c t o f t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) and PEA ( 1 x 10 - l 4M) was s i g n i f i c a n t l y (P < 0.05) g r e a t e r t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l r e s p o n s e s . E a c h b a r g r a p h r e s p r e s e n t s t h e mean c h a n g e i n l e f t a t r i a l t e n s i o n (gm). + S.E.M. " S i g n i f i c a n t l y g r e a t e r (p < 0.05) t h a n t h e sum o f t h e i n d i v i d u a l r e s p o n s e s . Numbers a s s o c i a t e d w i t h e r r o r b a r s i n d i c a t e number o f a n i m a l s . 81 1.0 A ~ 0.5 A PEA l O ^ M _4 Theophylline 3«10-"*M Theophylline 3x10- 4AA • PEA 10"4M 82 T a b l e I The e f f e c t o f h i s t a m i n e on c y c l i c AMP c o n c e n t r a t i o n s . C y c l i c AMP l e v e l s i n r i g h t a nd l e f t i s o l a t e d a t r i a , -5 f o l l o w i n g e x p o s u r e t o h i s t a m i n e (1 x 10 M) f o r 20 s e c o n d s , were n o t s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h e c o n t r o l g r o u p (P > 0 . 0 5 ) . T i s s u e T i s s u e Sample C y c l i c AMP P r e p a r a t i o n s T r e a t m e n t Number Xfmol/mg t i s s u e ) R i g h t a t r i a None 4 482 + 14 _ 5 H i s t a m i n e 1x10 M 5 506 + 31 L e f t a t r i a None 6 388 + 3 5 _ 5 H i s t a m i n e 1x10 M 6 437 + 52 84 DISCUSSION H i s t a m i n e r e c e p t o r t y p e s p r e s e n t i n i s o l a t e d r a b b i t a t r i a w e r e i d e n t i f i e d b y m e a s u r e m e n t o f c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s i n t h e r i g h t a t r i a a n d i n o t r o p i c r e s p o n s e s i n t h e l e f t a t r i a . The r e s u l t s s u g g e s t t h a t b o t h H^ a n d E^ r e c e p t o r s a r e p r e s e n t i n t h e i s o l a t e d r i g h t a n d l e f t a t r i a . T h e s e c o n c l u s i o n s a r e b a s e d on t h e o b s e r v a t i o n t h a t h i s t a m i n e ( a d u a l H^ and E^ r e c e p t o r a g o n i s t ) p r o d u c e d a p o s i t i v e c h r o n o t r o p i c a nd i n o -t r o p i c r e s p o n s e i n t h e r i g h t a n d l e f t a t r i a r e s p e c t i v e l y ( f i g s . 6 and 1 5 ) . B o t h o f t h e s e r e s p o n s e s w e re c o m p e t i t i v e l y b l o c k e d by e i t h e r t h e H^ r e c e p t o r a n t a g o n i s t p r o m e t h a z i n e , o r by t h e E^ r e c e p t o r a n t a g o n i s t c i m e t i d i n e ( f i g s . 6 and 1 5 ) . The p r e s e n c e o f H^ and E^ r e c e p t o r t y p e s i n t h e r a b b i t a t r i a i s f u r t h e r i l l u s t r a t e d by r e s p o n s e s t o s p e c i f i c h i s t -a m i ne r e c e p t o r a g o n i s t s . P o s i t i v e c h r o n o t r o p i c a nd i n o t r o p i c e f f e c t s w e r e p r o d u c e d by t h e E^ r e c e p t o r a g o n i s t s 4 - m e t h y l -h i s t a m i n e a nd i m p r o m i d i n e ( f i g s . 7, 8, 16 and 1 7 ) . T h e s e e f f e c t s w e r e c o m p e t i t i v e l y b l o c k e d b y c i m e t i d i n e b u t n o t by p r o m e t h i a z i n e . PEA h a d a p o s i t i v e i n o t r o p i c e f f e c t w h i c h was — 6 b l o c k e d by p r o m e t h a z i n e (2 x 10 M, f i g . 1 8 ) . H o w e v e r , most o f t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e p r o d u c e d by PEA was due t o c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e ( f i g . 5 ) . B r o a d l e y and W i l s o n ( 1 9 7 8 ) h a v e a l s o r e p o r t e d t h a t PEA h a d b o t h d i r e c t a n d i n d i r e c t e f f e c t s t h r o u g h H^ r e c e p t o r s t i m u l a t i o n a nd c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e , r e s p e c t i v e l y . M c N e i l l a n d Verma ( 1 9 7 8 ) a l s o r e p o r t e d t h e p r e s e n c e o f 85 H-^  and E^ r e c e p t o r s i n t h e r a b b i t i s o l a t e d r i g h t a t r i a , b u t f o u n d o n l y r e c e p t o r s i n t h e r a b b i t i s o l a t e d l e f t a t r i a . T h e s e w o r k e r s showed t h a t t h e r e c e p t o r a n t a g o n i s t m e t i -amide (1 x 10 M) b l o c k e d t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o h i s t -a mine i n r i g h t a t r i a . However l a t e r i n v e s t i g a t i o n s showed -5 t h a t h i g h e r c o n c e n t r a t i o n s o f m e t i a m i d e (1: x 10 M ) , and I C I 1 2 5 , 2 1 1 , a r e c e n t l y d e v e l o p e d s p e c i f i c H^ a n t a g o n i s t ( Y e l l i n e t a l . , 1 9 7 9 ) , d i d i n f a c t b l o c k t h e h i s t a m i n e p r o -d u c e d i n o t r o p i c r e s p o n s e i n t h e l e f t a t r i a ( L o n g h u r s t a n d M c N e i l l , u n p u b l i s h e d o b s e r v a t i o n s ) . The r e s u l t s o f t h e p r e s e n t s t u d y a l s o r e v e a l e d d i f f e r e n c e s b e t w e e n t h e r e s p o n s e s o f t h e r i g h t and l e f t a t r i a w i t h r e s p e c t t o t h e i n t e r a c t i o n s o f s p e c i f i c E^ r e c e p t o r a g o n i s t s a nd g a n t a g o n i s t s . F o r i n s t a n c e , c i m e t i d i n e 1 x 10 M s i g n i f i c a n t l y a n t a g o n i z e d t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s t o t h e E^ r e c e p t o r -4-a g o n i s t s 4 - m e t h y I h i s t a m i n e (3 x 10 M) and i m p r o m i d i n e — 8 (3 x 10 M) i n t h e r i g h t a t r i a , b u t h a d no s i g n i f i c a n t e f f e c t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o t h e s e a g o n i s t s i n t h e l e f t a t r i a ( f i g s . 7, 8, 16 and 1 7 ) . H i g h e r c o n c e n t r a t i o n s o f c i m e t i d i n e (3 x 10 M and 1 x 10 M) d i d s i g n i f i c a n t l y b l o c k t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s i n t h e l e f t a t r i a t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e a n d i m p r o m i d i n e ( f i g s . ' 7 , 8 , 16 and 1 7 ) . 86 F u r t h e r m o r e , a S c h i l d - p l o t ( A r u n l a k s h a n a a n d S c h i l d , 1959) o f t h e c h r o n o t r o p i c a n d i n o t r o p i c r e s p o n s e s o f t h e r i g h t a n d l e f t a t r i a r e s p e c t i v e l y , t o h i s t a m i n e i n t h e p r e s e n c e o f c i m e t i d i n e showed some d i f f e r e n c e s . The p A 2 v a l u e f o r c i m e t i d i n e i n t h e r i g h t a t r i a (7.27 +_ 0.12) was s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h a t i n t h e l e f t a t r i a (6.68 + 0.09, f i g s . 19 and 2 0 ) . As t i s s u e s w i t h s i m i l a r r e c e p t o r s a r e e x p e c t e d t o g i v e t h e same p A 2 v a l u e s ( A r u n l a k -s h a n a a nd S c h i l d , 1 9 5 9 ) , t h e p o s s i b l i t y o f d i f f e r e n c e s i n r e c e p t o r s b e t w e e n t h e r i g h t a n d l e f t a t r i a d o e s e x i s t . T h e s e o b s e r v e d d i f f e r e n c e s i n t h e e f f e c t s o f t h e H 2 r e c e p t o r a n t a g o n i s t on t h e r i g h t a n d l e f t a t r i a may p o s s i b l y be a t t r i b u t e d . t o t h e f a c t t h a t two d i f f e r e n t r e s p o n s e s were m e a s u r e d . I n t h e r i g h t a t r i a t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e was m o n i t o r e d , b u t i n t h e l e f t a t r i a t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e was s t u d i e d . T h e r e f o r e , t h e d e g r e e o f s t i m u l a t i o n o f t h e h i s t -amine r e c e p t o r may v a r y w i t h t h e t y p e o f r e s p o n s e e l i c i t e d . T h i s p r o b l e m c a n be f u r t h e r i n v e s t i g a t e d by c o m p a r i n g t h e 87 i n o t r o p i c r e s p o n s e s o f e l e c t r i c a l l y d r i v e n r i g h t a t r i a , w i t h t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s o f t h e l e f t a t r i a . R i g h t a t r i a , w i t h t h e s i n o - a t r i a l node r e m o v e d , c a n be a r t i f i c a l l y s t i m u l a t e d by e l e c t r i c a l l y p a c i n g . T e n n e r a n d M c N e i l l ( 1 9 7 8 ) showed t h a t t h e h i s t a m i n e i n d u c e d i n o t r o p i c r e s p o n s e i n g u i n e a p i g e l e c t r i c a l l y p a c e d l e f t a t r i a v a r i e s w i t h f r e q u e n c y o f s t i -m u l a t i o n . T h e r e f o r e , when c o m p a r i n g t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s o f t h e r i g h t a t r i a w i t h t h a t o f t h e l e f t a t r i a , t h e r e s p o n s e s s h o u l d be c o m p a r e d a t s i m i l a r f r e q u e n c i e s t o c o n t r o l f o r p o s s i b l e v a r i a b i l i t y due t o d i f f e r e n c e s i n f r e q u e n c y o f s t i m u l a t i o n . S u c h an i n v e s t i g a t i o n o f t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s o f t h e r i g h t a n d l e f t a t r i a w o u l d a l l o w f o r a more v a l i d com-p a r i s o n o f t h e h i s t a m i n e r e c e p t o r t y p e s b e t w e e n t h e r i g h t a n d l e f t a t r i a . I t i s a l s o p o s s i b l e t h a t t h e r e may be d i f f e r e n t k i n d s o f H 2 r e c e p t o r s m e d i a t i n g t h e c h r o n o t r o p i c a n d i n o t r o p i c r e s p o n s e s . A' c o n c e p t o f H 2 r e c e p t o r s u b t y p e s h a s b e e n p o s t u l a t e d by Chand and E y r e (197 8) who showed t h a t H 2 a n t a g o n i s t s ( m e t i a m i d e and b u r i m a m i d e ) f a i l e d t o b l o c k t h e r e l a x a n t r e s p o n s e s p r o d u c e d by H 2 a g o n i s t s ( d i m a p r i t a n d 4 - m e t h y l h i s t a m i n e ) on h o r s e t r a c h e a . S i m i l a r r e s p o n s e s w e r e a l s o o b s e r v e d i n t h e r a b b i t t r a c h e a ( C h a n d et_ a l . , 1 9 7 9 ) and c a t b r o n c h u s ( C h a n d a n d E y r e , 1 9 7 7 ) . T h e s e a u t h o r s s u g g e s t t h a t t h i s " a t y p i c a l " r e c e p t o r may be f u n c t i o n a l l y s i m i l a r t o t h e c o n v e n t i o n a l H 2 r e c e p t o r a n d may be a n i s o -r e c e p t o r o f H 2 , a n a l o g o u s t o t h e s u b g r o u p i n g o f B-, and 3 0 88 a d r e n o c e p t o r s . The e x i s t e n c e o f t h e t h i r d t y p e o f h i s t a m i n e r e c e p t o r h a s a l s o b e e n p r o p o s e d by F l e i s c h a nd C a l k i n s ( 1 9 7 6 ) , C l a r k e t a l . ( 1 9 7 7 ) and F j a l l a n d ( 1 9 7 9 ) . F j a l l a n d ( 1 9 7 9 ) b a s e d h i s o b s e r v a t i o n s on t h e f i n d i n g s t h a t t h e r e l a t i v e p o t e n c i e s o f r e c e p t o r a n t a g o n i s t s on t h e e l e c t r i c a l l y i n d u c e d t w i t c h e s i n t h e g u i n e a p i g i l e u m were n o t t h e same as t h e r e l a t i v e p o t e n c i e s o f t h e H 2 a n t a g o n i s t s on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s i n t h e g u i n e a p i g a t r i u m . The f i n d i n g s o f F j a l l a n d may be a n a l o g o u s t o t h o s e o f t h e p r e s e n t s t u d y , as t h e p o t e n c y o f c i m e t i d i n e on t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e was a l s o f o u n d t o be d i f f e r e n t t h a n t h a t on t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e , a s e v i d e n c e d by t h e d i f f e r e n c e s i n t h e p A 2 v a l u e s ( f i g s . 19 a n d 2 0 ) . Hughes ( 1 9 7 8 ) was a l s o a b l e t o s t i m u l a t e H^ and H 2 r e c e p t o r s i n t h e r a b b i t a t r i a . She c a r r i e d o u t t h e i n v e s t i -g a t i o n i n s p o n t a n e o u s l y b e a t i n g a t r i a l p a i r s . However t h e r e a r e some d i f f i c u l t i e s i n i n t e r p r e t i n g h e r d a t a . Hughes u s e d 3 - ( 2 - a m i n o e t h y l ) - 1 , 2 , 4 - t r i a z o l e a s t h e s p e c i f i c H^ r e c e p t o r a g o n i s t , and 2 - ( 2 - a m i n o e t h y l ) p y r a z o l e a s t h e s p e c i f i c H 2 r e c e p t o r a g o n i s t . B o t h o f t h e s e compounds h a v e b e e n r e p o r t e d t o p o s s e s s v e r y l i t t l e h i s t a m i n e r e c e p t o r s p e c i f i c i t y ( B l a c k e t a l . , 1972 ; D u r a n t e t a l . , 1975 ; M c N e i l l and V e r m a , 1 9 7 4 a ) . M c N e i l l and Verma ( 1 9 7 4 a ) were a b l e t o b l o c k t h e i n o t r o p i c e f f e c t s , on i s o l a t e d p e r f u s e d g u i n e a p i g h e a r t , p r o d u c e d by 3 - ( 2 - a m i n o e t h y l ) - 1 , 2 , 4 - t r i a z o l e and 2 - ( 2 - a m i n o e t h y l ) p y r a z o l e , w i t h b u r i m a m i d e , a s p e c i f i c , c o m p e t i t i v e H ? r e c e p t o r b l o c k i n g 89 a g e n t . A l s o b o t h o f t h e s e .compounds i n c r e a s e d c y c l i c AMP p r i o r t o an i n c r e a s e i n c o n t r a c t i l i t y . T h i s i n c r e a s e i n c y c l i c AMP was a n t a g o n i z e d w i t h b u r i m a m i d e , i n d i c a t i n g t h a t b o t h com-pounds p o s s e s s r e c e p t o r a c t i v i t y . F u r t h e r m o r e , Hughes d i d n o t t r y t o b l o c k t h e e f f e c t s o f t h e s e h i s t a m i n e a g o n i s t s w i t h s p e c i f i c h i s t a m i n e r e c e p t o r a n t a g o n i s t s . Hughes d i d n o t c o n t r o l , f o r t h e p o s s i b i l i t y o f c a t e c h o l -amine r e l e a s e by t h e h i s t a m i n e . a g o n i s t s . The p r e s e n t r e s u l t s s u g g e s t t h a t c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e d o e s i n d e e d o c c u r w i t h some h i s t a m i n e a g o n i s t s ( f i g s . 5, 12 and 1 4 ) . P r o p r a n o l o l or. r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t d e p r e s s e d t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o 4 - m e t h y l h i s t a m i n e a nd PEA ( f i g s . 12 and 1 4 ) . The c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e t o PEA was a l s o d e c r e a s e d by p r o p r a n o l o l o r r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t ( f i g . 5 ) . T h e r e f o r e t h e a n i m a l s i n t h e p r e s e n t s t u d y were p r e t r e a t e d w i t h r e s e r p i n e t o e l i m i n a t e t h e p o s s i -b i l i t y o f c a t e c h o l a m i n e r e l e a s e . T h e r e a r e many b i o c h e m i c a l s t u d i e s s h o w i n g t h a t . o n l y ^ 5 b u t n o t H-^ , r e c e p t o r m e d i a t e d r e s p o n s e s a r e a s s o c i a t e d w i t h i n c r e a s e s i n c y c l i c AMP c o n t e n t ( M c N e i l l a nd Verma, 197 3, 1978 ; R e i n h a r d t e t a l . , 1977-; Verma and M c N e i l l , 1976 , 1977 , 1 9 7 8 ) . Hughes ( 1 9 7 8 ) , on t h e o t h e r h a n d , s u g g e s t s t h a t b o t h H^ and r e c e p t o r s t i m u l a t i o n c a n a c t i v a t e a d e n y l c y c l a s e and t h e r e f o r e i n c r e a s e t h e f o r m a t i o n o f c y c l i c AMP. H u g h e s , h o w e v e r , d i d n o t m e a s u r e t h e c y c l i c AMP l e v e l s t o s u p p o r t h e r c l a i m . She b a s e d h e r c o n c l u s i o n on t h e p r e m i s e t h a t r e s p o n s e s t o H n and H 9 r e c e p t o r a g o n i s t s w e re p o t e n t i a t e d by 90 t h e p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t o r s , p a p a v e r i n e and t h e o p h y l l i n e . Hughes h y p o t h e s i z e d t h a t , s i n c e p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t i o n i n c r e a s e s t h e l e v e l s o f c y c l i c AMP, t h e o b s e r v e d p o t e n t i a t i o n o f t h e H-^  and r e c e p t o r m e d i a t e d r e s p o n s e s by. t h e p h o s p h o -d i e s t e r a s e i n h i b i t o r s must t h e r e f o r e h a v e b e e n due t o t h e i n c r e a s e d c y c l i c AMP c o n t e n t . T h i s i s an i n t e r e s t i n g h y p o -t h e s i s b u t t h e r e a r e some p r o b l e m s w i t h t h i s t y p e o f an e x p e r i m e n t . • A l t h o u g h p a p a v e r i n e and t h e o p h y l l i n e a r e a b l e t o p r o d u c e an i n c r e a s e i n c y c l i c AMP l e v e l s t h r o u g h p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t i o n , o t h e r m e c h a n i s m s may be i n v o l v e d i n t h e c a r d i a c e f f e c t s p r o d u c e d by t h e s e d r u g s ( M c N e i l l e t a l . , 1 9 7 2 ; S c h o l z , 1 9 7 1 ; K u k o v e t z and P S c h , 19 7 2 ; Donges e t a l . , 1 9 7 7 ; K o r t h , 1 9 7 8 ) . M c N e i l l e t a l . ( 1 9 7 2 ) r e p o r t e d t h a t t h e e f f e c t s o f p a p a v e r i n e and t h e o p h y l l i n e i n t h e g u i n e a p i g h e a r t d i d n o t c o r r e l a t e w e l l w i t h t h e i r . a b i l i t i e s t o i n h i b i t p h o s p h o -d i e s t e r a s e . M c N e i l l e t a l . ( 1 9 7 4 ) showed t h a t t h e s e a g e n t s c a n p r o d u c e an i n c r e a s e i n c a r d i a c c o n t r a c t i l e f o r c e w i t h o u t i n c r e a s i n g c y c l i c AMP l e v e l s . Donges e t a l . ( 1 9 7 7 ) r e p o r t e d t h a t t h e t h e o p h y l l i n e p r o d u c e d i n c r e a s e i n f o r c e o f c o n t r a c t i o n , i n t h e g u i n e a p i g l e f t a t r i a , was c l o s e l y r e l a t e d t o an i n -c r e a s e i n c y c l i c AMP. However,, a d e c l i n e i n f o r c e o f c o n -t r a c t i o n o c c u r r e d w h i l e t h e c y c l i c AMP l e v e l s r e m a i n e d e l e v a t e d . T h e r e i s e v i d e n c e t h a t d r u g s e n h a n c e m y o c a r d i a l c o n -t r a c t i l i t y by i n c r e a s i n g t h e a v a i l a b i l i t y o f c e l l u l a r f r e e 91 c a l c i u m f o r t h e i n t e r a c t i o n w i t h c o n t r a c t i l e p r o t e i n s ( L a n g e r , 1 9 7 3 ) . I t h a s b e e n shown t h a t . t h e o p h y l l i n e a c c e l e r a t e s t h e 45 u p t a k e o f Ca and i n c r e a s e s , t h e s l o w i n w a r d c u r r e n t ( S c h o l z and R e u t e r , 1 9 7 6 ) . D i b u t y r y l - c y c l i c AMP h a s a l s o b e e n shown 4 5 t o i n c r e a s e m y o c a r d i a l Ca e x c h a n g e ( M e i n e r t z et_ a l . , 1 9 7 3 ) . I t h a s t h e r e f o r e b e e n p r o p o s e d t h a t t h e c a r d i a c e f f e c t s o f t h e o p h y l l i n e a r e m a i n l y due t o c a l c i u m i n v o l v e m e n t ' a n d n o t t o p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t i o n ( S c h o l z , 1 9 7 1 ; K u k o v e t z and P o c h , 1972 ; M a r t i n e z and . M c N e i l l . , . 1977 ) . T h e r e f o r e , t h e p o t e n t i a t i o n o f t h e r e s p o n s e s t o t h e and E^ r e c e p t o r a g o n i s t s t h a t Hughes ( 1 9 7 8 ) a t t r i b u t e d t o i n c r e a s e d c y c l i c AMP l e v e l s , t h r o u g h p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t i o n , may i n f a c t n o t be t o t a l l y c o r r e c t . The H^ and E^ r e c e p t o r a g o n i s t s t h a t Hughes c h o s e w ere n o t v e r y s e l e c t i v e ( B l a c k e t a l . , 1 9 7 2 ; M c N e i l l and Verma 1 9 7 4 a ) . a n d t h e e f f e c t s t h a t she a t t r i b u t e d t o H^ r e c e p t o r a c t i v a t i o n may i n f a c t h a v e been, due t o E^ r e c e p t o r a c t i v a t i o n . T h e r e f o r e e x p e r i m e n t s i n t h e p r e s e n t s t u d y w e re p e r f o r m e d u s i n g a p r o t o c o l s i m i l a r . t o t h a t . o f H u g h e s , b u t more s e l e c t i v e H^ and E^ r e c e p t o r a g o n i s t s w e re e m p l o y e d . T h e o p h y l l i n e was c h o s e n as t h e p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t o r . The r e s u l t s o f t h e p r e s e n t s t u d y i n d i c a t e t h a t t h e o p h y l l i n e c a n p o t e n t i a t e t h e i n o t r o p i c e f f e c t s o f b o t h H^ and E^ r e c e p t o r a g o n i s t s ( f i g s . 2 6 - 2 8 ) . H o w e v e r . t h e . c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s t o t h e H^ and E^ r e c e p t o r a g o n i s t s were n o t p o t e n t i a t e d . b y t h e o p h y l l i n e ( f i g s . 2 3 - 2 5 ) . 92 I t I s p o s s i b l e t h a t o u r l a c k o f f i n d i n g a p o t e n t i a t i o n o f t h e c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e s t o t h e and E^ r e c e p t o r a g o n i s t s by t h e o p h y l l i n e may. h a v e b e e n masked by u s i n g r e l a t i v e l y h i g h c o n c e n t r a t i o n s o f .the t e s t d r u g s . T h e r e a p p e a r s t o be a maximum c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e w h i c h t h e i s o -l a t e d r i g h t a t r i a a r e n o t a b l e . t o e x c e e d . T h e r e f o r e f u r t h e r s t u d i e s o f t h e c h r o n o t r o p i c e f f e c t s i n t h e r i g h t a t r i a s h o u l d be c a r r i e d o u t u s i n g l o w e r c o n c e n t r a t i o n s o f t h e and E^ a g o n i s t s . The o b s e r v e d p o t e n t i a t i o n o f t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e t o -4 -8 4 - m e t h y l h i s t a m i n e (1 x 10 M) and i m p r o m i d i n e C l x 10 M) by -4 t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) was s i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e d by t h e _ 5 r e c e p t o r a n t a g o n i s t c i m e t i d i n e ( 1 x 10 M, n o t s h o w n ) . However, t h e o b s e r v e d p o t e n t i a t i o n o f t h e i n o t r o p i c e f f e c t o f -4 -4 PEA C l x 10 M) by t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) was n o t s i g n i f i c a n t l y _ 5 a f f e c t e d by c i m e t i d i n e (1 x 10 M) o r by t h e H^ r e c e p t o r — 6 a n t a g o n i s t p r o m e t h a z i n e (2 x 10 M, n o t s h o w n ) . However t h e p o t e n t i a t i o n was d e c r e a s e d by t h e b e t a a d r e n e r g i c a n t a g o n i s t p r o p r a n a l o l (1 x 10 M). I t i s t h u s p o s s i b l e t h a t a t l e a s t some o f t h e i n c r e a s e d i n o t r o p i c r e s p o n s e t o t h e E^ a g o n i s t s -4 by t h e o p h y l l i n e (3 x 10 M) may be a t t r i b u t e d t o a n i n c r e a s e i n t h e c y c l i c AMP l e v e l s . B u t s i n c e t h e H^ a n t a g o n i s t p r o -m e t h a z i n e (2 x 10 M) h a d no e f f e c t on t h e c o m b i n e d PEA-t h e o p h y l l i n e r e s p o n s e i t i s u n l i k e l y t h a t c y c l i c AMP i s i n v o l v e d i n H^ r e c e p t o r i n d u c e d r e s p o n s e s . As p r o p r a n o l o l — 6 (1 x 10 M) d i d d e c r e a s e t h e c o m b i n e d e f f e c t o f PEA and 93 t h e o p h y l l i n e , i t seems l i k e l y t h a t t h e r e s e r p i n e p r e t r e a t m e n t o f t h e a n i m a l s d i d n o t c o m p l e t e l y d e p l e t e t h e t i s s u e s o f c a t e c h o l a m i n e s . B e t a r e c e p t o r s t i m u l a t i o n i s a s s o c i a t e d w i t h i n c r e a s e d c y c l i c AMP ( 0 y e , 1975 B u t c h e r e t a l . , 1965 ) , and t h e n u c l e o t i d e s may be i n v o l v e d i n t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e . T h i s may e x p l a i n o u r o b s e r v e d . p o t e n t i a t i o n o f t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o a g o n i s t s by t h e o p h y l l i n e . T h e r e i s c o n s i d e r a b l e e v i d e n c e t h a t r e s p o n s e s w h i c h a r e m e d i a t e d t h r o u g h r e c e p t o r s t i m u l a t i o n a r e a s s o c i a t e d w i t h i n c r e a s e d c y c l i c AMP l e v e l s ( K l e i n a nd L e v y , 1 9 7 1 ; R e i n h a r d t e t a l . , 1 9 7 7 ) . M c N e i l l and Verma ( 1 9 7 8 ) h a v e shown i n c r e a s e d l e v e l s o f c y c l i c AMP i n t h e i s o l a t e d r a b b i t r i g h t a t r i a ( a t i s s u e k n o w n . t o c o n t a i n r e c e p t o r s ) , f o l l o w i n g e x p o s u r e o f _ 5 t h e a t r i a t o h i s t a m i n e (1 x 10 M) f o r 2 0 s e c o n d s . We w e re u n a b l e t o show c h a n g e s i n t h e c y c l i c AMP l e v e l s u n d e r s i m i l a r c o n d i t i o n s ( T a b l e I ) . An i n c r e a s e i n c y c l i c AMP h a s . b e e n shown t o p r e c e d e t h e i n c r e a s e i n r e s p o n s e by s e v e r a l s e c o n d s (Verma and M c N e i l l , 1 9 7 7 a ) . I n t h e p r e s e n t s t u d y t h e r e was some i n c r e a s e i n t h e c h r o n o t r o p i c and i n o t r o p i c r e s p o n s e a f t e r e x p o s u r e o f t h e a t r i a t o h i s t a m i n e (1 x 10 ^M) f o r 2 0 s e c o n d s . But i t t o o k a t l e a s t t h r e e m i n u t e s t o . r e a c h a maximum r e s p o n s e i n t h e r i g h t a t r i a , and a t l e a s t f i v e m i n u t e s i n t h e l e f t a t r i a . T h e r e f o r e , f u r t h e r i n v e s t i g a t i o n s o f c y c l i c AMP l e v e l s s h o u l d be c a r r i e d o u t a f t e r e x p o s u r e o f t h e -5 a t r i a l t i s s u e t o h i s t a m i n e (1 x 10 M) a t d i f f e r e n t t i m e i n t e r v a l s . The i n c r e a s e i n . c y c l i c AMP l e v e l s a f t e r e x p o s u r e 94 o f t h e t i s s u e t o h i s t a m i n e f o r o n l y 20 s e c o n d s may h a v e b e e n t o o s m a l l t o d e t e c t i n t h e p r e s e n t s t u d y . C l o s e r a n a l y s e s o f o u r r e s u l t s ( T a b l e I ) shows a . s m a l l i n c r e a s e i n c y c l i c AMP a f t e r e x p o s u r e o f t h e t i s s u e s t o h i s t a m i n e . 95 REFERENCES A r u n l a k s h a n a , 0. and S c h i l d , H.O. 195 9. Some q u a n t i t a t i v e u s e s o f d r u g a n t a g o n i s t s . B r . J . P h a r m a c o l . 1_4, 48-58. A s h , A.S.F. and S c h i l d , H.O. 1966. R e c e p t o r s m e d i a t i n g some a c t i o n s o f h i s t a m i n e . B r . J . P h a r m a c o l . C h e m o t h e r . 27 , 427-439. B e s t , C.H., D a l e , H.H., D u d l e y , H.W., and T h o r p e , W.V. 1927. The n a t u r e o f t h e v a s o d i l a t o r c o n s t i t u e n t s o f c e r t a i n t i s s u e e x t r a c t s . J . P h y s i o l . ( L o n d . ) 6_2 , 397-417. B l a c k , J.W., D u n c a n , W.A.M., D u r a n t , C . J . , G a n e l l i n , C.R., an d P a r s o n s , E.M. 1972. D e f i n i t i o n and a n t a g o n i s m o f h i s t a m i n e H 9 - r e c e p t o r s . N a t u r e , 2 36, 385-390. B o v e t , D., H o r c l o i s , R., and W a l t h e r t , F. 1944. P r o p r i e t e s a n t i h i s t a m i n i q u e s de l a N - p - m e t h o x y b e n z y l - N - d i m e t h y l -a m i n o e t h y l a a m i n o - p y r i d i n e . C r . S e a n c . S o c . B i o l . 1 3 8, 99-100. B o v e t , D. and S t a u b , A. 1937. A c t i o n p r o t e c t r i c e d es e t h e r s p h e n o l i q u e s an c o u r s de 1 ' i n t o x i c a t i o n h i s t a m i n i q u e . C r . S e a n c . S o c . B i o l . 12 4 , 547-549. B r o a d l e y , K . J . and W i l s o n , C. 1978. The b i p h a s i c i n o t r o p i c r e s p o n s e t o g u i n e a - p i g i s o l a t e d a t r i a t o h i s t a m i n e r e c e p t o r a g o n i s t s . B r . J . P h a r m a c o l . 64 ( 3 ) , 387p-388p. B u t c h e r , R-.W., Ho, R . J . , Meng, H.C and S u t h e r l a n d , E.W. 1965. The measurement o f a d e n o s i n e 3',5'-monophosphate i n t i s s u e s a n d t h e r o l e o f t h e c y c l i c n u c l e o t i d e i n t h e l i p o l y t i c r e s p o n s e o f f a t t o e p i n e p h r i n e . J . B i o l . " Chem. 2 4 0 ( 1 1 ) , 4 5 1 5 - 4 5 2 3 . C h a n d , N. and E y r e , P. 1977. A t y p i c a l ( r e l a x a n t ) r e s p o n s e t o h i s t a m i n e i n c a t b r o n c h u s . A g e n t s A c t i o n s , 7 ( 2 ) , 183-190. Chand, N. a n d E y r e , P. 1978. S p a s m o l y t i c a c t i o n o f h i s t -amine i n a i r w a y smooth m u s c l e o f h o r s e . A g e n t s A c t i o n s , 8 ( 3 ) , 1 9 1-198. C h a n d , N., E y r e , P., and De R o t h , L. 197 9. R e l a x a n t a c t i o n o f h i s t a m i n e on r a b b i t t r a c h e a : p o s s i b l e e x i s t e n c e o f t h i r d h i s t a m i n e r e c e p t o r s u b t y p e . R e s . Commun. Chem. P a t h o l . P h a r m a c o l . 23 (2 ) , 2 1 1 - 2 2 1 . 96 C h e n o w e t h , M.B. and K o e l l e , E.S. 1946. An i s o l a t e d h e a r t p e r f u s i o n s y s t e m a d a p t e d t o t h e d e t e r m i n a t i o n o f n o n -g a s e o u s m e t a b o l i t e s . J . L a b . C l i n . Med. 3_1: 600-608. C l a r k , R.A.F., S a n d l e r , J . A., G a l l i n , J . I . and K a p l a n , A.P. 1977. H i s t a m i n e m o d u l a t i o n o f e o s i n o p h i l m i g r a t i o n . J . Immun. 1 1 8 ( 1 ) , 1 3 7 - 1 4 5 . C o l e b a t c h , H.J.H. 1970. A d r e n e r g i c m e c h a n i s m s i n t h e e f f e c t s o f h i s t a m i n e i n t h e p u l m o n a r y c i r c u l a t i o n o f t h e c a t . C i r . R e s . 26_, 379-396. D a l e , H.H. 192 9. Some c h e m i c a l f a c t o r s i n t h e c o n t r o l o f t h e c i r c u l a t i o n . L a n c e t , 1, 1 1 7 9 - 1 1 8 3 , 1 2 3 3 - 1 2 3 7 , 1285-1290. D a l e , H.H. and L a i d l a w , P.P. 1910. The p h y s i o l o g i c a l a c t i o n o f B - i m i d a z o l y l e t h y l a m i n e . J . P h y s i o l . ( L o n d . ) 4 1 , 318-344. D a l e , H.H. and L a i d l a w , P.P. 1 9 1 1 . The p h y s i o l o g i c a l a c t i o n o f 8 - i m i d a z o l y l e t h y l a m i n e . J . P h y s i o l . ( L o n d . ) 4 3 , 182-195. D a l e , H.H., and L a i d l a w , P.P. 1919. H i s t a m i n e s h o c k . J . P h y s i o l . ( L o n d . ) 5_2 , 355-390. Dews, P.B. and Graham, J.D.P. 1946. A n t i h i s t a m i n e s u b s t a n c e 2786 R.P. B r . J . P h a r m a c o l . 1, 278-286. D o n g e s , C , H e i t m a n n , M., J u n g b l u t h , H., M e i n e r t z , T., S c h m e l z l e , B., and S c h o l z , H. 1977. E f f e c t i v e n e s s s o f t h e o p h y l l i n e t o i n c r e a s e c y c l i c AMP l e v e l s a n d f o r c e o f c o n t r a c t i o n i n e l e c t r i c a l l y p a c e d g u i n e a - p i g a u r i c l e s . C o m p a r i s o n w i t h i s o p r e n a l i n e , c a l c i u m and o u a b a i n . Naunyn S c h m i e d e b e r g s A r c h . P h a r m a c o l . 3 0 1 , 8 7-97. D o u g l a s , W.W. 1975. H i s t a m i n e and a n t i h i s t a m i n e : 5 - h y d r o x y -t r y p t a m i n e and a n t a g o n i s t s . I n t h e P h a r m a c o l o g i c a l B a s i s o f T h e r a p e u t i c s 5 t h E d . E d i t e d by L.S. Goodman and A. G i l m a n , M a c M i l l a n , New Y o r k , p. 5 90-629. D u r a n t , G . J . , D u n c a n , W.A.M., G a n e l l i n , C.R., P a r s o n s , M.E., B l a k e m o r e , R.C. and R a s m u s s e n , A.C. 1978. I m p r o m i d i n e (S.K. £ F. 92676) i s a v e r y p o t e n t a n d s p e c i f i c a g o n i s t f o r h i s t a m i n e H 9 r e c e p t o r s . N a t u r e , 276 (5686 ) , 4 0 3 - 4 0 5 . D u r a n t , G . J . , G a n e l l i n , C.R., and P a r s o n s , M.E. 1975. C h e m i c a l d i f f e r e n t i a t i o n o f h i s t a m i n e H-]_- and H 2 - r e c e p t o r a n t a g o n i s t s . J . Med. Chem. 18_, 905-909. 97 D u t t a , M.K. 1949. Some p h a r m a c o l o g i c a l p r o p e r t i e s common t o a n t i h i s t a m i n e compounds. B r . J . P h a r m a c o l . E x p . Ch e m o t h e r 4, 281-289. F j a l l a n d , B. 1979. E v i d e n c e f o r t h e e x i s t e n c e o f a n o t h e r t y p e o f h i s t a m i n e ^ - r e c e p t o r i n g u i n e a - p i g i l e u m . J . Pharm. P h a r m a c o l . 3_1, 5 0-51. F l e i s c h , J.H. a n d C a l k i n s , P . J . 1976. C o m p a r i s o n o f d r u g -i n d u c e d r e s p o n s e s o f r a b b i t t r a c h e a a n d b r o n c h u s . J . A p p l . P h y s i o l . 4 1 ( 1 ) , 62. -F o l k o w , B., H a e g e r , K. a n d K a h l s o n , G. 1948. O b s e r v a t i o n s on r e a c t i v e h y p e r a e m i a a s r e l a t e d t o h i s t a m i n e , on d r u g s a n t a g o n i s i n g v a s o d i l a t i o n i n d u c e d by h i s t a m i n e and on v a s o d i l a t o r p r o p e r t i e s o f a d e n o s i n e t r i p h o s p h a t e . A c t a P h y s i o l . S c a n d . 15_, 264-278. H a l p r e n , B.N. 1942. L e s a n t i h i s t a m i n i q u e s de s y n t h e s e : e s s a i s de c h i m i o t h e r a p i e - d e s - e t a t s : a l l e r g i g u e s . A r c h s . I n t . P h a r m a c o d y n . T h e r . 6 3 , 339-408. H u g h e s , M.J. 197 8. A c o m p a r i s o n o f t h e a u g m e n t a t i o n o f Hj_ and H2 r e c e p t o r a g o n i s t s t i m u l a t i o n on r a b b i t a t r i a l c h r o n o t r o p i c r e s p o n s e by two p h o s p h o d i e s t e r a s e i n h i b i t o r s , p a p a v e r i n e a n d t h e o p h y l l i n e . R e s . Commun. Chem. P a t h o l . P h a r m a c o l . 21(2 ) , 251-2 70 . I v y , A.C. and B a c h r a c h , W.H. 1966. P h y s i o l o g i c a l s i g n i f i c a n c e o f t h e e f f e c t o f h i s t a m i n e on g a s t r i c s e c r e t i o n . Hand-book o f E x p e r i m e n t a l P h a r m a c o l o g y . H i s t a m i n e a n d a n t i -h i s t a m i n e s . E d s . 0. E i c h l e r a n d A. F a r a h . S p r i n g e r -V e r l a g , New Y o r k , 8 1 0 - 8 9 1 . K a h l s o n , G., and R o s e n g r e n , E. 196 8. New a p p r o a c h e s t o t h e p h y s i o l o g y o f h i s t a m i n e . P h y s i o l . Rev. 4_8_, 155-196. K l e i n , I . and L e v y , G.S. 1 9 7 1 . A c t i v a t i o n o f m y o c a r d i a l a d e n y l c y c l a s e by h i s t a m i n e i n g u i n e a - p i g , c a t , a n d human h e a r t . J . C l i n . I n v e s t . '5JJ, 1 0 1 2 - 1 0 1 5 . K o r t h , M. 1978. E f f e c t s o f s e v e r a l p h o s p h o d i e s t e r a s e -i n h i b i t o r s on g u i n e a p i g m y o c a r d i u m . Naunyn S c h m i e d e -b e r g s A r c h . P h a r m a c o l . 3 02, 77-86. K u k o v e t z , W.R. and P o c h , G. 1972. The p o s i t i v e i n o t r o p i c e f f e c t o f c y c l i c AMP. Adv. C y c l i c N u c l e o t i d e R e s . E d s . P. G r e e n g a r d , R. P a o l e t t i a n d G.A. R o b i n s o n . R a v e n P r e s s , N.Y., 261-290. 98 L a h e r , I . E . and M c N e i l l , J.H. 1979. H i s t a m i n e r e s p o n s e s i n c a t h e a r t . P r o c . West. P h a r m a c o l . S o c . 2_2, 4 1 9 - 4 2 1 . L a n g e r , G.A. 1973. E x c i t a t i o n - c o n t r a c t i o n c o u p l i n g . Annu. Rev. P h y s i o l . 35_, 55-86. L e v e y , J.V. 1971. I s o l a t e d A t r i a l P r e p a r a t i o n s . I n : M e t h o d s i n P h a r m a c o l o g y . V o l . 1. E d . A. S c h w a r t z . A p p l e t o n - C e n t u r y - C r o f t s . I n c . , New Y o r k , 77-150. L e w i s , T. and H a r m e r , I.M. 1927. V a s c u l a r r e a c t i o n s o f s k i n t o i n j u r y ; f u r t h e r e v i d e n c e o f r e l e a s e o f h i s t a m i n e -l i k e s u b s t a n c e f r o m i n j u r e d s k i n . H e a r t , 14_, 19-26. L i c h t e n s t e i n , L.M. and G i l l e s p i e , E. 1 9 7 5. The e f f e c t s o f H]_- a nd ^ - a n t i h i s t a m i n e s on " a l l e r g i c " h i s t a m i n e r e l e a s e and i t s i n h i b i t i o n by h i s t a m i n e . J . P h a r m a c o l . E x p . T h e r . 192_, 4 4 1 - 4 5 0 . Loew, E.R., M a c M i l l a n , R., and K a t s e r , M.E. 1946. The a n t i -h i s t a m i n e p r o p e r t i e s o f b e n a d r y l , 3 - d i m e t h y l a m i n o e t h y l b e n z h y d r y l e t h e r h y d r o c h l o r i d e . J . P h a r m a c o l . E x p . T h e r . 86_, 229-238 . M a r t i n e z , T.T. and M c N e i l l , J.H. 1977. The e f f e c t o f t h e o -p h y l l i n e on a m i n e - i n d u c e d c a r d i a c c y c l i c AMP and c a r d i a c c o n t r a c t i l e force.- Can. J . P h y s i o l . P h a r m a c o l . 5_5_, 98-104. M c N e i l l , J .H., B r e n n e r , M.J. a n d M u s c h e k , L.D. 1972. I n t e r a c t i o n o f f o u r m e t h y l x a n t h i n e compounds and n o r e -p i n e p h r i n e on c a r d i a c p h o s p h o r y l a s e a c t i v a t i o n and c a r d i a c c o n t r a c t i l i t y . I n R e c e n t A d v a n c e s i n S t u d i e s on C a r d i a c S t r u c t u r e and M e t a b o l i s m . U n i v e r s i t y P r e s s , B a l t i m o r e , 261-274. M c N e i l l , H .J. C o u t i n h o , F.E. and Verma, S.C. 1974. L a c k o f i n t e r a c t i o n b e t w e e n n o r e p i n e p h r i n e o r h i s t a m i n e a nd t h e o p h y l l i n e on c a r d i a c c y c l i c AMP. Can. J . P h y s i o l . P h a r m a c o l . 5_2 , 1 0 9 5 - 1 1 0 1 . M c N e i l l , J.H. and M u s c h e k , L.D. 1972. H i s t a m i n e e f f e c t s on c a r d i a c c o n t r a c t i l i t y , p h o s p h o r y l a s e a n d a d e n y l c y c l a s e . J . M o l . C e l l . C a r d i o l . 4, 611-624. M c N e i l l , J.H. and Verma, S.C. 197 3. H i s t a m i n e a n d h i s t a m i n e a n a l o g u e s s t i m u l a t e d f o r m a t i o n o f c a r d i a c c y c l i c AMP. P r o c . Can. F e d . B i o l . S o c . 1 6 , 228. M c N e i l l , J.H. and Verma, S.C. 1 9 7 4 a . B l o c k a d e by b u r i m a m i d e o f t h e e f f e c t s o f h i s t a m i n e and h i s t a m i n e a n a l o g s on c a r d i a c c o n t r a c t i l i t y , p h o s p h o r y l a s e a c t i v a t i o n a n d 99 c y c l i c a d e n o s i n e m o n o p h o s p h a t e . J . P h a r m a c o l . E x p . T h e r . 1 8 8 ( 1 ) , 1 80-188. M c N e i l l , J.H. and Verma, S.C. 1974b. S t i m u l a t i o n o f r a t g a s t r i c a d e n y l a t e c y c l a s e b y h i s t a m i n e and h i s t a m i n e a n a l o g u e s a nd b l o c k e d by b u r i m a m i d e . B r . "' J . P h a r m a c o l . 5_2, 1 04-106. M c N e i l l , J.H. and Verma, S.C. 1 9 7 4 c . B l o c k a d e o f c a r d i a c h i s t a m i n e r e c e p t o r s by p r o m e t h a z i n e . Can. J . P h y s i o l . P h a r m a c o l . 5_2_, 23-27. M c N e i l l , J.H. and Verma, S.C. 197 8. H i s t a m i n e r e c e p t o r s i n r a b b i t h e a r t . P r o c . West. P h a r m a c o l . S o c . 2_1, 99- 1 0 1 . M e i n e r t z , T., N a w r a t h , H., and S c h o l z , H. 1973. S t i m u l a t o r y e f f e c t s o f DB-c-AMP a n d a d r e n a l i n e on m y o c a r d i a l c o n -t r a c t i o n and ^ C a e x c h a n g e . Naunyn S c h m i e d e b e r g s A r c h . P h a r m a c o l . 27 9, 327-338. M e i n e r t z , T. and S c h o l z , H. 1969. U b e r den E i n f l u b v o n M a n g a n - I o n e n a u f d i e p o s i t i v i n o t r o p e W i r k u n g v o n A d r e n a l i n , T h e o p h y l l i n und D i g i t o x i g e n i n an i s o l i e r t e n . M e e r s c h w e i n c h e n v o r h o f e n , Naunyn S c h m i e d e b e r g s A r c h . E x p . P a t h o l . P h a r m a c o l . 2 6 5, 1 3 1. Owen, D.A.A., H a r v e y , C.A., and G r i s t w o o d , R.W. 1979. C a r d i o v a s c u l a r s t u d i e s w i t h i m p r o m i d i n e ( S . K . £ F. 9 2 6 7 6 ) , a new v e r y p o t e n t a n d s p e c i f i c h i s t a m i n e ^ - r e c e p t o r a g o n i s t . J . Pharm. P h a r m a c o l . 3_1 , 577-582. 0ye, I . 1975. C y c l i c AMP i n c a r d i o v a s c u l a r p h a r m a c o l o g y . A c t a P h a r m a c o l . T o x i c o l . 36_ ( S u p p l . 1 1 ) , 31-40. P a r s o n s , M.E. 1977. The a n t a g o n i s m o f h i s t a m i n e H 2 ~ r e c e p t o r s i n v i t r o a n d i n v i v o w i t h p a r t i c u l a r r e f e r e n c e t o t h e a c t i o n s o f c i m e t i d i n e . I n C i m e t i d i n e e d s . B u r l a n d , W.L. and S i m k i n s , M.A. E x c e r p t a M e d i c a , A m s t e r d a m , C h a p t e r 2, 13-20. P l a u t , M., L i c h e n s t e i n , L.M. and Henney, C.S. 1975. P r o -p e r t i e s o f a s u b p o p u l a t i o n o f T - c e l l s b e a r i n g h i s t a m i n e r e c e p t o r s . J . C l i n . I n v e s t . 5_5_, 856-874. P o p i e l s k i , L. 1920. g - I m i d a z o l y l a t h y l a m i n und d i e O r g a n -e x t r a k t e . P f l i i g e r s A r c h . g e s . P h y s i o l . 178 , 214-236. R e i n h a r d t , D., S c h m i d t , U., B r o d d e , O.E., and Schumann, H.J. 1977. H]_- and ^ - r e c e p t o r m e d i a t e d r e s p o n s e s t o h i s t -a mine on c o n t r a c t i l i t y a n d c y c l i c AMP o f a t r i a l a n d p a p i l l a r y m u s c l e s f r o m g u i n e a - p i g h e a r t s . A g e n t s A c t i o n s , 7 X 1 ) , 1-12. 100 R e i n h a r d t , D., Wagner, J . and Schumann, H. J . 1974. D i f -f e r e n t i a t i o n o f Ej_- and . ^ - r e c e p t o r s m e d i a t i n g p o s i t i v e c h r o n o t r o p i c and i n o t r o p i c r e s p o n s e s t o h i s t a m i n e on a t r i a l p r e p a r a t i o n s o f t h e g u i n e a - p i g . A g e n t s A c t i o n s , 4, 2 17-221. S c h i l d , H.O. 1957. D r u g a n t a g o n i s m and p A x . P h a r m a c o l . Rev. _9 , 242-246. S c h o l z , H. 1 9 7 1 . On t h e m e c h a n i s m o f t h e p o s i t i v e i n o t r o p i c a c t i o n o f t h e o p h y l l i n e i n mammalian c a r d i a c m u s c l e . Naunyn S c h m i e d e b e r g s A r c h . Pharmak. 2 7 1 , 396-409. S c h o l z , H. and R e u t e r , H. 1976. E f f e c t o f t h e o p h y l l i n e on membrane c u r r e n t s i n mammalian c a r d i a c m u s c l e . Naunyn S c h m i e d e b e r g s A r c h . P h a r m a c o l . 2 9 3, R19. S o i l , A.H. and W o l l i n , A. 1977. The e f f e c t s o f h i s t a m i n e , p r o s t a g l a n d i n E 2 and s e c r e t i o n on c y c l i c AMP i n s e p a r a t e d c a n i n e f u n d i c m u c o s a l c e l l s . G a s t r o e n t e r o l o g y , 72, 1166 . T e n n e r , T.E. and M c N e i l l , J.H. 197 8. C h a r a c t e r i z a t i o n o f t h e i n o t r o p i c r e s p o n s e i n d u c e d by s t i m u l a t i o n o f 3 - a d r e n e r g i c and H]_ h i s t a m i n e r g i c r e c e p t o r s i n g u i n e a p i g l e f t a t r i a . Can. J . P h y s i o l . P h a r m a c o l . 5_6 , 9 2 6 - 933. T e n n e r , T.E. a n d M c N e i l l , J.H. 1 9 7 8 a . The r o l e o f h i s t a m i n e H]_- and ^ - r e c e p t o r s i n t h e g u i n e a p i g h e a r t . P r o c . West. P h a r m a c o l . Soc. 2 1 , 1 0 7-110. T r e n d e l e n b u r g , U. 1960. The a c t i o n o f h i s t a m i n e and 5-h y d r o x y t r y p t a m i n e on i s o l a t e d mammalian a t r i a . J . P h a r m a c o l . E x p . T h e r . 1 3 0 , 4 5 0-460. Van Rossum, J.M. and Van Den b r i n k , F.G. 1963. C u m u l a t i v e d o s e - r e s p o n s e c u r v e s . A r c h . I n t . P h a r m a c o d y n . , 1 4 3 ( 1 - 4 ) , 2 4 0 - 2 4 6 , 299-329. Verma, S . C , and M c N e i l l , J.H. 1975. N o n - i n v o l v e m e n t o f c y c l i c AMP f o l l o w i n g H ] _ - r e c e p t o r s t i m u l a t i o n . IRCS Med. S c i . 3_, 387. Verma, S.C. and M c N e i l l , J.H. 1976. M i n i r e v i e w : C a r d i a c h i s t a m i n e r e c e p t o r s and c y c l i c AMP. L i f e S c i . 1 9 , 1 7 9 7 - 1 8 0 2 . Verma, S.C. and M c N e i l l , J.H. 197 7. C o m p a r i s o n o f t h e e f f e c t s o f h i s t a m i n e and t o a z o l i n e on t h e i n o t r o p i c , c h r o n o t r o p i c a n d c y c l i c AMP p r o d u c i n g e f f e c t s i n t h e g u i n e a p i g h e a r t . P r o c . West. P h a r m a c o l . S o c . 2 0 , 409-414. 101 Verma, S.C. and M c N e i l l , J.H. 1 9 7 7 a . C a r d i a c h i s t a m i n e r e c e p t o r s : d i f f e r e n c e s b e t w e e n l e f t a n d r i g h t a t r i a a n d r i g h t v e n t r i c l e . J . P h a r m a c o l . E x p . T h e r . 2 0 0( 2 ) , 352-362. Verma, S.C. and M c N e i l l , J.H. 1978. H i s t a m i n e H 2 r e c e p t o r s and t h e a d e n y l a t e c y c l a s e - c y c l i c AMP s y s t e m . Can. J . Pharm. S c i . 1 3 ( 1 ) , 1-3. Vugman, I . and S i l v a , M. R o c h a e. 1966. B i o l o g i c a l d e t e r -m i n a t i o n o f h i s t a m i n e i n l i v i n g t i s s u e s and body f l u i d s . Handbook o f E x p e r i m e n t a l P h a r m a c o l o g y . E d . M. Roche e. S i l v a . S p r i n g e r - V e r l a g , B e r l i n , V o l . 1 8 , 81-115. W i n d a u s , A. and V o g t , W. 1907. S y n t h e t a s e d e s I m i d a z o l y l -a t h y l a m i n s . B e r d. d e u t s c h . Chem. G e s e l l 40: 3691. C i t e d i n H i s t a m i n e a n d A n ' t i - h i s t a m i n e s . Handbook o f E x p e r i m e n t a l P h a r m a c o l o g y . E d . M. Roche e S i l v a , S p r i n g e r - V e r l a g , B e r l i n , V o l . 18. W o l l e n b e r g e r , A., R i s t a n , 0., and S c h o f f a , G. 1960. E i n e e i n f a c h e T e c h n i k d e r e x t r e m e n s c h n e l l e n A b k u l u n g g r o s s e r e r G e w e b s t u c k e . A r c h . Ges. P h y s i o l . 2 7 0, 399-412. Wood, C . J . and S i m k i n s , M.A. 1973. I n t e r n a t i o n a l Symposium on H i s t a m i n e H 2 ~ r e c e p t o r A n t a g o n i s t s . R e s e a r c h a n d D e v e l o p m e n t D i v i s i o n , S m i t h K l i n e a n d F r e n c h L a b o r a t o r i e s , L t d . , Welwyn G a r d e n C i t y , E n g l a n d . Y e l l i n , T.O., B u c k , S.H., G i l m a n , D . J . , J o n e s , D.F. and W a r d l e w o r t h , J.M. 1979. I C I 1 2 5 , 211: A p o t e n t new a n t i s e c r e t o r y d r u g a c t i n g on h i s t a m i n e H 2 ~ r e c e p t o r s . P h a r m a c o l o g i s t , 2_1 , 266. Yonkman, F.F., C h e s s , D., M a t h i e s o n , D. and H a n s e n , N. 1946. P h a r m a c o d y n a s m i c s t u d i e s o f a new a n t i h i s t a m i n e a g e n t , N ' - p y r i d y l - N ' - b e n z y l - N - d i m e t h y l e t h y l e n e d i a m i n e HC1, p y r i b e n z a m i n e HC1. J . P h a r m a c o l . E x p . T h e r . 8_7_, 256-264. 

Cite

Citation Scheme:

        

Citations by CSL (citeproc-js)

Usage Statistics

Share

Embed

Customize your widget with the following options, then copy and paste the code below into the HTML of your page to embed this item in your website.
                        
                            <div id="ubcOpenCollectionsWidgetDisplay">
                            <script id="ubcOpenCollectionsWidget"
                            src="{[{embed.src}]}"
                            data-item="{[{embed.item}]}"
                            data-collection="{[{embed.collection}]}"
                            data-metadata="{[{embed.showMetadata}]}"
                            data-width="{[{embed.width}]}"
                            data-media="{[{embed.selectedMedia}]}"
                            async >
                            </script>
                            </div>
                        
                    
IIIF logo Our image viewer uses the IIIF 2.0 standard. To load this item in other compatible viewers, use this url:
https://iiif.library.ubc.ca/presentation/dsp.831.1-0094937/manifest

Comment

Related Items