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Use of estimates of ribonucleic acid to predict the growth rates of zooplanktonic organisms. Pease, Alan Kingsley 1968

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831-UBC_1968_A6_7 P45.pdf [ 6.01MB ]
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THE USE OF E S T I M A T E S OF R I B O N U C L E I C A C I D TO P R E D I C T THE GROWTH R A T E S OF Z O O P L A N K T O N I C ORGANISMS b y A L A N K. P E A S E B S c . , U n i v e r s i t y o f W a s h i n g t o n , 1 9 6 1 A' T H E S I S S U B M I T T E D I N -..PARTIAL F U L F I L L M E N T - OF' THE REQUIREMENTS; FOR THE DEGREE OF M A S T E R OF S C I E N C E i n t h e D e p a r t m e n t o f Z o o l o g y a n d I n s t i t u t e o f . O c e a n o g r a p h y We a c c e p t t h i s t h e s i s a s c o n f o r m i n g t o t h e r e q u i r e d s t a n d a r d . THE U N I V E R S I T Y OF B R I T I S H March,-' 196 8 C O L U M B I A In presenting th is thesis in pa r t i a l fu l f i lment of the requirements for an advanced degree at the Univers i ty of B r i t i sh Columbia, I agree that the Library sha l l make-i t f ree ly ava i lab le for reference and Study. I further agree that permission for extensive copying of this thesis for scho lar ly purposes may be granted by the Head of my Department or by h.iJs representat ives. It is understood that copying or publ icat ion of th is thesis for f inanc ia l gain shal l not be allowed without my wri t ten permission. The Univers i ty of B r i t i s h Columbia Vancouver 8, Canada Department of s i A B S T R A C T T h e c o n c e n t r a t i o n o f RNA ( S c h n e i d e r p r o c e d u r e , 1 9 4 5 ) a n d t h e d r y w e i g h t o f t h e d e v e l o p i n g s t a g e s o f t h e b r i n e s h r i m p A r t c m i a s a l i n a w e r e m e a s u r e d d u r i n g t h e f i r s t 6 3 d a y s o f g r o w t h o f t h e o r g a n i s m i n t h e l a b o r a t o r y ; RNA a n d t h e d r y w e i g h t o f s t a r v e d s t a g e V C a l a n u s p l u m c h r u s w e r e f o l l o w e d f o r 20 d a y s . T h e s ame t e c h n i q u e s w e r e a p p l i e d t o t h e d e v e l o p m e n t a l s t a g e s o f s e v e r a l s p e c i e s o f z o o p l a n k t o n o b t a i n e d d u r i n g t h e c o u r s e o f o n e y e a r f r o m S a a n i c h I n l e t , V a n c o u v e r I s l a n d , B.C. T h e d a t a c o l l e c t e d f r o m t h e l a b o r a t o r y a n d t h e f i e l d w e r e u s e d t o t e s t t h e v a l i d i t y o f t h e R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p p r o p o s e d b y S u t c l i f f e ( 1 9 6 5 ) a s a m e a n s t o p r e d i c t t h e r a t e o f i n c r e a s e i n d r y w e i g h t ( g r o w t h r a t e ) o f s u c h o r g a n i s m s . E r r o r s i n t h e e s t i m a t i o n o f RNA o c c u r e d . T h e s e r e s u l t e d f r o m c h r o m o g e n i c m a t e r i a l s o t h e r t h a n t h e p e n t o s e s u g a r s r i b o s e a n d d e s o x y r i b o s e b e i n g p r e s e n t i n t h e h o t P C A e x t r a c t s o f z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s . D e t e c t i o n o f t h e i n t e r f e r i n g c h r o m o g e n s w a s p o s s i b l e b y e x a m i n i n g t h e a b s o r p t i o n s p e c t r a o f t h e h o t P C A e x t r a c t s t r e a t e d w i t h o r c i n o l b e t w e e n t h e w a v e - l e n g t h s 5 5 0 t o 700 mp. A n a t t e m p t h a s b e e n made t o m i n i m i z e s u c h e r r o r s b y c a l c u -l a t i n g t h e a m o u n t o f RNA f r o m t h e d i f f e r e n c e i n a b s o r b a n c e r e c o r d e d a t 6 7 0 mp m i n u s t h a t a t 6 1 5 mp. • J . i C o r r e l a t i o n o f g r o w t h p r e d i c t e d f r o m RNA v a l u e s a n d t h e o b s e r v e d i n c r e a s e i n d r y w e i g h t o f t h e o r g a n i s m s w a s g r e a t e s t d u r i n g t h e i r m o s t r a p i d p e r i o d o f d e v e l o p m e n t . D u r i n g o t h e r p e r i o d s o f d e v e l o p m e n t , RNA v a l u e s w e r e g e n e r a l l y i n e x c e s s o f r e q u i r e m e n t s f o r t h e o b s e r v e d i n c r e a s e i n d r y w e i g h t a n d may r e p r e s e n t m e t a b o l i c p r o c e s s e s o t h e r t h a n t h o s e a s s o c i a t e d w i t h t h i s i n c r e a s e . i i i TABLE OF CONTENTS CHAPTER PAGE A b s t r a c t ; i L i s t of t a b l e s v L i s t of f i g u r e s v i Acknowledgements v i i i I. I n t r o d u c t i o n . . 1 I I . M a t e r i a l s and Methods 8 I I . 1 F i e l d s t u d i e s 8 Preserved - T o t a l Sorted groups S i z e a n a l y s i s I I . 2 Laboratory s t u d i e s 13 Artemia s a l i n a developmental stages Calanus plumchrus stage V I I . 3 P r e s e r v a t i o n o f zooplankton by f r e e z e - d r y i n g . 14 .11.4 Schneider assay f o r RNA a p p l i e d to zooplankton 15 I I . 4 . 1 . A n a l y t i c a l procedure 17 Reagents and standards A n a l y s i s 11.4.2 . I n t e r f e r i n g chromogenic m a t e r i a l s 21 11.4.3 . P r e c i s i o n 30 I I I . R e s u l t s 33 I I I . l . L a boratory s t u d i e s 34 Artemia s a l i n a developmental stages Calanus plumchrus stage V. I I I . 2. F i e l d s t u d i e s 43 Euphausia p a c i f i c a developmental stages Calanus plumchrus stage V Other m a t e r i a l i v T A B L E OF CONTENTS ( C o n t ' d ) _ . . i C H A P T E R PAGE I V . D i s c u s s i o n 59 V. C o n c l u s i o n s . . . . . 69 R e f e r e n c e s c i t e d 70 A p p e n d i x 75 'W L I S T OF T A B L E S T A B L E PAGE I . E f f e c t o f d e s s i c a t o r s t o r a g e o f f r e e z e - d r i e d z o o p l a n k t o n m a t e r i a l s o n t h e RNA c o n t e n t 15 I I . a ) RNA v a l u e s u n c o r r e c t e d a n d c o r r e c t e d f o r DNA; d a t a f r o m N a n o o s e B a y 1 9 6 5 24 b ) E f f e c t s o f r e a g e n t s o n t h e d e t e r m i n a t i o n o f RNA 24 I I I . P r e c i s i o n o f t h e a n a l y s i s 31 I V . a ) E x p e r i m e n t I : C h a n g e s i n t h e d r y w e i g h t / i n d i v i d u a l a n d RNA c o n t e n t o f A r t e m i a s a l i n a ; p e r c e n t e x p e c t e d a n d o b s e r v e d g r o w t h / d a y a r e s h o w n 35 b ) E x p e r i m e n t I I : C h a n g e s i n t h e d r y w e i g h t / i n d i v i d u a l a n d RNA c o n t e n t o f A r t e m i a s a l i n a ; p e r c e n t e x p e c t e d a n d o b s e r v e d g r o w t h / d a y a r e s h o w n 36 V. RNA a n d t h e g r o w t h o f i n d i v i d u a l E u p h a u s l a  p a c i f i c a d e v e l o p m e n t a l s t a g e s c o l l e c t e d i n o n e y e a r o f s a m p l i n g 47 V I . RNA, d r y w e i g h t s / i n d i v i d u a l o f C a l a n u s p l u m c h r u s s t a g e V c o l l e c t e d N o v . 1 9 6 5 t o J u l y 1 9 6 6 . . 54 V I I . A n a l y s i s f o r t r e n d s i n m e a n w t / i n d i v i d u a l a n d RNA d a t a ( 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp) J u n e - J u l y 1 9 6 6 55 v i L I S T OF F I G U R E S F I G U R E PAGE 1. P e r c e n t e x p e c t e d g r o w t h a s a f u n c t i o n o f RNA c o n c e n t r a t i o n i n t h e a m p h i p o d O r c h e s t i a p l a t e n s i s ( r e p r o d u c e d f r o m S u t c l i f f e , 1 9 6 5 ) . . 3 2. S a m p l i n g p o s i t i o n s S a a n i c h I n l e t N o v e m b e r 1 9 6 5 t h r o u g h S e p t e m b e r 1 9 6 6 10 3. R e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e w e t w e i g h t o f z o o p l a n k t o n l o a d e d i n t o a V i r t i s F r e e z e - d r y e r a n d t h e t i m e r e q u i r e d f o r t h e s a m p l e s t o r e a c h c o n s t a n t d r y w e i g h t 1 4 a 4. R e l a t i o n s h i p b e t w e e n a b s o r b a n c e a n d c o n c e n t r a t i o n o f y e a s t RNA s t a n d a r d : a ) a t 6 7 0 mu; b ) f o r 6 7 0 m i n u s 6 1 5 my 19 5. A b s o r p t i o n s p e c t r a f o r t h e r e a c t i o n p r o d u c t s o f t h e h o t PCA e x t r a c t s o f t h e RNA s t a n d a r d a n d s e v e r a l s p e c i e s o f z o o -p l a n k t o n t r e a t e d w i t h o r c i n o l 22 6. U l t r a v i o l e t a b s o r p t i o n s p e c t r a f o r t h e r e a c t i o n p r o d u c t s o f h o t P C A e x t r a c t s o f p l a n k t o n i c s p e c i e s , a n d RNA, DNA, a n d g l u c o s e s t a n d a r d s d i g e s t e d i n H2SO4 26 7. A b s o r p t i o n s p e c t r a f o r t h e r e a c t i o n p r o d u c t s o f h o t P C A e x t r a c t e d g l u c o s e a n d O r c h o m o n e l l a s p t r e a t e d w i t h o r c i n o l 29 8. W e i g h t / l e n g t h d a t a f o r A r t e m i a s a l i n a s u p e r i m p o s e d u p o n R e e v e T s ( 1 9 6 4 ) r e -l a t i o n s h i p f o r t h e a n i m a l 37 9. G r o w t h o f A r t e m i a s a l i n a i n E x p e r i m e n t I . . . 38 1 0 . G r o w t h o f A r t e m i a s a l i n a i n E x p e r i m e n t I I . . 39 1 1 . E f f e c t s o f s t a r v a t i o n o f a) t h e RNA c o n t e n t ; a n d b ) t h e d r y w e i g h t o f C a l a n u s p l u m c h r u s s t a g e V : 4 2 •12. G r o w t h o f E u p h a u s i a p a c i f i c a c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s i n t h e f i r s t m o n t h a f t e r s p a w n i n g 44 _ v i i L I S T OF F I G U R E S ( C o n t ' d )  F I G U R E PAGE 1 3 . C h a n g e s i n t h e n u m b e r / m ^ o f w a t e r f i l t e r e d o f E u p h a u s i a p a c i f i c a d e v e l o p m e n t a l s t a g e s d u r i n g J u n e a n d J u l y 1 9 6 6 ( a 3 - p t r u n n i n g a v e o f d a t a c o r r e c t e d t o r e p r e s e n t a w a t e r c o l u m n 30m i n d e p t h ) 45 1 4 . RNA i n E u p h a u s i a p a c i f i c a c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s 49 1 5 . C h a n g e s i n a ) C h l o r o p h y l l a , a n d b ) t h e a v e RNA c o n t e n t o f a l l c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s J u n e - J u l y 1 9 6 6 51 1 6 . C h a n g e s i n a ) C h l o r o p h y l l a , a n d b ) t h e RNA c o n t e n t o f E u p h a u s i a p a c i f i c a c y r t o p i a a n d a d u l t s t a g e s d u r i n g o n e y e a r . 52 1 7 . C h a n g e s i n a ) RNA a n d , b ) mg d r y w t p e r i n d i v i d u a l i n c h a e t o g n a t h s ; a n d c ) t h e n u m b e r o f s m a l l c o p e p o d s i n t h e e u p h o t i c z o n e d u r i n g J u n e a n d J u l y 1 9 6 6 5 7 a 1 8 . S u t c l i f f e ' s ( 1 9 6 5 ) R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p a s e x p r e s s e d i n c a r t e s i a n c o o r d i n a t e s 62 v i i i ACKNOWLEDGEMENTS I w o u l d l i k e t o t h a n k D r . B. M. B a r y ( I n s t i t u t e o f O c e a n o g r a p h y , U n i v e r s i t y o f B r i t i s h C o l u m b i a ) , u n d e r w h o s e g u i d a n c e t h i s w o r k w a s u n d e r t a k e n , D r . T. R. P a r s o n s ( P a c i f i c O c e a n o g r a p h i c G r o u p , N a n a i m o , B . C . ) , D r . A. G r o n l u n d ( D e p t . o f M i c r o b i o l o g y , U n i v e r s i t y o f B r i t i s h C o l u m b i a ) , a n d o t h e r m e m b e r s o f t h e I n s t i t u t e o f O c e a n o g r a p h y f o r t h e i r a s s i s t a n c e i n a n d d i s c u s s i o n o f t h i s t h e s i s . F a c i l i t i e s f o r c a r r y i n g o u t f i e l d w o r k d u r i n g t h e s u m m e r s o f 1 9 6 5 a n d 1 9 6 6 w e r e p r o v i d e d b y P a c i f i c O c e a n o -g r a p h i c G r o u p , B i o l o g i c a l S t a t i o n , N a n a i m o , B.C. F u r t h e r c o l l e c t i o n s w e r e made f r o m t h e C . S . S . E h k o l i . I w o u l d l i k e t o t h a n k t h e s t a f f o f P a c i f i c O c e a n o g r a p h i c G r o u p a n d t h e o f f i c e r s a n d c r e w o f t h e C . S . S . E h k o l i f o r t h e i r a s s i s t a n c e i n t h e c o l l e c t i o n o f s a m p l e s . I w o u l d a l s o l i k e t o t h a n k my f i a n c e e , M i s s E i l e e n N i c h o l s o n , f o r h e r h e l p a n d p a t i e n c e i n t h e p r e p a r a t i o n o f t h i s t h e s i s . - 1 -C H A P T E R I I N T R O D U C T I O N B r a c h e t ( 1 9 6 0 ) o b s e r v e d t h a t r i b o n u c l e i c a c i d (RNA) i s a n e c e s s a r y p r e c u r s o r t o p r o t e i n s y n t h e s i s a n d t h a t t h e r a t e o f p r o t e i n s y n t h e s i s ( d e f i n e d b y h i m a s t h e g r o w t h r a t e ) i s a f u n c t i o n o f t h e RNA c o n c e n t r a t i o n i n g r o w i n g a n i m a l s . D i s c h e , D e v i , a n d Z e l m e n i s ( 1 9 6 1 ) , C a l d w e l l , M a c k o r , a n d H i n s h e l w o o d ( 1 9 5 0 ) , a n d J e e n e r ( 1 9 5 3 ) d e m o n s t r a t e d t h a t , i n t h e l e n s e s o f r a t s , i n b a c -t e r i a l c u l t u r e s , a n d i n t h e c u l t u r e s o f t h e f l a g e l l a t e P o l y t o m e l l a c a e c a P r i n g s h e i m , t h e h i g h e s t c o n c e n t r a t i o n o f RNA w a s f o u n d i n t h e y o u n g e s t c e l l s . H o a g l a n d ( 1 9 5 9 ) ' i n d i c a t e d t h a t a p r o c e s s a s b a s i c a s p r o t e i n s y n t h e s i s s h o u l d n o t b e s p e c i e s s p e c i f i c . On t h e s e s e v e r a l f i n d i n g s S u t c l i f f e ( 1 9 6 5 ) s u r m i z e d t h a t t h e t o t a l r i b o n u c l e i c a c i d ( r i b o s o m a l + m e s s e n g e r + t r a n s f e r ) m i g h t b e u s e d t o p r e -d i c t t h e r a t e o f i n c r e a s e o f w e i g h t o f s m a l l m a r i n e o r g a n -i s m s ; h e i n f e r r e d t h a t t h e i n c r e a s e i n w e i g h t w a s t h e e q u i v a l e n t o f g r o w t h . S u t c l i f f e m e a s u r e d t h e RNA c o n t e n t o f t h e d e v e l o p m e n t a l s t a g e s o f t h e a m p h i p o d O r c h e s t i a p l a t e n s i s K r o y e r a n d d e m o n s t r a t e d t h a t i t d e c r e a s e d w i t h i n c r e a s i n g a g e . He f i t t e d a g r o w t h c u r v e c a l c u l a t e d f r o m t h e B e r -t a l a n f f y ( 1 9 3 8 ) g r o w t h e q u a t i o n t o t h e o b s e r v e d g r o w t h o f t h e a n i m a l . T h e i n c r e a s e i n w e i g h t w a s t h e n e x p r e s s e d a s t h e p e r c e n t a g e o f e x p e c t e d g r o w t h p e r d a y , u s i n g m e t h o d s o u t l i n e d b y B e v e r t o n a n d H o l t ( 1 9 5 $ ) ; s e l e c t e d v a l u e s w e r e p l o t t e d a g a i n s t t h e RNA c o n c e n t r a t i o n f o r s u c c e s s i v e -> 2 -s t a g e s o£ t h e a m p h i p o d t o p r o v i d e t h e R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p r e p r o d u c e d i n F i g . I . F i g . 1: P e r c e n t e x p e c t e d g r o w t h a s a f u n c t i o n ' •' o f RNA c o n c e n t r a t i o n i n t h e a m p h i p o d O r c h e s t i a ' p l a t e n s i s ( r e p r o d u c e d f r o m S u t c l i f f e , 1 9 6 5 ) . | EXPECTED GROWTH % DRY WT/DAY — r>o OJ -P> ui o o o o o 1 1 1 1 1 -£-v - 4 -S u t c l i f f e t h e n i n v e s t i g a t e d t h e a b i l i t y o f h i s R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p t o p r e d i c t g r o w t h , u s i n g t h e d e v e l o p m e n t a l s t a g e s o f t h e b r i n e s h r i m p A r t e m i a s a l i n a L o w n d e s a n d t h e e g g s o f t h e mud s n a i l N a s s a r i u s o b s o l e t u s S a y . H i s r e s u l t s i n d i c a t e d a g r e e m e n t b e t w e e n p r e d i c t e d a n d o b s e r v e d g r o w t h ( b a s e d o n c h a n g e s i n w e i g h t ) d u r i n g t h e f i r s t 12 d a y s o f l i f e o f A r t e m i a a n d some a g r e e m e n t f o r t h e e g g s o f N a s s a r i u s ( b a s e d o n c h a n g e s i n l e n g t h ) . I f S u t c l i f f e ' s r e l a t i o n s h i p i s v a l i d i t w o u l d h e l p t o o v e r c o m e t h e h a n d i c a p s p r e s e n t i n p r e v i o u s s t u d i e s o f s e c o n d a r y p r o d u c t i o n w h e r e g r o w t h r a t e s h a v e h a d t o b e d e r i v e d o n l y f r o m o b s e r v e d c h a n g e s i n w e i g h t o f z o o -p l a n k t o n i c o r g a n i s m s i n e i t h e r f i e l d o r l a b o r a t o r y s t u d i e s ( R i l e y , 1 9 4 7 , 1 9 6 2 ; C u s h i n g , 1 9 5 9 ) . C h a n g e s i n w e i g h t i n f i e l d s t u d i e s , w h e t h e r t h e i n v e s t i g a t i o n d e a l s w i t h i n d i v i d u a l s p e c i e s ( G r e z e , 1 9 6 3 ) o r c o m m u n i t i e s ( C u r l , 1 9 6 1 ) h a v e b e e n b a s e d o n t h e a v e r a g e w e i g h t o f i n d i v i d u a l s , o r o n b i o m a s s ( w t o f o r g a n i s m s / m o f w a t e r f i l t e r e d ) , o b t a i n e d f r o m s a m p l e s o f a p o p u l a t i o n c o l l e c t e d f r o m a p a r t i c u l a r b o d y o f w a t e r . S u c h s a m p l e s ( a n d t h e r e f o r e t h e w e i g h t s o b t a i n e d f r o m t h e m ) may n o t b e r e p r e s e n t a t i v e o f a p o p u l a t i o n ( C a s s i e , 1 9 6 0 ; G i l f i l l a n , 1 9 6 7 ) . I n a d d i t i o n t o c h a n g e s o f w e i g h t w h i c h may o c c u r i n o n e p o p u l a t i o n i n a s i n g l e b o d y o f w a t e r , t h e r e c o u l d b e c h a n g e s r e s u l t i n g f r o m d i f f e r e n c e s b e t w e e n t w o o r m o r e p o p u l a t i o n s o f a s i n g l e s p e c i e s f r o m c o n t i g u o u s b o d i e s o f w a t e r t h a t h a v e b e e n m i x e d o r i n t e r c h a n g e d i n t h e a r e a o f s a m p l i n g . • 5 -L a b o r a t o r y s t u d i e s o f t h e g r o w t h r a t e s o f z o o -p l a n k t o n i c s p e c i e s p r o v i d e i n f o r m a t i o n f r o m a p o p u l a t i o n t h a t i s k n o w n ; a d d i t i o n a l d a t a may b e o b t a i n e d o n p a r t i c u l a r p r o c e s s e s w h i c h c o n t r i b u t e t o i n c r e a s e s i n t h e w e i g h t o f a n a n i m a l ( e . g . , m o u l t i n g a n d e g g p r o d u c t i o n i n C r u s t a c e a ) . H o w e v e r , t h e d a t a o b t a i n e d i n l a b o r a t o r y s t u d i e s a r e o f t e n i n c o m p l e t e s i n c e t h e c o n d i t i o n s e x p e r i e n c e d b y t h e t e s t a n i m a l s a r e c o n t r o l l e d , w h e r e a s i n n a t u r e t h e y a r e n o t . I n c o n t r a s t t o f i e l d a n d l a b o r a t o r y m e t h o d s a t p r e s e n t e m p l o y e d t o a s s e s s s e c o n d a r y p r o d u c t i o n , S u t c l i f f e ' s t e c h n i q u e w o u l d b e a b l e t o m e a s u r e t h e g r o w t h r a t e f r o m t h e RNA c o n t e n t o f t h o s e z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s c o l l e c t e d a t a p a r t i c u l a r t i m e a n d p l a c e . I f v a l i d , t h e t e c h n i q u e c o u l d b e u s e d t o s t u d y t h e g r o w t h o f s p e c i e s r e l a t i v e t o t h e i r f o o d s u p p l y . T h e p o t e n t i a l i t i e s o f t h e R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p t o i n v e s t i g a t e s e c o n d a r y p r o d u c t i o n s u g g e s t e d t h a t S u t c l i f f e ' s a p p r o a c h s h o u l d b e s u b j e c t e d t o f u r t h e r i n v e s t i g a t i o n . I n v e s t i g a t i o n o f t h e c u r r e n t l i t e r a t u r e o n t h e s u b j e c t o f t h e r o l e o f RNA i n b i o l o g i c a l p r o c e s s e s i n d i c a t e s t h a t a d e c r e a s e i n RNA c o n t e n t o f o l d e r c e l l s i s a g e n e r a l f e a t u r e o f l i v i n g o r g a n i s m s ( S t e w a r t a n d P a p a c o n s t a n t i n o u , 1 9 6 7 , o n c a l f l e n s e s ; K j e l d g a a r d a n d K u r l a n d , 1 9 6 3 , o n b a c t e r i a l c u l t u r e s ; V i c k e r s a n d M i l l i n , 1 9 6 5 , o n b o l l w e e v e l d e v e l o p m e n t a l s t a g e s ) . T h e d e c r e a s e i n t h e t o t a l c o n t e n t o f RNA i n a c e l l i s m a i n l y r e l a t e d t o t h e d e c r e a s e i n r i b o s o m e s (RNA a n d p r o t e i n ) w h i c h c o n s t i t u t e a p p r o x i m a t e l y -6 -8 5 % o f t h e t o t a l RNA ( S p i e g e l m a n , 1 9 6 5 ) . I t m u s t b e p o i n t e d o u t t h a t RNA ( t o t a l ) d o e s n o t a l w a y s d e c r e a s e i n a m a n n e r w h i c h i s p r o p o r t i o n a l t o t h e d e c r e a s e i n t h e s y n t h e s i s o f new o r g a n i c m a t e r i a l . I n e x p e r i m e n t s i n w h i c h b a c t e r i a w e r e t r a n s f e r r e d f r o m n u t r i e n t r i c h t o n u t r i e n t d e f i c i e n t m e d i a , t h e d e c r e a s e i n RNA l a g g e d b e h i n d t h e d e c r e a s e i n t h e w e i g h t o f e a c h c e l l ( K j e l d g a a r d , M a a l o e a n d S c h a e c h t e r , 1 9 5 8 ) . I n e x p e r i m e n t s w i t h o t h e r o r g a n i s m s , RNA ( r i b o s o m e s ) h a s b e e n s t o r e d a t o n e s t a g e o f d e v e l o p m e n t f o r u s e i n a n o t h e r s t a g e ( B r o w n a n d L i t t n a , 1 9 6 4 a , b ) a n d i n s e v e r a l s p e c i e s , t h e e f f i c i e n c y o f t h e r i b o s o m e s i n p r o t e i n s y n t h e s i s w a s n o t c o n s t a n t a t a l l r a t e s o f g r o w t h ( S o x a n d H o a g l a n d , 1 9 6 6 ) . T h e a b o v e c o n s i d e r a t i o n s do n o t p r e c l u d e t h e p o s s i b i l i t y t h a t a r e l a t i o n s h i p c o u l d b e d e r i v e d b e t w e e n t h e i n c r e a s e i n w e i g h t o f a n o r g a n i s m a n d i t s c o n t e n t o f RNA. T h e l e v e l o f r i b o s o m e s may s e t a n u p p e r l i m i t t o t h e r a t e o f p r o t e i n s y n t h e s i s ( K j e l d g a a r d a n d K u r l a n d , 1 9 6 3 ) a n d i n e x p e r i m e n t s i n w h i c h b a c t e r i a w e r e t r a n s f e r r e d f r o m n u t r i e n t d e f i c i e n t t o e n r i c h e d m e d i a , p o s i t i v e c o r r e l a t i o n s b e t w e e n t h e s y n t h e s i s o f RNA a n d p r o t e i n , a n d t h e c e l l w e i g h t w e r e f o u n d . O t h e r e x p e r i m e n t s ( R o s s e t , J u l i e n a n d M o n i e r , 1 9 6 6 ) s u g g e s t t h a t r i b o s o m e s a r e n o t a l w a y s a f a c t o r i n l i m i t i n g t h e r a t e o f p r o t e i n s y n t h e s i s a n d a l s o t h e i r e f f i c i e n c y may d e c r e a s e a t i n c r e a s i n g r a t e s o f g r o w t h . I n t e s t i n g h i s r e l a t i o n s h i p , S u t c l i f f e a p p e a r s t o h a v e e x a m i n e d a n i m a l s w h i c h w e r e o n l y i n t h e e x p o n e n t i a l •-• 7 -p h a s e o f g r o w t h . He c o n s i d e r e d n e i t h e r t h e o l d e r d e v e l o p m e n t a l s t a g e s o f A r t e m i a a n d N a s s a r i u s , n o r t h e e f f e c t t h a t c e s s a t i o n o f f e e d i n g m i g h t h a v e o n t h e RNA c o n t e n t a n d g r o w t h r a t e o f t h e s e o r g a n i s m s . I n t h e p r e s e n t s t u d y , s e v e r a l o f t h e c o n s i d e -r a t i o n s m e n t i o n e d h a v e b e e n t e s t e d . D i f f i c u l t i e s e x i s t i n e s t i m a t i n g t h e t r u e RNA c o n t e n t o f some z o o p l a n k t o n i c s p e c i e s , u s i n g t h e a s s a y o f S c h n e i d e r ( 1 9 4 5 ) . T h e s t u d y i n d i c a t e s t h a t t h e S c h n e i d e r m e t h o d a p p e a r s t o b e a b l e t o p r e d i c t g r o w t h i n z o o p l a n k t o n i c s p e c i e s w h i c h a r e o f a n a g e w h e r e e x p o n e n t i a l g r o w t h i s e x p e c t e d . I n o l d e r d e v e l o p m e n t a l s t a g e s RNA v a l u e s p r e d i c t a m o r e r a p i d i n c r e a s e i n w e i g h t t h a n o t h e r d a t a i n d i c a t e . N o t a l l o f t h e s e v a l u e s c a n b e r e c o n c i l e d w i t h p r o c e s s e s ( s u c h a s m o u l t i n g , e g g p r o d u c t i o n ) w h i c h m i g h t i n t h e m s e l v e s c o n t r i b u t e t o c h a n g e s i n t h e RNA c o n t e n t o f t h e a n i m a l s . F u r t h e r w o r k i s c o n s i d e r e d n e c e s s a r y t o d e v e l o p a s a t i s f a c t o r y t e c h n i q u e f o r m e a s u r i n g RNA i n z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s a n d t o d e t e r m i n e w h e t h e r a r e l a t i o n s h i p e x i s t s b e t w e e n t h e t o t a l c o n c e n t r a t i o n o f RNA, t h e g r o w t h o f t h e s e a n i m a l s , a n d t h e i r s u p p l y o f f o o d . 8 -C H A P T E R I I M A T E R I A L S AND METHODS T h e m e t h o d s o f s a m p l i n g i n t h e p r e s e n t s t u d y a i m e d a t p r o v i d i n g z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s f o r w h i c h t h e r a n g e s o f d r y w e i g h t a n d RNA c o n t e n t w e r e r e p r e s e n t a t i v e o f t h e f i e l d a n d l a b o r a t o r y p o p u l a t i o n s f r o m w h i c h t h e o r g a n i s m s w e r e o b t a i n e d . I n a d d i t i o n , m e t h o d s o f a s s e s s i n g w h e t h e r t h e S c h n e i d e r ( 1 9 4 5 ) a s s a y f o r RNA p r o v i d e s a t r u e e s t i m a t e o f t h e RNA c o n t e n t o f t h e o r g a n i s m s h a v e b e e n i n v e s t i g a t e d . I I . 1 . F I E L D S T U D I E S M o s t o f t h e c o l l e c t i o n s o f z o o p l a n k t o n w e r e made i n S a a n i c h I n l e t a t t h e t w o s t a t i o n s s h o w n i n F i g . 2. P l a n k t o n s a m p l e r s i n c l u d e d t h e 1 2 - i n c h C l a r k e - B u m p u s , a r i n g n e t o f 25-cm d i a a n d a 70-cm d i a N a n s e n n e t . T h e m e s h a p e r t u r e o f t h e f i l t e r f o r t h e N a n s e n n e t w a s 200 yt s q u a r e a n d f o r b o t h t h e o t h e r s a m p l e r s w a s a p p r o x i m a t e l y 300 p s q u a r e . O b l i q u e t o w s w e r e made w i t h t h e C l a r k e -B umpus o v e r s e l e c t e d i n t e r v a l s o f d e p t h , a n d v e r t i c a l t o w s o v e r d e p t h r a n g e s o f 1 6 0 - 0 m w i t h t h e o t h e r s . S a m p l e s w e r e t r a n s p o r t e d i n p r e - c o o l e d v a c u u m f l a s k s t o t h e l a b o r a t o r y w h e r e t h e y w e r e s o r t e d a n d a n a l y s e d . T h e r e w a s no n e e d f o r t h e p l a n k t o n c o l l e c t i o n s t o b e q u a n t i t a t i v e b e c a u s e t h e q u a n t i t a t i v e r e q u i r e m e n t s b e g a n w i t h d e t e r m i n i n g t h e w e i g h t s o f t h e i n d i v i d u a l s c o n s t i t u t i n g a s a m p l e . T h e p l a n k t o n c o l l e c t i o n s w e r e s u b d i v i d e d u s i n g a F o l s o m P l a n k t o n S p l i t t e r ( M c E w a n , J o h n s o n , a n d F o l s o m , 1 9 5 4 ; !- 9 -L o n g h u r s t , a n d S e i b e r t , 1 9 6 7 ) . T h e q u a n t i t y a l l o t t e d t o t h e f r a c t i o n s ( s u b d i v i s i o n s ) v a r i e d w i t h t h e t o t a l v o l u m e o f t h e o r i g i n a l c o l l e c t i o n , b u t t h e f o l l o w i n g w e r e a l w a y s r e p r e s e n t e d . F i g . 2: Sampling p o s i t i o n s S a a n i c h I n l e t November 1965: t h r o u g h September 1966. - \ o -123° 4 8 ° 4 0 ' ) 30 ' SAANICH INLET I < 4 8 ° 3 5 ' } >PB I \ 48°3X>' PB PAT BAY SAM NOV. 1965- M BB BRENTWOOD B JUNE-SEPT. 1 PLES AY 1966 AY SAMPLES 966 K r 11 - . P R E S E R V E D One f r a c t i o n w a s p r e s e r v e d i n 5% t o 1 0 % f o r m a l i n a n d h a s b e e n r e t a i n e d a s a p e r m a n e n t r e c o r d o f e a c h c o l l e c t i o n . T OTAL A s e c o n d f r a c t i o n w a s a n a l y z e d a s a w h o l e . SORTED GROUPS F r o m a t h i r d f r a c t i o n , t h e f o l l o w i n g g r o u p s w e r e s o r t e d : C h a e t o g n a t h s - a l l s p e c i m e n s ( c h i e f l y S a g i t t a e l e g a n s R i t t e r - Z a h o n y ) ; C a l a n u s p l u m c h r u s M a r u k a w a - s t a g e s V a n d V I d e s c r i b e d l o c a l l y a s C. t o n s u s B r a d y b y C a m p b e l l ( 1 9 3 4 ) . E u p h a u s i a p a c i f i c a H a n s e n - d e v e l o p m e n t a l s t a g e s ( B o d e n , 1 9 5 0 ) : C a l y p t o p i s I , I I , I I I ; F u r c i l i a I , I I , a n d I I I + ( I I I + i s e q u i v a l e n t t o s t a g e s I I I - V I I i n c l u s i v e ) ; C y r t o p i a ( o r j u v e n i l e s ) ; A d u l t s . O r c h o m o n e l l a s p . - T h i s a m p h i p o d ( p r o b a b l y 0. p i n q u i s B o e c k ) w a s s o r t e d o n t h e b a s i s o f i n t e r v a l s o f d r y w e i g h t ( m g ) : < 0.49 mg 4.00 - 5.99 mg 0.50 - 0.99 6.00 - 7.99 1.00 - 1.99 8.00 - 9.99 2.00 - 2.99 1 0 . 0 0 - 1 1 . 9 9 3.00 - 3.99 - 12 -R e s i d u e - m i s c e l l a n e o u s s p e c i m e n s u s u a l l y i n c l u d i n g t h e c o p e p o d s E u c a l a n u s b u n g i i G i e s b r e c h t , J o h n s o n a n d E u c h a e t a j a p o n i c a M a r u k a w a , t h e p t e r o p o d s L i m a c i n a a n d C l i o n e , m y s i i d s , a n d v a r i o u s d e c a p o d l a r v a e . No a n a l y s e s w e r e c a r r i e d o u t o n t h i s g r o u p . S I Z E A N A L Y S I S A f o u r t h f r a c t i o n w a s s i f t e d t h r o u g h a s e r i e s o f p r o g r e s s i v e l y f i n e r f i l t e r s made o f p l a n k t o n n e t t i n g ; a p e r t u r e s a p p r o x i m a t e d 1 5 0 0 , 1 0 0 0 , 6 4 0 , 5 7 1 , 300 U s q u a r e . T h e a v e r a g e w e i g h t f o r a l l i n d i v i d u a l s i n a n y o f t h e a b o v e f r a c t i o n s w a s d e t e r m i n e d a s f o l l o w s : ( 1 ) T h e n u m b e r s w e r e e i t h e r c o u n t e d i n t o t a l , o r e s t i m a t e d . I n t h e p r o c e d u r e f o r e s t i m a t i n g n u m b e r s , t h e a n i m a l s w e r e s p r e a d e v e n l y o v e r a d i s h 100 mm d i a m e t e r , t h e a r e a o f w h i c h h a d b e e n s u b d i v i d e d i n t o s q u a r e s o f 1.0 cm ; o n e o f t h e s q u a r e s w a s c h o s e n a t r a n d o m a n d t h e n u m b e r s o f o r g a n i s m s c o u n t e d . T h e s a m p l e w a s s t i r r e d a n d t h e p r o c e d u r e r e p e a t e d a s e c o n d a n d t h i r d t i m e . T h e a v e r a g e o f t h e t h r e e c o u n t s , m u l t i p l i e d b y t h e a r e a o f t h e d i s h , g a v e a n e s t i m a t e o f t h e n u m b e r o f o r g a n i s m s i n t h e d i s h . ( 2 ) T h e f r a c t i o n w a s r i n s e d b r i e f l y w i t h t a p w a t e r , d r a i n e d a n d b l o t t e d f o r 5 m i n o n W h a t m a n N o . 1 f i l t e r p a p e r a n d w e i g h e d w e t t o t h e n e a r e s t 0.1 gm o n a t o r s i o n b a l a n c e . - 1 3 -( 3 ) T h e f r a c t i o n w a s t h e n f r e e z e - d r i e d ( s e c t i o n I I . 3 ) t o a c o n s t a n t w e i g h t , w e i g h e d d r y t o t h e n e a r e s t 0.02 mg o n a M e t t l e r B a l a n c e ( M o d e l H - 1 6 ) a n d s t o r e d i n a v a c u u m d e s i c c a t o r f o r s u b s e q u e n t a n a l y s i s o f RNA ( s e c t i o n I I . 4 ) . T o d e t e r m i n e t h e a v e r a g e w e t o r d r y w e i g h t o f i n d i v i d u a l s p e c i m e n s (mg d r y w e i g h t / i n d i v i d u a l ) t h e w e i g h t o f t h e f r a c t i o n s w a s d i v i d e d b y t h e t o t a l n u m b e r o f s p e c i m e n s . T a b l e s s u m m a r i z i n g t h e a n a l y s i s c a r r i e d o u t o n s a m p l e s a r e r e p o r t e d i n S t e p h e n s , F u l t o n , K e n n e d y , a n d P e a s e ( 1 9 6 7 ) a n d a r e r e p r o d u c e d i n t h e A p p e n d i x . C o r r e c t i o n s s u b s e q u e n t l y f o u n d t o b e n e c e s s a r y +o " t h e o r i g i n a l d a t a o f t h e T a b l e s h a v e b e e n made. I I . 2 L A BORATORY S T U D I E S A r t e m i a s a l i n a , d e v e l o p m e n t a l s t a g e s . E g g s o f A r t e m i a s a l i n a w e r e h a t c h e d in 4 0 0 0 m l b e a k e r s . L a r g e n u m b e r s o f n a u p l i i w e r e t r a n s f e r r e d t o a t a n k c o n t a i n i n g 6 0 , 0 0 0 m l o f f i l t e r e d s e a w a t e r o f a p p r o x -i m a t e l y 30 %o s a l i n i t y a n d m a i n t a i n e d n e a r 25°C. T h e w a t e r w a s a e r a t e d a n d a g i t a t e d b y a i r f r o m a s m a l l a i r -pump. A t i n t e r v a l s t h e p o p u l a t i o n was d i s t r i b u t e d u n i f o r m l y b y s t i r r i n g a n d a s u b - s a m p l e t a k e n . S p e c i m e n s w e r e k i l l e d i n f o r m a l i n , r i n s e d w i t h f i l t e r e d s e a w a t e r , a n d t h e i r a v e r a g e l e n g t h d e t e r m i n e d f r o m i n d i v i d u a l l e n g t h m e a s u r e m e n t s made w i t h a n o p t i c a l m i c r o m e t e r . T h e - 14 -s p e c i m e n s w e r e t h e n f r e e z e - d r i e d t o a c o n s t a n t w e i g h t , a n d t h e a v e r a g e w e i g h t p e r i n d i v i d u a l w as d e t e r m i n e d t o t h e n e a r e s t 0.1 u g . A n o t h e r s u b - s a m p l e w a s f r e e z e - d r i e d f o r a n a l y s i s o f RNA. Two e x p e r i m e n t s w e r e c o n d u c t e d t o e x a m i n e t h e a b i l i t y o f S u t c l i f f e ' s R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p t o p r e d i c t t h e g r o w t h o f A. S a l i n a . F o r t h e f i r s t 18 d a y s o f E x p e r i m e n t I , 500 m l o f a c u l t u r e o f P h a e o d a c t y l u m  t r i c o r n u t u m B o h l i n was a d d e d d a i l y t o t h e t a n k c o n t a i n i n g t h e A r t e m i a i n o r d e r t o p r o v i d e a f o o d s u p p l y o f a t l e a s t 3 0 , 0 0 0 c e l l s / m l ( R e e v e , 1 9 6 4 ) ; f e e d i n g w a s t h e n d i s -c o n t i n u e d f o r t h e r e m a i n i n g 44 d a y s . I n t h e s e c o n d e x p e r i m e n t , a n i n i t i a l f o o d l e v e l o f 5 0 , 0 0 0 c e l l s / m l / d a y w a s g r a d u a l l y i n c r e a s e d t o 2 0 0 , 0 0 0 c e l l s / m l / d a y , i n o r d e r t h a t t h e r e w a s a l w a y s a n e x c e s s o f f o o d . C a l a n u s p l u m c h r u s , s t a g e V E i g h t e e n t o 25 C. p l u m c h r u s w e r e p l a c e d i n e a c h o f t w e l v e , 4 0 0 0 m l b e a k e r s f i l l e d w i t h f i l t e r e d s e a w a t e r a n d k e p t i n a c o l d r o o m a t 10°C f o r 20 d a y s . A t i n t e r v a l s s p e c i m e n s w e r e r e m o v e d f r o m a b e a k e r , f r e e z e - d r i e d , a n d i n d i v i d u a l l y w e i g h e d t o t h e n e a r e s t 0.02 mg. T h e RNA c o n t e n t o f t h e s e o r g a n i s m s w a s d e t e r m i n e d . I I . 3 P R E S E R V A T I O N OF ZOOPLANKTON BY F R E E Z E - D R Y I N G Z o o p l a n k t o n i c m a t e r i a l w a s f r e e z e - d r i e d i n a V i r t i s F r e e z e - D r y e r f o r 24 h r ; F i g . 3 s h o w s a r e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e d r a i n e d a n d b l o t t e d w e i g h t o f m a t e r i a l a n d t h e HOURS TO CONSTANT WEIGHT - 15 -t i m e r e q u i r e d f o r i t t o r e a c h c o n s t a n t w e i g h t . T h e f r e e z e - d r i e d s a m p l e s w e r e t h e n s t o r e d i n a v a c u u m d e s i c c a t o r . R e - a n a l y s i s o f z o o p l a n k t o n i c m a t e r i a l s t o r e d i n a v a c u u m d e s i c c a t o r f o r p e r i o d s u p t o 10 m o n t h s i n d i c a t e s n o s i g n i f i c a n t c h a n g e i n RNA v a l u e s ( T a b l e I ) . T A B L E I E f f e c t o f d e s i c c a t o r s t o r a g e o f f r e e z e - d r i e d z o o p l a n k t o n m a t e r i a l o n t h e RNA c o n t e n t . P L A N K T O N *RNA MONTHS OF * R E - A N A L Y S I S OF M A T E R I A L pg/mg d r y w t STORAGE RNA Ug/mg  M i x e d Z o o p l a n k t o n ( 1 ) 54 + 3.3 2 58 - 3.3 ( 2 ) 7 . 0 * 3 . 3 3 6 . 2 * 3 . 3 ( 3 ) 2 4 . 8 * 3.3 10 2 9 . 2 f 3.3 E u p h a u s i i d s 4.8 * 3,3 2 3 . 7 * 3 . 3 * I n c l u d e s t r u e r a n g e o f v a l u e f o r RNA s e t b y t h e p r e c i s i o n o f t h e m e t h o d ( s e c t i o n I I . 9 ) . I I . 4 S C H N E I D E R A S S A Y FOR RNA A P P L I E D TO ZOOPLANKTON T h e a n a l y s i s f o r RNA i n t h e p r e s e n t s t u d y o f m a r i n e z o o p l a n k t o n h a s b e e n b a s e d u p o n t h e S c h n e i d e r ( 1 9 4 5 ) p r o c e d u r e . I n t h i s p r o c e d u r e , t h e n u c l e i c a c i d s RNA a n d DNA a r e e x t r a c t e d w i t h e i t h e r h o t p e r c h l o r i c a c i d ( P C A ) o r t r i c h l o r o a c e t i c a c i d ( T C A ) . T h e p e n t o s e s u g a r s r i b o s e a n d d e s o x y r i b o s e , o f t h e p u r i n e n u c l e o t i d e p o r t i o n o f t h e RNA a n d DNA m o l e c u l e s , a r e t h e n d e h y d r a t e d t o a f u r f u r a l i n t h e p r e s e n c e o f c o n c e n t r a t e d h y d r o -c h l o r i c a c i d ( H C I ) . A s u b s e q u e n t c o n d e n s a t i o n w i t h 5 - m e t h y l r e s o r c i n o l ( o r c i n o l ) p r o d u c e s a g r e e n ( y e l l o w - 16 -r e a g e n t + b l u e c h r o m a g e n ) s o l u t i o n . T h e m a x i m u m a b s o r -p t i o n f o r t h i s s o l u t i o n o c c u r s a t 6 7 0 mu. T h e a m o u n t o f l i g h t a b s o r b e d ( a b s o r b a n c e ) i s p r o p o r t i o n a l t o t h e t o t a l a m o u n t o f RNA, p l u s o t h e r c h r o m o g e n i c m a t e r i a l s p r e s e n t , a n d i s m e a s u r e d i n a s p e c t r o p h o t o m e t e r . To e l i m i n a t e t h e i n t e r f e r e n c e f r o m DNA, a n d s o o b t a i n t h e a m o u n t o f RNA, i t i s n e c e s s a r y t o e s t i m a t e t h e a m o u n t o f d e s o x y r i b o s e b y m e a n s o f a D N A - s p e c i f i c r e a c t i o n s u c h a s t h e d i p h e n y -l a m i n e t e s t ( S c h n e i d e r , 1 9 4 5 ) ; t h e a m o u n t o f DNA i s s u b t r a c t e d f r o m t h e t o t a l . T h e r e m a i n i n g a b s o r b a n c e i s r e l a t e d t o t h e a b s o r b a n c e o f a k n o w n a m o u n t o f RNA s t a n -d a r d i n o r d e r t o c a l c u l a t e t h e RNA c o n t e n t o f a g i v e n w e i g h t o f p l a n k t o n i c m a t e r i a l . T h e a b o v e p r o c e d u r e i s v a l i d i f DNA i s t h e o n l y c o n t a m i n a n t p r e s e n t i n t h e e x t r a c t s o f p l a n k t o n i c m a t e r i a l s . I f o t h e r c h r o m o g e n i c s u b s t a n c e s a r e e x t r a c t e d , a n d c o n t r i b u t e t o t h e a b s o r b a n c e m e a s u r e d a t 6 7 0 mp, t h e c a l c u l a t e d RNA c o n t e n t w i l l b e i n e r r o r . R i c k e t t s ( 1 9 6 6 ) h a s r e p o r t e d RNA c o n t a m i n a t i n g m a t e r i a l s w i t h a b s o r p t i o n s p e c t r a s i m i l a r t o RNA i n c e r t a i n s p e c i e s o f p h y t o p l a n k t o n . S i m i l a r i n f o r m a t i o n i s n o t a v a i l a b l e f o r z o o p l a n k t o n . S c h n e i d e r ( 1 9 4 5 ) a s s u m e d f o r h i s p r o c e d u r e t h a t t h e r a t i o o f p u r i n e t o p y r i m i d i n e n u c l e o t i d e s i n t h e m a t e r i a l a n a l y z e d i s 1 : 1 . H o w e v e r , t h i s r a t i o h a s b e e n f o u n d t o v a r y f r o m 0.66 t o 2.13 i n t h e s p e c i e s s o f a r e x a m i n e d (Webb a n d L e v y , 1 9 5 8 ) . Webb a n d L e v y s u g g e s t t h a t c o m p a r i s o n s o f RNA l e v e l s b e t w e e n d i f f e r e n t s p e c i e s - . 1 7 - ... may d e p e n d n o t o n l y u p o n t h e r a t i o o f t h e n u c l e o t i d e s i n t h e s e s p e c i e s , b u t a l s o o n t h e e q u i v a l e n t r a t i o i n t h e p u r i f i e d RNA u s e d a s a s t a n d a r d . No d a t a a r e a v a i l a b l e o n t h e v a r i a t i o n o f t h e r a t i o i n z o o p l a n k t o n . S u t c l i f f e ( 1 9 6 5 ) m e a s u r e d t h e RNA c o n t e n t o f o r g a n i s m s e i t h e r d r i e d o r p r e s e r v e d i n e t h a n o l . T r i -c h l o r o a c e t i c a c i d w a s u s e d t o e x t r a c t t h e n u c l e i c a c i d s ; a n d e t h a n o l w a s u s e d t o r e m o v e l i p i d s . T h e RNA c o n t e n t (jag RNA/mg d r y w e i g h t ) o f s p e c i m e n s w a s c a l c u l a t e d f r o m t h e t o t a l a b s o r b a n c e o f t h e c o l o u r e d p r o d u c t a n d c o r r e c t i o n s w e r e n o t made f o r DNA o r o t h e r c h r o m o g e n i c m a t e r i a l s . I n t h e p r e s e n t s t u d y , PCA w a s u s e d i n s t e a d o f TC A ; t h e e x t r a c t i o n o f l i p i d s w a s o m i t t e d . T h e b o i l i n g t i m e o f t h e h o t p e r c h l o r i c a c i d e x t r a c t t r e a t e d w i t h t h e r e s o r c i n o l r e a g e n t w a s i n c r e a s e d f r o m 20 t o 45 m i n s ( H o r e c k e r , S m y r n i o t i s , a n d S e e g m i l l e r , 1 9 5 1 ) . T h e RNA c o n t e n t w a s c a l c u l a t e d f r o m t h e t o t a l a b s o r b a n c e o f t h e c o l o u r e d p r o d u c t . D e t a i l s o f t h e p r o c e d u r e s a r e d e s c r i b e d i n t h e n e x t s e c t i o n . I I . 4 . 1 A N A L Y T I C A L PROCEDURE  R e a g e n t s a n d S t a n d a r d s T h e o r c i n o l r e a g e n t i s u n s t a b l e a n d m u s t b e p r e p a r e d i m m e d i a t e l y b e f o r e u s e . I t i s made up b y a d d i n g 0.5 gm F e C l 3 , a n d 1.0 gm 5 - m e t h y l r e s o r c i n o l ( o r c i n o l ) t o 10 0 m l o f c o n c e n t r a t e d H C I . - 18 -A p r i m a r y RNA s t a n d a r d was p r o v i d e d by d i s s o l v i n g 10 mg o f p u r i f i e d y e a s t RNA (Type I , Sigma Chemical Corp.) i n 100 ml o f 0.7N PCA t o p r o v i d e a c o n c e n t r a t i o n o f 100 pg o f RNA/ml of p e r c h l o r i c a c i d . A s e t of secondary s t a n d a r d s made up to s t r e n g t h s o f 0 , 10, 30 , 50, 70, and 100 jug RNA/ml of PCA was used i n each s e r i e s o f a n a l y s e s t o a s s e s s the e f f e c t o f any u n c o n t r o l l e d sources o f v a r i a t i o n i n the c o n d i t i o n s under which the a n a l y s e s were c a r r i e d out. The r e s u l t s o f s e v e r a l a n a l y s e s are shown i n F i g . 4; each a n a l y s i s i s numbered. The absorbances a t 670 mu are shown i n F i g . 4a and the d i f f e r e n c e i n absorbances between the wave-lengths 670 and 615 mu i s shown i n F i g . 4b. The d e t a i l s and reasnns f o r u s i n g the 670 minus 615 m^ i absorbance are g i v e n i n s e c t i o n I I . 4 . 2 . A n a l y s i s A p p r o x i m a t e l y 10 mg of f r e e z e - d r i e d and p u l v e r i z e d p l a n k t o n m a t e r i a l was suspended i n 1.0 ml o f d i s t i l l e d w a ter i n a c e n t r i f u g e t u b e , c h i l l e d i n a b a t h o f i c e d water to 0°C, and 1.0 ml o f c o l d (0°) 1.4N PCA added. The c o n t e n t s o f the tube were mixed on a V o r t e x J u n i o r m i x e r , i n c u b a t e d at 0°C f o r t h i r t y m i n u t e s , and then c e n t r i f u g e d a t 10,000 RPM i n a S o r v a l l S - l h i g h speed c e n t r i f u g e f o r 15 min. The s u p e r n a t a n t f l u i d was removed and d i s c a r d e d and 2.5 mis o f 0.7N PCA was added to the r e s i d u e . T h i s m i x t u r e was heated i n a c o v e r e d tube at 100°C f o r 30 min, and t h e n c e n t r i f u g e d at 10,000 RPM f o r 15 min. One-half m i l l i l i t r e o f the s u p e r n a t a n t f l u i d was then p i p e t t e d i n t o a c l e a n t e s t i F i g . 3: R e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e w e t w e i g h t I. o f z o o p l a n k t o n l o a d e d i n t o a V i r t i s F r e e z e ' d r y e r a n d t h e t i m e r e q u i r e d f o r t h e s a m p l e s i .to r e a c h c o n s t a n t d r y w e i g h t . IO r^ocvj — in CM to '-CVJ -, O O O 00 O CD 4. ° 5 O CJ in ci _i_ <fr ro d d 9I9-0Z9 _ i _ CVJ — d d 30NV9UOS8V to s^rocj — « • • • m 10V CM • • • io io IO IO _TCM*-O oo CVJ • — to O CO O o CVJ rjt < Z or I I L 0 CO to _ j o o QZ9 • i 1 ^ CVJ o d d 30NV8UOS8V - 20 -t u b e , a n d 0.5 m l o f 0.7N P C A a n d 1.0 m l o f t h e o r c i n o l r e a g e n t w e r e a d d e d . T h e m i x t u r e w a s h e a t e d f o r 45 m i n a t 1 0 0 ° C . A f t e r c o o l i n g , t h e a b s o r b a n c e o f t h e c o l o u r e d s o l u t i o n w a s r e c o r d e d o v e r t h e w a v e - l e n g t h s 5 5 0 t o 700 mp u s i n g a B a u s c h a n d Lomb S p e c t r o n i c 500 r e c o r d i n g s p e c t r o -p h o t o m e t e r . F r o m t h e a b s o r b a n c e r e c o r d e d a t 6 7 0 mp, o r f r o m t h e d i f f e r e n c e i n a b s o r b a n c e r e c o r d e d a t t h e w a v e - l e n g t h s 6 7 0 a n d 6 1 5 mp ( r e f e r r e d t o i n t h e s u b s e q u e n t d i s c u s s i o n o f t h i s t e c h n i q u e a s 6 7 0 m i n u s 6 1 5 m p ) , t h e RNA c o n t e n t o f a g i v e n d r y w e i g h t o f s a m p l e i n p g RNA/mg d r y w t o f s a m p l e w a s c a l c u l a t e d a s f o l l o w s : RNA pg/mg = A b s o r b a n c e o f s a m p l e / m l t o t a l m l h o t P C A e x t r a c t A b s o r b a n c e / p g RNA s t d / m l * mg d r y w t s a m p l e u s e d * O b t a i n e d f r o m t h e s l o p e o f t h e s t a n d a r d c u r v e a s i n F i g 4 a a n d 4 b . F i g . 5: A b s o r p t i o n s p e c t r a f o r the r e a c t i o n p r o d u c t s o f the hot PCA e x t r a c t s o f the RNA s t a n d a r d and s e v e r a l s p e c i e s o f z o o p l a n k t o n t r e a t e d w i t h o r c i n o l . 1.0, RNA Standard (10, Orehomonella sp. Calanus plumchrus Euphausia pacifica Chaetoanaths 5 0 , 8 lOOjig/ml) 600 650 WAVELENGTH 700 - .2 3 -o f t h e s p e c i e s , d i s c r e p a n c i e s b e t w e e n t h e s e v a l u e s w e r e o b s e r v e d a n d , w h e r e p r e s e n t , t h e s e d i s c r e p a n c i e s i n d i c a t e d t h a t RNA e s t i m a t i o n s b a s e d u p o n t h e 6 7 0 mu a l o n e c o u l d g i v e e r r o n e o u s r e s u l t s . S e c o n d l y , t h e n a t u r e o f t h e i n t e r f e r i n g m a t e r i a l s w a s i n v e s t i g a t e d . S i n c e DNA h a s b e e n s u g g e s t e d b y v a r i o u s a u t h o r s ( i n M u n r o a n d F l e c k , 1 9 6 6 ) t o p r o d u c e a n y w h e r e f r o m 0.3 t o 1 9 % o f t h e c o l o u r g i v e n b y RNA, t h e a m o u n t o f DNA w a s e s t i m a t e d f r o m r e s u l t s o b t a i n e d u s i n g t h e DNA-s p e c i f i c r e a g e n t d i p h e n y l a m i n e ( S c h n e i d e r , 1 9 4 5 ) . R i b o -n u c l e i c a c i d v a l u e s , c o r r e c t e d a n d u n c o r r e c t e d f o r t h e p r e s e n c e o f DNA d i d n o t s i g n i f i c a n t l y d i f f e r i n f o u r c a t e g o r i e s o f a n i m a l s r e p r e s e n t a t i v e o f t h e a r e a s a m p l e d ( T a b l e I l a ) . I n t w o o t h e r s e t s o f a n a l y s e s TCA a n d P C A w e r e u s e d w i t h m a t e r i a l f r o m a s i n g l e s a m p l e o f p l a n k t o n ; a n d e t h a n o l w a s u s e d t o e x t r a c t l i p i d s i n a t h i r d s e t o f t h e same s a m p l e . No s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s w e r e o b s e r v e d among t h e r e s u l t s f r o m t h e s e a n a l y s e s ( T a b l e l i b ) . T h u s t h e p r e s e n c e o f d e s o x y r i b o s e n u c l e i c a c i d , a n d t h e p o s s i b i l i t y t h a t t h e p r e f e r e n t i a l u s e o f P C A i n s t e a d o f TCA w o u l d a f f e c t t h e r e l e a s e o f c h r o m o g e n i c m a t e r i a l s , p r o -b a b l y c a n b e e l i m i n a t e d a s s o u r c e s o f i n t e r f e r e n c e i n t h e a s s a y o f RNA. T h e e x t r a c t i o n o f l i p i d s d o e s n o t a p p e a r t o a f f e c t t h e d e t e r m i n a t i o n o f RNA. T h e r e m a i n i n g s o u r c e s o f i n t e r f e r i n g m a t e r i a l s t o b e c o n s i d e r e d a r e p r o t e i n s a n d c a r b o h y d r a t e s . P r o t e i n may c o n s t i t u t e up t o 8 0 % o f t h e d r y w e i g h t o f some o f t h e s p e c i e s e x a m i n e d ( E . p a c i f i c a , -. 24 -T A B L E I I a RNA v a l u e s c o r r e c t e d a n d u n c o r r e c t e d f o r DNA: d a t a f r o m N a n o o s e B a y 1 9 6 5 DNA RNA Ug/mg @ 6 70 mu P L A N K T O N M A T E R I A L ug/mg *UNCORRECTED FOR DNA CORRECTED FOR DNA M i x e d z o o p l a n k t o n 6, , 7 36. , 8 + 1. , 5 36. , 0 C a l a n u s p l u m c h r u s 1 9 . , 0 26. , 1 .3. . 3 23 . ,9 E u p h a u s i a p a c i f i c a ( A d u l t s ) 1 0 . , 0 •17. , 9 .2. , 3 16 . ,4 C h a e t o g n a t h s 35 . , 0 1 1 . . 0 ± 3. , 3 9. ,9 A m p h i p o d s 4. , 0 14. . 5 ± 3. , 3 14. , 2 T A B L E I I b E f f e c t s o f r e a g e n t s u s e d i n RNA a s s a y o n t h e d e t e r m i n a t i o n o f RNA *RNA, Ug/mg DRY WEIGHT L I P I D S EX- L I P I D S P L A N K T O N M A T E R I A L TCA E X T R A C T E D P C A E X T R A C T E D TRACTED UNEX-" " TRACTED M i x e d z o o p l a n k t o n 8 . 6 - 2 . 4 8.6 - 2.4 9.3 - 2.4 8 . 6 t 2.4 ( t w o s a m p l e s ) * I n c l u d e s t r u e r a n g e o f v a l u e f o r RNA s e t b y t h e p r e c i s i o n o f t h e m e t h o d ( s e c t i o n I I . 9 ) . - 25 -S a g i t t a s p ; R a y m o n t , A u s t i n , a n d L i n f o r d , 1 9 6 4 ) . A r t h r -o p o d i n , a p r o t e i n i n t h e c u t i c l e o f a r t h r o p o d s , i s k n o w n t o b e s o l u b l e i n h o t 1 0 % T C A ( R i c h a r d s , 1 9 5 1 ) . C a r b o h y d r a t e s u s u a l l y c o n s t i t u t e o n l y a f e w p e r c e n t o f t h e t o t a l d r y w e i g h t o f z o o p l a n k t o n ( R a y m o n t a n d C o n o v e r , 1 9 6 1 ) , b u t l i p i d s may b e a n a d d i t i o n a l s o u r c e c o n v e r t e d b y m e t a b o l i c p r o c e s s e s ( M a r s h a l l a n d O r r , 1 9 5 5 ; R a y m o n t a n d C o n o v e r , 1 9 6 1 ) i n t o g l y c o g e n a n d g l u c o s e ( a s i n d e c a p o d c r u s t a c e a n s -P a s s a i n o , 1 9 6 0 ) ; b o t h o f t h e s e c a u s e i n t e r f e r e n c e ( M u n r o a n d F l e c k , 1 9 6 6 ) , a s w o u l d a n y g l y c o p r o t e i n s ( M a r g r e t h a n d N o v e l l o , 1 9 6 4 ) . A r o u g h e x a m i n a t i o n made f o r t h e p r e s e n c e o f c a r b o h y d r a t e s e n t a i l e d d i g e s t i n g t h e h o t P C A e x t r a c t s o f s e v e r a l s a m p l e s o f p l a n k t o n a n d a l s o k n o w n q u a n t i t i e s o f RNA, DNA a n d g l u c o s e i n c o n c e n t r a t e d F ^ S O ^ , a n d e x a m i n i n g t h e i r u l t r a v i o l e t a b s o r p t i o n s p e c t r a b e t w e e n t h e w a v e -l e n g t h s 220 t o 360 mu ( F i g . 6 ) . C a r b o h y d r a t e s e x h i b i t a p e a k a t 320 mp; a n a d d i t i o n a l p e a k a t 260 mu i n d i c a t e s t h e p r e s e n c e o f RNA a n d DNA ( B a t h , 1 9 5 8 ) . T h e s e c o n d p e a k a t 3 2 0 mu i n t h e c u r v e f o r RNA i n d i c a t e s t h a t a q u a n t i t y o f r i b o s e w a s p r e s e n t i n t h e P C A e x t r a c t o f t h e RNA s t a n d a r d . I n P h a e o d a c t y l u m , c o n s i d e r a b l e q u a n t i t i e s o f c a r b o h y d r a t e m a t e r i a l s a r e e v i d e n t a t 320 mp ( F i g . 6 ) . One s u c h c a r b o h y d r a t e , g l u c o s e , c a n p r o d u c e up t o 4% o f t h e c o l o u r o f a n e q u i v a l e n t w e i g h t o f r i b o s e ( H o r e c k e r , 1 9 5 7 ) a n d b e c a u s e t h e r e i s 15 t i m e s a s m u c h g l u c o s e a s r i b o s e i n t h i s s p e c i e s ( P a r s o n s , S t e p h e n s , a n d S t r i c k l a n d , 1 9 6 1 ) , F i g . 6: U l t r a v i o l e t a b s o r p t i o n s p e c t r a f o r t h e r e a c t i o n p r o d u c t s o f h o t P C A e x t r a c t s o f p l a n k t o n i c s p e c i e s , a n d RNA, DNA, a n d g l u c o s s t a n d a r d s d i g e s t e d i n H2SO4. - 2 7 -g l u c o s e a l o n e c o u l d c o n c e i v a b l y c o n t r i b u t e a s m u c h a s 6 0 % o f t h e t o t a l a b s o r b a n c e . I n t h e s a m p l e s o f m i x e d z o o -p l a n k t o n a n d o f C. p l u m c h r u s , ( F i g . 6 ) , c a r b o h y d r a t e s a r e e v i d e n t , b u t w h e t h e r t h i s i s r i b o s e o r some o t h e r c a r b o -h y d r a t e was n o t d e t e r m i n e d . C h r o m o g e n i c m a t e r i a l s o t h e r t h a n RNA a n d DNA i n t h e s a m p l e o f m i x e d z o o p l a n k t o n may a l s o b e i n d i c a t e d w h e n t h e p e a k a t 260 mu i s c o m p a r e d w i t h t h e e q u a l a b s o r b a n c e o f t h e RNA s t a n d a r d a t 260 a n d 360 mu. T h e i d e n t i t y i s n o t k n o w n o f t h e s u b s t a n c e o r s u b s t a n c e s p r o d u c i n g s u c h a d d i t i o n a l a b s o r b a n c e a t 260 mu. B e c a u s e t h e s u b s t a n c e s c a u s i n g t h e i n t e r f e r e n c e a r e n o t k n o w n i n z o o p l a n k t o n , t h e f o l l o w i n g p r o c e d u r e w a s a d o p t e d . T h e c o m p l e t e a b s o r p t i o n s p e c t r u m b e t w e e n t h e w a v e - l e n g t h s 5 5 0 a n d 700 mu w a s r e c o r d e d f o r a l l s a m p l e s o f z o o p l a n k t o n a n a l y s e d . R i b o n u c l e i c a c i d v a l u e s w e r e c o m p u t e d f r o m t h e a b s o r b a n c e a t t h e s t a n d a r d w a v e - l e n g t h 670 mu a n d f r o m t h e d i f f e r e n c e i n a b s o r b a n c e r e c o r d e d a t t h e t w o w a v e - l e n g t h s 6 7 0 a n d 6 1 5 m|i. T h e l a t t e r c a l c u l a t i o n i s b a s e d o n a m e t h o d o u t l i n e d i n M u n r o a n d F l e c k ( 1 9 6 6 ) i n w h i c h t w o a s s u m p t i o n s a r e m a d e . F i r s t l y , i f t h e r e w e r e n o i n t e r f e r e n c e , v a l u e s o f RNA w o u l d n o t d i f f e r w h e t h e r t h e y a r e c a l c u l a t e d f r o m t h e d i f f e r e n c e i n a b s o r b a n c e a t 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mu o r f r o m t h e a b s o r b a n c e a t 6 7 0 mu. T h e r e l a t i o n s h i p s b e t w e e n c o n c e n t r a t i o n o f RNA a n d t h e a b s o r b a n c e p r o d u c e d b y g i v e n a m o u n t s o f RNA a t 6 70 mu a n d a t 6 70 m i n u s 6 1 5 mu a r e s h o w n i n F i g . 4 a a n d 4b r e s p e c t i v e l y . T h e r e l a t i o n s h i p s a r e l i n e a r o v e r t h e r a n g e o f c o n c e n t r a t i o n s b e t w e e n 0 a n d 70 u g / m l . . - 28 -C o n s e q u e n t l y , RNA v a l u e s c a n b e c a l c u l a t e d b y e i t h e r r e l a t i o n s h i p a t RNA c o n c e n t r a t i o n s l e s s t h a n 70 u g / m l . A t h i g h c o n c e n t r a t i o n s ( a b o v e 70 u g / m l ) t h e r e l a t i o n s h i p s h o w n i n F i g . 4b i s s k e w e d . T h e s k e w i n g r e p r e s e n t s a d e p a r t u r e f r o m B e e r ' s l a w g o v e r n i n g t h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e n c o n c e n t r a t i o n o f a b s o r b i n g e n t i t i e s a n d t h e i r a b s o r b a n c e ( M e l l o n , 1 9 5 0 ) , a n d s h o w s t h a t i n t e r a c t i o n h a s o c c u r e d among t h e c o n s t i t u e n t s o f RNA. Few a b s o r -b a n c e s i n t h e z o o p l a n k t o n i c m a t e r i a l r e c o r d e d a t 670 m i n u s 6 1 5 mp f a l l i n t h e r a n g e o f t h e s k e w e d p o r t i o n o f t h e c u r v e . T h e r e f o r e , e r r o r s r e s u l t i n g f r o m i n t e r a c t i o n a r e n o t e x p e c t e d t o b e a p r o b l e m . S e c o n d l y , i t w a s a s s u m e d t h a t i f t h e i n t e r -f e r i n g m a t e r i a l s h a v e a b s o r b a n c e s s i m i l a r a t 6 7 0 a n d 6 1 5 mp, RNA v a l u e s may b e c a l c u l a t e d f r o m t h e d i f f e r e n c e i n a b s o r b a n c e r e c o r d e d a t e a c h w a v e - l e n g t h . S u c h s i m i l a r i t i e s h a v e b e e n o b t a i n e d f o r t h e a d d i t i o n a l c h r o m o g e n i c m a t e r i a l w h i c h c a n b e e x t r a c t e d f r o m t h e r e s i d u e o f p l a n k t o n m a t e r i a l ( O r c h o m o n e l l a s p ) a f t e r t h e n u c l e i c a c i d s h a v e b e e n r e m o v e d ( F i g . 7 ) . T h e a b s o r b a n c e a t t h e t w o w a v e -l e n g t h s w a s a l s o s i m i l a r f o r a s o l u t i o n o f g l u c o s e ( 1 0 0 p g / m l ) t r e a t e d w i t h t h e o r c i n o l r e a g e n t ( F i g . 7 ) . I t i s p o s s i b l e t h a t i n z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s , g l u c o s e c o u l d a r i s e a s a h y d r o l y t i c p r o d u c t o f g l y c o g e n o r g l y c o p r o t e i n s . P r e s e n t t e c h n i q u e s c o r r e c t f o r t h e p r e s e n c e o f s u c h i n t e r f e r e n c e . I f t h e a b s o r b a n c e s o f t h e i n t e r f e r i n g m a t e r i a l s i F i g . 7: A b s o r p t i o n _ - s p . e Q . t r a f o r t h e r e a c t i o n \ p r o d u c t s o f h o t P C A e x t r a c t e d g l u c o s e a n d J Q r c h o m o n e l l a s p t r e a t e d w i t h o r c i n o l . - 30 -a t 6 7 0 mp a n d 6 1 5 mu a r e n o t s i m i l a r , t h e t e c h n i q u e u s e d i n t h e p r e s e n t s t u d y t o p r o v i d e RNA v a l u e s w i l l p r o d u c e i n -a c c u r a c i e s . A n u n d e r e s t i m a t e o f t h e RNA c o n t e n t w i l l o c c u r w h e r e t h e a b s o r b a n c e a t 6 7 0 i s l e s s t h a n a t 6 1 5 mu, a n d a n o v e r e s t i m a t e i f i t i s g r e a t e r . I n t h e p r e s e n t s t u d y , t h e p r e s e n c e o f i n t e r -f e r e n c e i s s h o w n b y t h e d i f f e r e n c e s i n RNA v a l u e s c a l c u -l a t e d f o r t h e a b s o r b a n c e a t 6 7 0 mu a n d 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp. I f t h e v a l u e s a r e t h e s a m e , " e i t h e r may b e u s e d t o p r e d i c t g r o w t h . I f t h e y d i f f e r ( s t a t i s t i c a l l y ) , t h e v a l u e c a l c u -l a t e d f r o m t h e a b s o r b a n c e a t 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp i s u s e d , b u t t h i s p r o v i d e s a p r e d i c t e d g r o w t h r a t e w h i c h i s p r o b a b l y m i n i m a l . I I . 4 . 3 P R E C I S I O N R e p e a t e d a n a l y s e s u p o n a h o m o g e n o u s s a m p l e o f p l a n k t o n p r o v i d e a n e s t i m a t e o f t h e d e g r e e o f r a n d o m n e s s o f e r r o r s p r o d u c e d i n t h e S c h n e i d e r ( 1 9 4 5 ) p r o c e d u r e . T h e r e s u l t s o f s u c h a n a l y s e s a r e u s e d t o d e t e r m i n e t h e s t a n d a r d d e v i a t i o n o r Cj~ ( S n e d e c o r , 1 9 6 6 ) . I n t h e p r e s e n t s t u d y , p r e c i s i o n i s defined i n t h e m a n n e r u s e d b y S t r i c k l a n d a n d P a r s o n s ( 1 9 6 5 ) ; a n d a t t h e 9 5 % l e v e l , t h e p r e c i s i o n ( P ) i s 2\T~. T h e r e f o r e , i f n d e t e r m i n a t i o n s a r e made o n a c e l l f r e e h o m o g e n a t e o f z o o p l a n k t o n t h e t r u e r e s u l t s o f t h e a n a l y s e s w i l l l i e i n t h e r a n g e : M e a n o f n d e t e r m i n a t i o n s - P / n 1 ^ w i t h 9 5 % c o n f i d e n c e T a b l e I I I s u m m a r i z e s t h e r e s u l t s o f RNA a n a l y s e s made u p o n a n i m a l s f r o m o n e s a m p l e o f p l a n k t o n . T h e RNA v a l u e s f o r t w o l o t s o f t h i s m a t e r i a l a v e r a g i n g i n d r y w t 31 -T A B L E I I I P r e c i s i o n o f t h e A n a l y s i s MEAN WT. MEAN RNA NUMBER s p = 2 S TRUE RANGE S A M P L E (mg) <ug/mg R E P L I C A T E S RNA pg/mg 7. 80 3 6 . 8 5 1.67 3.34 3 6 . 8 t 1. 5 2 2 . 7 3 3 7 . 8 8 2.37 4.74 3 7 . 8 - 1.7 C o m p a r i s o n o f m e a n RNA v a l u e s u s i n g S t u d e n t s - - t ( S p u e o ^ e l , 1 9 6 1 ) 1 X ' ~ * 2 , • w h e r e (T = I N i S i 2 + N ? S 7 2 t = 1 . 0 6 / 1 . 3 2 = 0.80 N . S . a t t . 0 5 f o r 11 d e g r e e s o f f r e e d o m . ' - 32 -7.80 mg and 22.73 mg were 36.8 - 1.5 ug/mg and 37.8 - 1.7 jjg/mg. Comparison of these values using Student's-t test (Sp\e<^e.l, 196 I) showed no significant difference at the 95% level with 11 degrees of freedom. Routine analyses were carried out on 1 to 20 mg of sample. For most of the laboratory material two determinations were made on each sample, and the precision was - 2.3 ug RNA/mg dry wt. For the bulk of the f i e l d material only one determination of RNA was made, and the precision was - 3.3 ug RNA/mg dry wt. C H A P T E R I I I R E S U L T S G r o w t h o f t w o z o o p l a n k t o n i c s p e c i e s A r t e m i a  s a l i n a a n d E u p h a u s i a p a c i f i c a w a s o b s e r v e d o v e r a m a j o r p o r t i o n o f t h e i r l i f e s p a n . F o r A. s a l i n a , t h e s e o b s e r -v a t i o n s w e r e made i n t h e l a b o r a t o r y a n d c o v e r e d 62 d a y s . D u r i n g t h e f i r s t 20 d a y s t h e o r g a n i s m s w e r e f e d P h a e o d a c t y l u m t r i c o r n u t u m , b u t f o r t h e l a s t f o r t y - t w o d a y s , n o f o o d w a s a d d e d . E u p h a u s i a p a c i f i c a w a s o b s e r v e d o v e r o n e y e a r f r o m c o l l e c t i o n s made i n t h e f i e l d . R e s u l t s o f t h e s e i n v e s t i g a t i o n s s u g g e s t t h a t S u t c l i f f e ' s RNA/ G r o w t h r e l a t i o n s h i p w a s a b l e t o p r e d i c t t h e i n c r e a s e s i n w e i g h t o f A. s a l i n a w h i c h w e r e i n t h e e x p o n e n t i a l p h a s e o f g r o w t h , a n d o f t h e m o s t r a p i d l y g r o w i n g s t a g e s o f E. p a c i f i c a . H o w e v e r , i t may n o t b e p o s s i b l e t o u s e RNA t o p r e d i c t i n c r e a s e s i n w e i g h t p r i o r t o a n d s u b s e q u e n t t o t h e e x p o n e n t i a l p h a s e o f g r o w t h . F o r A. s a l i n a a n d E. p a c i f i c a a n d a l s o f o r m o s t o f t h e o t h e r o r g a n i s m s s t u d i e d , t r e n d s i n t h e d a t a o n RNA a n d d r y w e i g h t a p p e a r t o b e r e l a t e d . T h i s i s s o e v e n w h e n v a r i a t i o n i n t h e d a t a i n d i c a t e d t h a t n o t a l l o f t h e o b s e r v e d c h a n g e s r e p r e s e n t a n a c t u a l g r o w t h o f t h e p o p u -l a t i o n s a m p l e d . E x c e p t i o n s t o t h e g e n e r a l t r e n d s o c c u r e d i n t h e l a b o r a t o r y p o p u l a t i o n o f s t a r v e d , S t a g e V C a l a n u s  p l u m c h r u s , i n w h i c h f l u c t u a t i o n s i n t h e RNA c o n t e n t w e r e n o t a c c o m p a n i e d b y o b s e r v e d c h a n g e s i n w e i g h t , a n d i n a d u l t E. p a c i f i c a i n w h i c h t h e RNA c o n t e n t a p p e a r e d t o b e - >34 -r e l a t e d t o e g g p r o d u c t i o n . I n o t h e r i n s t a n c e s ( e . g . , E. p a c i f i c a c a l y p t o p i s a n d j u v e n i l e s ; c h a e t o g n a t h s ) t r e n d s i n t h e RNA c o n t e n t a p p a r e n t l y r e f l e c t e d f l u c t u a t i o n s i n t h e q u a n t i t y o f f o o d o r g a n i s m s ( e . g . , p h y t o p l a n k t o n o r s m a l l c o p e p o d s ) o r p e r h a p s i n t h e a b i l i t y o f a p a r t i c u l a r d e v e l o p m e n t a l s t a g e s u c h a s t h e c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a , t o f e e d o n t h e f o o d o r g a n i s m s a v a i l a b l e . I I I . l L A B ORATORY S T U D I E S A r t e m i a s a l i n a d e v e l o p m e n t a l s t a g e s D a t a f r o m t h e t w o e x p e r i m e n t s i n w h i c h A. s a l i n a w e r e g r o w n a n d s a m p l e d a r e s h o w n i n T a b l e I V a , b . R e p o r t e d a r e t h e w e i g h t / i n d i v i d u a l , d e t e r m i n e d b y d i r e c t w e i g h i n g a n d b y c o n v e r t i n g l e n g t h t o w e i g h t ; t h e RNA c o n t e n t com-p u t e d f r o m a b s o r b a n c e a t 6 7 0 mu a n d f r o m 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mu; t h e p e r c e n t e x p e c t e d g r o w t h / d a y , o b t a i n e d f r o m b o t h RNA v a l u e s ; a n d t h e c a l c u l a t e d p e r c e n t i n c r e a s e i n mg d r y w t / d a y o b t a i n e d f r o m d a t a p r e s e n t e d i n F i g s . 9, 1 0 . I t a p p e a r s f r o m T a b l e I V , t h a t t h e l e n g t h o f s p e c i m e n s i n t h e e a r l y s t a g e s o f d e v e l o p m e n t w a s a b e t t e r m e a s u r e o f g r o w t h t h a n w e i g h t b e c a u s e o f t h e d e c r e a s e d a c c u r a c y o f t h e M e t t l e r B a l a n c e w h e n v e r y s m a l l a m o u n t s o f m a t e r i a l w e r e b e i n g w e i g h e d . I n t h e l a t e r s t a g e s o f d e v e l o p m e n t o f A. s a l i n a , t h e m a j o r i t y o f t h e l e n g t h s a n d w e i g h t s o f t h e p r e s e n t m a t e r i a l f a l l w i t h i n t h e s c a t t e r o f p o i n t s ( r e p r o d u c e d i n F i g . 8) f r o m w h i c h R e e v e ( 1 9 6 4 ) d e r i v e d h i s r e l a t i o n s h i p b e t w e e n l e n g t h a n d w e i g h t f o r t h e s p e c i e s . I n o r d e r t o u s e t h e i n f o r m a t i o n o b t a i n e d f r o m RNA T A B L E I V a A r t e m i a s a l i n a E x p e r i m e n t I: C h a n g e s i n t h e d r y w e i g h t / i n d i v i d u a l a n d RNA c o n t e n t o f A r t e m i a s a l i n a ; p e r c e n t e x p e c t e d a n d o b s e r v e d g r o w t h / d a y a r e s h o w n . OBSERVED m g / I N D I V I D U A L RNA pg/mg % E X P E C T E D GROWTH/DAY C DAY D I R E C T CONVERTED 6 7 0 m i n u s 6 70 m i n u s % OBSERVED M P L E D WEIGHING LENGTH 670 mu 61 5 mp 670 mp 6 1 5 mp GROWTH/DAY 1 8.0 2.5 4 0 . 9 2 8 . 5 29. 8 26 . 2 3.9 3 - 2.7 4 7 . 2 2 9 . 5 3 1 . 0 26 . 6 5.9 5 - 3.0 1 1 2 9 6 . 9 3 9 . 1 3 7 . 8 3.3 7 - 3.2 9.0 9 - 3.8 7 0 . 2 54. 8 34. 9 3 2 . 4 1 1 . 0 11 8.0 4.6 9 9 . 2 101.-2 3 8 . 0 3 8 . 1 4.4 13 1 1 . 0 5.0 127 9 6 . 9 4 4 . 2 • 3 7 . 8 1.9 18 8.0 5.5 9 6 . 4 6 9 . 6 3 7 . 8 34. 8 4 6 . 4 23 37 - 8 0 . 2 5 2 . 0 3 6 . 0 3 2 . 0 1 7 . 0 31 84 1 3 0 6 9 . 4 5 1 . 8 34. 8 3 1 . 9 5.8 47 4 4 3 3 2 0 6 3 . 0 6 9 . 4 3 3 . 8 34-. 7 3.4 63 554 550 2 2 . 0 1 4 . 0 2 3 . 2 1 9 . 7 -T A B L E I V b A r t e m i a s a l i n a E x p e r i m e n t I I : C h a n g e s i n t h e d r y w e i g h t / i n d i v i d u a l a n d RNA c o n t e n t o f A r t e m i a s a l i n a ; p e r c e n t e x p e c t e d a n d o b s e r v e d g r o w t h / d a y a r e s h o w n OBSERVED m g / I N D I V l D U A L DAY D I R E C T CONVERTED SAMPLED WEIGHING LENGTH RNA Ug/mg % E X P E C T E D GROWTH/DAY C m 6 7 0 m i n u s 6 7 0 m i n U s '% OBSERVED 6 7 0 mu 6 1 5 mu 6 7 0 my 6 1 5 mu GROWTH/DAY 1 3 7 10 12 14 19 21 24 33 38 4.5 5. 3 8.0 9.4 1 1 . 0 1 2 . 3 9.9 1 7 . 7 2 5 5 6 6 10 1 6 . 8 1 8 . 7 30 . 0 24.0 3 1 . 0 125 4 7 . 5 5 9 . 6 6 6 . 3 5 4 . 0 5 3 . 2 74. 4 44 . 7 56 . 6 4 4 . 4 2 7 . 8 3 2 . 8 25.2 3 3 . 8 44 . 6 30 . 5 4 0 . 1 3 0 . 7 3 3 . 1 3 2 . 8 30 . 5 26 . 0 34, 32, 32, 35, 30, 27 25 27 30 26 6 1 9 7 9 4 2 . 8 0.9 2.6 1 0 . 7 5. 5 1 7 . 1 5.2 F i g . 8: W e i g h t / l e n g t h d a t a f o r A r t e m i a s a l i n a -s u p e r i m p o s e d u p o n R e e v e ' s ( 1 9 6 4 ) r e l a t i o n s h i p : f o r t h e a n i m a l . - 3 7 -LENGTH (mm.) F i g . 9 : Growth of Artemia s a l i n a i n Experiment I.,-- 3 8 -IOO0L-O L I » ' I i 1 1—i—i i i i | 10 1 0 0 DAYS AFTER HATCHING F i g . 1 0 : G r o w t h - o f A r t e m i a s a l i n a i n E x p e r i m e n t " I I . -3*-01 I J 1 1—I I ll| 1 1 I I I I | | 10 100 DAYS AFTER HATCHING - '40 •.-a n a l y s e s o f t h e e a r l y s t a g e s o f A. s a l i n a , i t w a s n e c e s s a r y t o a s s u m e t h a t t h e r a t i o s b e t w e e n l e n g t h a n d w e i g h t o f t h e s e s t a g e s a l s o c o n f o r m e d t o R e e v e ' s r e l a t i o n s h i p . I n t h e p r e s e n t s t u d y , t h e g r o w t h o f a l l d e v e l o p m e n t a l s t a g e s o f A. s a l i n a w e r e e x p r e s s e d a s a n i n c r e a s e i n w e i g h t a n d a r e c o n v e r t e d f r o m l e n g t h . T h e i n c r e a s e i n w e i g h t o f A. s a l i n a f o r t h e t w o e x p e r i m e n t s i s s h o w n a s a f u n c t i o n o f t i m e i n F i g s . 9, 1 0 ; o b s e r v e d w e i g h t s w e r e p l o t t e d a s ( • ) . T h e p e r c e n t a g e i n c r e a s e i n w e i g h t / d a y ( C m ) b e t w e e n o b s e r v a t i o n s o f A. s a l i n a d e v e l o p m e n t a l s t a g e s w e r e c a l c u l a t e d u s i n g W i n b e r g ' s ( 1 9 5 6 ) e q u a t i o n : c m = i o 1 / 1 1 ( l es V l 0 S W o ) -1 x 100 w h e r e n = d u r a t i o n o f p e r i o d b e t w e e n o b s e r v a t i o n s o f w e i g h t W Q = i n i t i a l w e i g h t W n = w e i g h t a t t i m e n T h e r e s u l t s o f t h e s e c a l c u l a t i o n s a r e r e p o r t e d i n T a b l e I I I . A l t h o u g h t h e d a t a o b t a i n e d i n b o t h o f t h e e x p e r i -m e n t s w e r e u s e d t o h e l p c o n f i r m t h e a p p l i c a t i o n o f R e e v e ' s r e l a t i o n s h i p f o r u s e w i t h t h e y o u n g e r s t a g e s o f A. s a l i n a , i t i s b e l i e v e d t h a t e x c e s s P h a e o d a c t y l u m f e d t o t h e A. s a l i n a c u l t u r e i n e x p e r i m e n t I I may h a v e p r o d u c e d t h e e r r a t i c g r o w t h s h o w n b y t h e c u r v e i n F i g . 1 0 . T h e e x a m i n a t i o n o f t h e a b i l i t y o f RNA t o p r e d i c t g r o w t h i n a l a b o r a t o r y c u l t u r e t h e r e f o r e , w i l l b e c o n f i n e d t o t h e r e s u l t s o f e x p e r i m e n t I . RNA v a l u e s ( T a b l e I V a ) i n e x p e r i m e n t I t e n d e d t o - 41 -•. i n c r e a s e t o w a r d t h a t p a r t o f t h e g r o w t h o f A. s a l i n a ( d a y 7 t o 23) c o n s i d e r e d t o e x p r e s s e x p o n e n t i a l g r o w t h . B e y o n d d a y 23, RNA v a l u e s d i m i n i s h e d s l i g h t l y . T h e p r e d i c t e d i n c r e a s e i n w e i g h t ( F i g . 9) b a s e d o n RNA v a l u e s (670 m i n u s 615 mp) w e r e s i m i l a r t o t h e o b s e r v e d g r o w t h o f t h e a n i m a l o n l y i n t h e e x p o n e n t i a l p h a s e o f g r o w t h . P r i o r t o a n d s u b s e q u e n t t o t h i s p h a s e , p r e d i c t e d a n d o b s e r v e d v a l u e s o f t h e g r o w t h r a t e w e r e a n o r d e r o f m a g n i t u d e a p a r t ( T a b l e I V a ) . I n t e r f e r e n c e e x p r e s s e d i n t h e d i f f e r e n c e s b e t w e e n RNA v a l u e s c a l c u l a t e d f r o m a b s o r b a n c e s a t 670 mp a n d 670 m i n u s 615 mp, w a s a v a r i a b l e f a c t o r i n t h e d a t a o f e x p e r i m e n t I ( T a b l e I V a ) a n d w a s a b o u t o n e - h a l f o f t h e RNA v a l u e s m e a s u r e d a t 670 mp i n e x p e r i m e n t I I ( T a b l e I V b ) . C a l a n u s p l u m c h r u s s t a g e V T h e d a t a f r o m a n a l y s e s o f s t a g e V C a l a n u s p l u m c h r u s s u g g e s t t h a t RNA may v a r y i n d e p e n d e n t l y o f g r o w t h . RNA v a l u e s i n F i g . 11 s h o w a 3 5 - f o l d v a r i a t i o n i n RNA o f C. p l u m c h r u s s t a r v e d f o r 20 d a y s . I n c i d e n t a l o b s e r v a t i o n s w e r e made d u r i n g t h e e x p e r i m e n t o f o i l b o d i e s c o n t a i n e d i n s p e c i -m e ns a n d f r o m t h e s e o b s e r v a t i o n s i t w a s c o n c l u d e d t h a t t h e s e f o o d r e s e r v e s d e c r e a s e d i n s i z e . I n a n a t t e m p t t o d e t e r m i n e t h e d r y w e i g h t s o f i n d i v i d u a l c o p e p o d s , i t w a s n o t e d t h a t t h e v a r i a t i o n (2Q~) i n w e i g h t / i n d i v i d u a l i n c r e a s e d a s t h e e x p e r i m e n t p r o g r e s s e d . T h i s v a r i a t i o n may h a v e e x p r e s s e d d i f f e r e n c e s i n t h e a m o u n t o f f o o d m a t e r i a l s s t o r e d b y i n d i v i d u a l c o p e p o d s . A s t h e d e c r e a s e i n RNA a n d t h e a v e r a g e w e i g h t o f t h e c o p e p o d s w e r e b o t h s i g n i f i c a n t f o r d a y 1 t o 3, DAYS OF STARVATION F i g . 11:' E f f e c t s o f ' s t a r v a t i o n o n a ) t h e RNA c o n t e n t ; a n d b ) t h e d r y w e i g h t o f G a l a n u s  p l u m c h r u s s t a g e V. T 4 3 - . t h e y may b e i n t e r d e p e n d e n t . A f t e r t h e 6 t h d a y , t h e v a r i a t i o n o f RNA w a s n o t i n a c c o r d w i t h t h e a v e r a g e w e i g h t , a n d t h e i n c r e a s e i n RNA may h a v e i n d i c a t e d a s h i f t i n m e t a b o l i s m r e s u l t i n g f r o m a n i n c r e a s e d r e l i a n c e o n b o d y f o o d r e s e r v e s . I I I . 2 F I E L D S T U D I E S P o n o m a r e v a ( 1 9 6 & ) r e p o r t s a t w o - y e a r l i f e c y c l e f o r E. p a c i f i c a . S e x u a l m a t u r i t y i s r e a c h e d i n o n e y e a r a n d s p e c i m e n s o f t h i s a g e a n d t w o - y e a r o l d s b r e e d i n t h e s p r i n g . G r o w t h i s c h a r a c t e r i z e d b y a m o r e r a p i d i n c r e a s e i n w e i g h t d u r i n g t h e f i r s t y e a r t h a n t h e s e c o n d , a n d t h e r e i s a s u d d e n i n c r e a s e i n w e i g h t i n f e m a l e s a t s e x u a l m a t u -r i t y ( 1 y e a r ) w h e n e g g s a r e f o r m e d . T h e s y n t h e s i s o f c u t i c l e a l s o c o n s t i t u t e s g r o w t h , b u t t h e w e i g h t g a i n e d i n t h i s p r o c e s s i s l o s t a t e c d y s i s . I n c y r t o p i a ( j u v e n i l e s ) t h e s e s y n t h e s e s o f c u t i c l e i n v o l v e a n a d d i t i o n o f 0.5 -2% o f t h e b o d y w e i g h t / d a y ( L a s k e r , 1 9 6 6 ) . T h e i n c r e a s e i n w e i g h t o f c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s d u r i n g t h e m o n t h s o f J u n e a n d J u l y i s i n d i c a t e d i n F i g . 1 2 . T h e g r a p h w a s c o n s t r u c t e d a s f o l l o w s : A t h r e e - p o i n t r u n n i n g a v e r a g e ( F i g . 1 3 ) o f t h e n u m b e r o f e g g s a n d l a r v a l s t a g e s p e r m^ o f w a t e r f i l t e r e d w a s d e t e r m i n e d f r o m c o l l e c t i o n s made i n t h e u p p e r 30 m. ( A p p e n d i x I ; f o r t h e n a u p l i a r s t a g e s s e e S t e p h e n s e t a l , 1 9 6 7 ) . F i g . 1 2 : G r o w t h o f E u p h a u s i a p a c i f i c a e a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s i n t h e f i r s t m o n t h a f t e r s p a w n i n g . \ 0.10 < O > H 0.01 X o UJ 5 >-on a o> E 0.001 0 .0006 Furcilia Hit Furcilia 31 Furcilia I Calyptopis HI Calyptopis IE Calyptopis I V^-all Furcilia stages July 8 , 1966 all Calyptopis stages July 4, 1966 i i ' i i i i i J I L I I I I 3 4 5 6 7 8 10 20 DAYS A F T E R HATCHING 5 0 100 F i g . 1 3 : C h a n g e s i n t h e n u m b e r / m ^ o f w a t e r f i l t e r e d o f E u p h a u s i a p a c i f i c a d e v e l o p m e n t a l s t a g e s d u r i n g J u n e a n d J u l y 1 9 6 6 ( a 3 - p t r u n n i n g a v e o f d a t a c o r r e c t e d t o r e p r e s e n t a w a t e r c o l u m n 30m i n d e p t h ) -S/r-r 46 -Two average weights, one for a l l calyptopis stages and the other for the f u r c i l i a , were then computed using data on the composition of the collections near the peaks of abundance of each stage (Fig. 13), and from the dry weights of individuals of the stages marked by an asterisk i n Table V. The duration needed for individual calyptopis and f u r c i l i a to reach these average weights was estimated from the number of days to the peaks of abundance following spawning of the adults as indicated by the maximum abundance of eggs. Each of two points (•) on the graph A i s the intercept of the average weight and the time taken by the developing calyptopis and f u r c i l i a to reach this weight. The weights of individuals at the calyptopis and f u r c i l i a stages were then plotted ( o ) on the l i n e drawn through the two calculated weights ( • ) . The projection to the ordinate (showing time) from the intercepts of the weights of the individual stages and the calculated curve gives the day these stages may have appeared i n the plankton aft e r the spawning of the adults. Other weights for calyptopis and f u r c i l i a stages reported i n Table V probably are not accurate because they were obtained from the f i r s t specimens sorted and weighed. These data have been used only to indicate (951 confidence level) wherein a mean might l i e ( v e r t i c a l bars Fig. 13) i f a l l the values were included i n the computation T A B L E V RNA a n d t h e g r o w t h o f i n d i v i d u a l E u p h a u s i a p a c i f i c a d e v e l o p m e n t a l s t a g e s c o l l e c t e d i n o n e y e a r o f s a m p l i n g . D E V E L O P M E N T A L DAYS D E V E L O P - DRY WEIGHT RNA Ug/mg % GROWTH/DAY STAGE MENT TO STAGE mg/ I N D I V I D U A L 6 7 0 mu 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mu 670 P R E D I C T E D 670 m i n u s mu 6 1 5 mu Cm e g g 0 - - - - - -C a l y p t o p i s S t a g e I 6 - 7 0. , 0 0 5 8 * 29. ,6 2 1 , , 7 28. ,0 2 5 , , 2 42 . , 2 S t a g e I I 8 - 9 0. , 0 1 2 * 4 3 , .6 18. , 9 3 1 . , 6 23 . , 8 7 A 7 0. ,051 59. , 7 42 . , 3 34, , 7 3 1 . , 3 L 4 . , 0 S t a g e I I I 11 - 12 0. , 0 2 3 * 4 9 . ,6 38. , 6 33 . , 0 •30. ,4 7 4 ? 0, ,070 94. ,6 49 . , 2 39. , 0 32. , 8 Li * T i > L, F u r c i l i a S t a g e I 14 - 15 0. ,044* 2 6 8 . , 7 2 1 7 . , 0 ( 4 7 . ,3) ( 4 5 . ,5) 11 , 8 0. , 0 8 6 1 2 7 . , 6 84. ,8 40 . , 3 38. ,0 -i—*- • S t a g e I I 16 - 17 0. , 0 6 1 * 1 0 3 . , 8 8 7 . , 2 38. , 5 38. ,1 1 z 1 0. , 0 5 0 * 1 2 . , 0 9. , 8 19 . , 7 1 7 . , 0 i JL 0. ,087 1 1 3 . ,1 6 9 . , 2 34. , 7 34. ,0 S t a g e I I I 20 0. , 0 9 8 * 2 3 . ,4 22. , 5 25. ,9 2 5 . , 5 6. ,4 0. , 0 8 2 * 9. , 0 8. ,1 18. , 0 1 6 . , 0 C y r t o p i a 64 1. , 36 4. , 0 u 9. , 3 1. ,6 ( J u v e n i l e s ) 82 1. ,85 3. , 3 0. ,4 7. , 5 1. , 5 1 2 9 3. ,67 14. , 3 1 1 . , 2 20. , 7 1 9 . ,0 0. ,1 t o 215 4. , 00 26. ,9 0. ,2 •27. , 2 3. , 5 238 8. ,85 30. ,1 1 1 . , 7 26. ,9 1 8 . , 0 0. , 3 264 7. , 00 2. ,1 u 1. , 8 A d u l t s 3 65 9. ,60 28. ,8 2 1 , , 7 •27. , 9 2 5 . , 2 * w e i g h t s u s e d i n c a l c u l a t i n g f i g . 12 a n d C m () e x t r a p o l a t e d v a l u e s o f RNA f r o m S u t c l i f f e ' s ( 1 9 6 5 ) r e l a t i o n s h i p u RNA u n d e t e c t a b l e 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp - 48 -o f t h e a v e r a g e w e i g h t o f e a c h i n d i v i d u a l s t a g e . T h e p e r c e n t a g e i n c r e a s e i n w e i g h t / d a y ( C m ) o f H' p a c i f i c a c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s a s w e l l a s b e t w e e n c y r t o p i a a n d a d u l t s w e r e c a l c u l a t e d u s i n g W i n -b e r g ' s ( 1 9 5 6 ) e q u a t i o n ( s e e s e c t i o n I I I . l ) . T h e r e s u l t s o f t h e s e c a l c u l a t i o n s a r e r e p o r t e d i n T a b l e V. On t h e d a y s t h e i n d i v i d u a l c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a w e r e s a m p l e d , t h e RNA c o n t e n t ( F i g . 1 4 ) i n c r e a s e d f r o m c a l y p t o p i s I t o I I I , r e a c h e d a p e a k i n f u r c i l i a I , a n d d e c r e a s e d f r o m f u r c i l i a I t o 111 +. RNA f o r s t a g e s b e t w e e n c y r t o p i a a n d a d u l t w a s c o n s i d e r a b l y l e s s t h a n b e t w e e n c a l y p t o p i s I a n d f u r c i l i a 111+ . I n t e r f e r e n c e , s h o w n b y t h e d i f f e r e n c e b e t w e e n RNA v a l u e s d e t e r m i n e d f r o m t h e a b s o r b a n c e a t 6 7 0 mp a n d 6 70 m i n u s 6 1 5 mp ( F i g . 1 4 ) w a s o b s e r v e d b e t w e e n c a l y p t o p i s I I a n d f u r c i l i a I I , a n d i n m o s t o f t h e d a t a f o r t h e c y r t o p i a a n d a d u l t s t a g e s ( T a b l e V ) . C o m p a r i s o n ( T a b l e V) o f t h e o b s e r v e d c h a n g e s i n w e i g h t w i t h t h e p r e d i c t e d i n c r e a s e c a l c u l a t e d f r o m m i n i m u m RNA v a l u e s ( 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp) i n d i c a t e d t h e f o l l o w i n g : F o r c a l y p t o p i s I a n d I I , t h e c a l c u l a t e d i n c r e a s e i n w e i g h t a p p e a r e d t o b e g r e a t e r t h a n w a s p r e d i c t e d b y t h e i r RNA c o n t e n t . F o r c a l y p t o p i s I I I t o f u r c i l i a 1 1 1 + , t h e p r e d i c t e d i n c r e a s e w a s g r e a t e r t h a n c a l c u l a t e d f o r e a c h s t a g e . T h e d i s c r e p a n c y b e t w e e n c a l c u l a t e d a n d p r e d i c t e d v a l u e s ( T a b l e V ) w a s l a r g e s t i n f u r c i l i a I . F i g . 1 4 : RNA i n E u p h a u s i a p a c i f i c a c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s . . 01 i i i i i i ,C-I C-tt C-m, ,F-I F-3I F-fflt Calyptopis Furcilia E. DQcifica DEVELOPMENTAL S T A G E S - 50 -T h e r e w e r e some i n d i c a t i o n s t h a t t h e RNA c o n t e n t o f a l l d e v e l o p i n g E. p a c i f i c a s t a g e s r e f l e c t e d t h e a v a i l -a b i l i t y ( a s f o o d ) o f p l a n t m a t e r i a l e s t i m a t e d f r o m t h e a m o u n t o f c h l o r o p h y l l a ( S t e p h e n s et a l , 1 9 6 7 ) . F o r a l l c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s g a t h e r e d i n t h e u p p e r 30 m d u r i n g J u n e a n d J u l y , a t h r e e - p t r u n n i n g a v e r a g e o f t h e i r RNA c o n t e n t ( F i g . 1 5 b ) t e n d e d t o f o l l o w a s i m i l a r a v e r a g e o f t h e c h a n g e s i n t h e l e v e l o f c h l o r o p h y l l a ( F i g . 1 5 a ) . A f u r t h e r c o r r e l a t i o n may p o s s i b l y e x i s t b e t w e e n t h e p e a k o f c h l o r o p h y l l a i n J u n e a t 20 m d e p t h ( F i g . 1 6 a ) a n d t h e RNA p e a k o f a d u l t s , ( F i g . 1 6 b ) d u r i n g t h e same m o n t h . T h e c o i n c i d e n c e o f t h e s e t w o p e a k s i s s u g g e s t i v e o f a s e a s o n a l e f f e c t o f a v a i l a b l e f o o d o n t h e r e p r o d u c t i o n o f t h e a d u l t E. p a c i f i c a ( C h l o r o p h y l l a d a t a f r o m F u l t o n , K e n n e d y , S t e p h e n s a n d S k e l d i n g , 1 9 6 7 ) . D u r i n g t h e m o n t h s o f J u n e a n d J u l y , t h e RNA c o n t e n t ( T a b l e VII) o f a d u l t e u p h a u s i i d s i n c r e a s e d b y 3%/ d a y , w h i l e t h e a v e r a g e w e i g h t o f i n d i v i d u a l s d e c r e a s e d b y 1 . 2 % / d a y . T h i s i n f o r m a t i o n i s b a s e d u p o n a n a n a l y s i s o f t r e n d s i n t h e d a t a u s i n g t h e m e t h o d o f l e a s t s q u a r e s t o c o m p u t e a t r e n d l i n e ( S p i e g e l , 1 9 6 1 ) f o r b o t h RNA a n d d r y w e i g h t f l u c t u a t i o n s , a n d t e s t i n g t h e h y p o t h e s i s t h a t t h e s l o p e o f t h e s e l i n e s d o e s n o t s i g n i f i c a n t l y d i f f e r f r o m z e r o ( S n e d E c o r , 1 9 6 6 ) . T h e r e s u l t s o f t h e s e c o m p u t a t i o n s a n d t h e u s e o f c o n f i d e n c e l i m i t s ( S n e d i c o r , 1 9 6 6 ) p l a c e d u p o n t h e g r a n d m e a n o f a l l o b s e r v a t i o n s o f RNA a n d d r y w e i g h t f o r E. p a c i f i c a a n d a l s o o t h e r z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s i s s u m m a r i z e d i n T a b l e V I L F i g . 1 5 : C h a n g e s i n a ) C h l o r o p h y l l a , a n d b ) t h e a v e RNA c o n t e n t o f a l l c a l y p t o p i s a n d " f u r c i l i a s t a g e s J u n e - J u l y 1 9 6 6 . - 5 7 -E o ro i O 4 0 , 30 cr E o l 2 0 l (a) >-X Q. O tr o _i x o 10 ^ dashed line 3 pt. running ave -U J _ _L J 30 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 June/July i 60r \L\ 5 0 f Q £ ^ 3 0 < 2 0 l z tr DAYS OF THE MONTH . (b) .oL UJ  > ol < • • dashed line 3 pt. running ave 30 2 4 June / July 8 10 12 14 16 18 20 DAYS OF THE MONTH F i g . 16: Changes i n a) C h l o r o p h y l l a, and h) the RNA c o n t e n t o f Euphausia p a c i f i c a c y r t o p i a and a d u l t s t a g e s d u r i n g one y e a r . -sa.-E O " 701 i -< 60 40[ o i _ i 30[ £ 20\ 2 io o x 0 o (a) M J J MONTH j i I A S 0 N D MONTH A p o s s i b l e e x p l a n a t i o n f o r t h e i n c r e a s e o f RNA i n a d u l t E. p a c i f i c a may l i e i n t h e f a c t t h a t RNA i s r e q u i r e d f o r e g g p r o d u c t i o n . T h e d e c r e a s e i n t h e a v e r a g e w e i g h t p e r i n d i v i d u a l c o u l d b e a c c o u n t e d f o r b y e i t h e r o r b o t h t h e r e l e a s e o f e g g s i n t o t h e w a t e r a n d a r e d u c t i o n i n n u m b e r s o f t w o y e a r o l d E. p a c i f i c a a f t e r s p a w n i n g . C a l a n u s p l u m c h r u s C a m p b e l l ( 1 9 3 4 ) o r i g i n a l l y i d e n t i f i e d C a l a n u s  p l u m c h r u s a s C a l a n u s t o n s u s B r a d y . S h e i n d i c a t e s t h a t t h e l i f e c y c l e o f t h e a n i m a l e x t e n d s o v e r o n e y e a r w i t h b r e e d i n g o c c u r r i n g i n S p r i n g . I n t h e p r e s e n t s t u d y , s t a g e s V a n d V I a r e c o n s i d e r e d , b u t s t a g e V i s o f c h i e f c o n c e r n . T h e d u r a t i o n o f s t a g e V i s p r o l o n g e d (May t o D e c e m b e r ) ; i t f e e d s f r e e l y a n d p r o d u c e s r e s e r v e s i n t h e f o r m o f o i l . S t a g e V I i s p r e s e n t d u r i n g t h e m o n t h s o f J a n u a r y a n d F e b r u a r y a n d i s t h e r e p r o d u c t i v e s t a g e . I f g r o w t h o f C. p l u m c h r u s i s s i m i l a r t o t h a t o f C. f i n m a r c h i c u s , i n w h i c h s t a g e V i s a l s o p r o l o n g e d ( M a r s h a l l a n d O r r , 1 9 5 5 ) , t h e n t h e r e w i l l b e a r a p i d g a i n i n w e i g h t o f s t a g e V i n e a r l y s p r i n g a n d a m a x i m u m i n s u m m e r , f o l l o w e d b y a g r a d u a l d e c l i n e u n t i l t h e m o u l t t o t h e a d u l t i n l a t e w i n t e r . T h e d a t a o v e r 6 m o n t h s o f o n e y e a r ( T a b l e V I ) a r e l i m i t e d , b u t i n d i c a t e t h a t t h i s t y p e o f f l u c t u a t i o n t a k e s p l a c e . D a t a f o r RNA a n d d r y w e i g h t w e r e a n a l y z e d f o r t r e n d s a n d t h e r e s u l t s a r e r e p o r t e d i n T a b l e V I . D u r i n g J u n e a n d J u l y , t r e n d s o f c h a n g e s i n RNA a n d w e i g h t i n C. p l u m c h r u s ( T a b l e V I I ) a r e n e g l i g i b l e . T h e m e a n ( 6 . 0 ± 2.2 yag/mg d r y w t ) o f a l l RNA v a l u e s f o r t h e s e - .54 -T A B L E V I C a l a n u s p l u m c h r u s s t a g e V RNA, d r y w e i g h t s / i n d i v i d u a l o f C a l a n u s p l u m c h r u s s t a g e V c o l l e c t e d N o v . 1 9 6 5 t o J u l y 1 9 6 6 MONTH RNA ug/mg DRY WT ' 6 7 0 mu 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mu mg DRY W T / I N D I V I D U A L N o v e m b e r 1 9 6 5 2 1 . 2 8.7 0.68 J a n u a r y 1 9 6 6 3 6 . 4 u 0.68 M a r c h ( s t a g e V I ) 8.3 5.8 1.0 3 M a y 1 3 . 1 6.3 0.57 J u n e J 1 0 . 7 6.8 0.82 J u l y 9.0 6.9 0.83 u = n o RNA d e t e c t a b l e f o r 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mjx T A B L E V I I A n a l y s i s f o r t r e n d s i n m e a n w t / i n d i v i d u a l a n d RNA ( 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mu) d a t a J u n e - J u l y 1 9 6 6 P L A N K T O N M A T E R I A L TREND V A L U E S (%• CHANGE/DAY) DRY WT RNA ^ g / ™ Ug/mg C O N F I D E N C E L I M I T S ON GRAND MEAN F Ho RNA P g / m g DRY WT mg/IND RNA T E S T fi = 0 DRY WT TOTAL F R A C T I O N " 0"- 30 m " - 1 . 5 0 - 160m +0.2 S I Z E F R A C T I O N r 1 P P GROUPS 1 5 0 0 1 0 0 0 600 300 SORTED E. p a c i f i c a ( a d u l t s ) C. p l u m c h r u s C h a e t o g n a t h s O t h e r A m p h i p o d s O r c h o m o n e l l a s p + 0, + 3, + 1. + 3, V -0 . 5 + 0.6 + 1.0 + 2.0 + 4.6 + 2.4 2 5 . 7 + 5 . 7 1 4 . 2 * 1 6 . 1 8.7±12.0 1 8 . 5 + 1 1 . 2 2 2 . 5 + 1 2 . 2 1 9 . 5 + 1 3 . 6 0 . 0 3 + 0 . 0 1 0 . 1 4 + 0 . 1 7 0 . 1 6 + 0 . 3 3 0.24±0.13 0 . 0 7 + 0 . 0 6 0 . 0 1 + 0 . 0 1 1. 44 0. 00 0.04 2.42 0. 02 1. 57 0.04 0.04 5 . 0 7 * 1.11 4. 6 0 * 1.18 - 1 . 2 + 3. 0 2 1 . 7 + l l . 2 9 . 6 0 + 3 . 0 9 9 . 0 0 * * 2. 81 - 0 . 02 - 0 . 2 6. 0 + 2 . 2 0 . 8 2 + 0 . 0 8 0. 01 0. 07 +1. 4 + 2. 0 1 1 . 9±6. 0 0 . 4 3 + 0 . 2 2 0.93 1. 78 - 0 . 01 - 0 . 4 1 2 . 0-9.0 0 . 6 4 - 0 . 2 2 0. 00 0. 05 + 0. 9 - 1 . 0 7. 2 + 6. 3 3.09+0.64 2. 78 0. 18 * o r ** i n d i c a t e w h e t h e r s i g n i f i c a n t a t 0.05 o r 0.01 l e v e l - 56 -m o n t h s s u g g e s t s t h a t t h e c o p e p o d s w e r e g r o w i n g b e t w e e n 7.2 t o 1 4 % o f t h e i r d r y w t / d a y . T h i s p r e d i c t e d r a t e o f i n c r e a s e i s g r e a t e r t h a n a c c o u n t e d f o r b y t h e o b s e r v e d t r e n d i n w e i g h t (-0.02%/day) s h o w n i n T a b l e V I . F o r d a t a c o l l e c t e d i n t h e i n t e r v a l N o v e m b e r 1 9 6 5 a n d J u l y 1 9 6 6 ( T a b l e V I ) RNA v a l u e s w e r e v a r i a b l e b u t i n g e n e r a l a c c o r d w i t h t h e i n c r e a s e i n w e i g h t o f s t a g e V b e t w e e n M a y a n d J u n e . H o w e v e r , t h e y do n o t a c c o r d w i t h t h e d e c r e a s e s i n w e i g h t w h i c h a r e e v i d e n t f o r N o v e m b e r 1 9 6 5 a n d J a n u a r y 1 9 6 6 . G r e a t e s t i n t e r f e r e n c e i s e v i d e n t i n t h e d i f f e r e n c e s b e t w e e n t h e RNA v a l u e s ( c o m p u t e d f r o m a b s o r b a n c e s a t 6 7 0 mji a n d 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp) f o r N o v e m b e r a n d J a n u a r y . T h e e x c e s s o f RNA o v e r t h a t w h i c h i s r e q u i r e d f o r t h e o b s e r v e d c h a n g e s i n w e i g h t c a n n o t b e a c c o u n t e d f o r b y t h e p r o d u c t i o n o f m o u l t s , a s t h e r e a r e n o n e i n C. p l u m c h r u s s t a g e V ( e x c e p t t o s t a g e V I ) . T h e r e i s n o i n f o r m a t i o n t o r e l a t e c h a n g e s i n t h e RNA c o n c e n t r a t i o n o f C_. p l u m c h r u s t o c h a n g e s i n f o o d s u p p l y ( c h l o r o p h y l l a ) i n t h e e u p h o t i c z o n e o f S a a n i c h I n l e t d u r i n g J u n e a n d J u l y . M o r e o v e r , t h e d i s t r i b u t i o n ( S t e p h e n s e t . a l , 1 9 6 7 ) r e c o r d e d i n d i c a t e s o n l y o n e i n c u r s i o n i n t o t h i s z o n e . I f t h e a n i m a l i s f e e d i n g , t h e n t h e f o o d s o u r c e m u s t b e a t g r e a t e r d e p t h s . N o t e n o u g h d a t a ( T a b l e V I ) a r e a v a i l a b l e t o s u g g e s t w h e t h e r y e a r l y t r e n d s a r e p r e s e n t i n r e l a t i o n s h i p s w h i c h m i g h t b e p r e s e n t b e t w e e n RNA a n d p h y t o -p l a n k t o n i c f o o d ( r e p r e s e n t e d b y c h l o r o p h y l l a ) . • .- 57 -O t h e r m a t e r i a l C a l c u l a t e d t r e n d s i n b o t h RNA a n d d r y w e i g h t s f o r c h a e t o g n a t h s d u r i n g J u n e a n d J u l y ( T a b l e V I I ) , s h o w e d i n c r e a s e s o f t h e same o r d e r . T h e p e r c e n t c h a n g e o f d r y w e i g h t p e r d a y a n d t h e g r o w t h p r e d i c t e d f r o m t h e g r a n d m e a n o f a l l RNA v a l u e s (6 70 m i n u s 6 1 5 mu) w e r e d e t e r m i n e d o n e a c h o f t h e s a m p l e s o f c h a e t o g n a t h s c o l l e c t e d ; c o n f i d e n c e l i m i t s ( T a b l e V I ) o n t h e m e a n i n d i c a t e d a c o n s i d e r a b l e v a r i a t i o n i n t h e s e RNA v a l u e s . T h e p e r c e n t e x p e c t e d g r o w t h p e r d a y , d e t e r m i n e d f r o m t h e t w o l i m i t s o f c o n f i -d e n c e , i n d i c a t e s t h e r a n g e o f p r e d i c t e d g r o w t h r a t e s f r o m t h e s e l i m i t s . T h e l e a s t w a s 7 . 2 1 / d a y , a n d w a s h i g h e r t h a n s u g g e s t e d b y t h e t r e n d o f 2 % / d a y i n w e i g h t . A l t h o u g h t h e m i n i m u m r a t e o f 7 . 2 % / d a y i s o f t h e s a m e o r d e r a s t h e o b s e r v e d i n c r e a s e i n w e i g h t 2 % / d a y , t h e h i g h RNA v a l u e s m i g h t b e a c c o u n t e d f o r b y t h e f o l l o w i n g : t h e c o l l e c t i o n s w e r e c h i e f l y o f S a g g i t a e l e g a n s a n d i n c l u d e d a l l d e v e l o p m e n t a l s t a g e s ; t h e r e f o r e , c h a n g e s i n RNA v a l u e s * ( F i g . 1 6 a ) a n d a l s o i n d r y w e i g h t ( F i g . 1 6 b ) c o u l d h a v e r e s u l t e d f r o m a s h i f t i n t h e s i z e , a g e o r r e p r o d u c t i v e s t r u c t u r e o f t h e p o p u l a t i o n . D u r i n g t h e m a j o r p a r t o f J u n e a n d J u l y t h e i n c r e a s e i n t h e RNA o f t h e c h a e t o g n a t h s r a n p a r a l l e l t o a n i n c r e a s e i n t h e n u m b e r o f s m a l l c o p e p o d s ( F i g . 1 6 c ) . I t i s p o s s i b l e t h a t RNA i n t h e c a r n i v o r o u s c h a e t o g n a t h s r e f l e c t e d t h e a b u n d a n c e o f t h e c o p e p o d s . T h o s e f r a c t i o n s o f c o l l e c t i o n s c o n t a i n i n g m i x -t u r e s o f s p e c i e s , w h e t h e r o f t h e t o t a l r a n g e p r e s e n t ( T o t a l F r a c t i o n ) o r s o r t e d b y s i z e g r o u p s ( S i z e F r a c t i o n ) , h a v e F i g . 1 7 : C h a n g e s i n a) RNA a n d , b ) mg d r y w t p e r i n d i v i d u a l i n c h a e t o g n a t h s ; a n d c ) t h e n u m b e r o f : s m a l l c o p e p o d s i n t h e e u p h o t i c z o n e d u r i n g J u n e a n d J u l y 1 9 6 6 ( d a s h e d l i n e - 3 - p t r u n n i n g a v e ) . b e e n a n a l y z e d f o r RNA a n d t h e a v e r a g e d r y w e i g h t o f a l l i n d i v i d u a l s d e t e r m i n e d . T r e n d s i n RNA a n d d r y w e i g h t f o r t h e m o n t h s o f J u n e a n d J u l y w e r e d e t e r m i n e d ( T a b l e V I I ) . B o t h t r e n d s w e r e s i m i l a r , b u t w i t h f e w e x c e p t i o n s w e r e n o t s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t . P r e d i c t i o n s o f g r o w t h b a s e d u p o n t h e r a n g e e x p r e s s e d b y c o n f i d e n c e l i m i t s p l a c e d o n t h e m e a n s o f a l l t h e RNA v a l u e s w e r e g e n e r a l l y g r e a t e r t h a n s u g g e s t e d b y t h e t r e n d s i n d r y w e i g h t . T h e s e c o n f i d e n c e l i m i t s w e r e w i d e a n d i n d i c a t e a s o u r c e o f v a r i a t i o n w h i c h may b e a t t r i b u t a b l e t o c h a n g e s ( s e e A p p e n d i x ) i n t h e a g e a n d s i z e s t r u c t u r e o r r e p r o d u c t i v e a c t i v i t y f r o m s a m p l e t o s a m p l e . I n a d d i t i o n , m o r e t h a n o n e t y p e o f f e e d i n g b e h a v i o u r w o u l d b e r e p r e s e n t e d among t h e s p e c i e s c o m p o s i n g t h e c o l l e c t i o n s , t h u s p r e v e n t i n g a n y w o r t h w h i l e a s s e s s m e n t b e i n g made o f c h a n g e s i n RNA r e l a t i v e t o t h e a v a i l a b l e f o o d . - 59 -C H A P T E R I V D I S C U S S I O N Y o u n g ' s ( 1 9 5 0 ) d e f i n i t i o n o f g r o w t h e m b o d i e s m o s t o f w h a t i s u s u a l l y i m p l i e d i n t h e t e r m : " G r o w t h i s t h e a d d i t i o n o f m a t e r i a l t o t h a t w h i c h i s a l r e a d y o r g a n i z e d i n t o a l i v i n g p a t t e r n " . No d i s t i n c t i o n i s made b e t w e e n t h e a d d i t i o n o f o r g a n i c m a t e r i a l , ( e . g . , c a r b o h y d r a t e s , p r o t e i n s , a n d l i p i d s ) a n d i n o r g a n i c m a t e r i a l , ( e . g . , s a l t s a n d w a t e r ) . S u t c l i f f e ' s ( 1 9 6 5 ) u s e o f t h e t e r m t o i m p l y a n i n c r e a s e i n t h e d r y w e i g h t o f z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s i s c o n s i s t e n t w i t h Y o u n g ' s ( 1 9 5 0 ) , b u t e x c l u d e s g r o w t h w h i c h i s a r e s u l t o f a n i n c r e a s e i n w a t e r c o n t e n t o f t h e s e o r g a n i s m s . I n t h e p r e s e n t s t u d y g r o w t h i n c l u d e s a l l p r o c e s s e s w h i c h l e a d t o a n i n c r e a s e i n t h e d r y w e i g h t o f a n o r g a n i s m , w h e t h e r i t r e s u l t s f r o m c o n t i n u o u s p r o c e s s e s ( e . g . , a s i n c h a e t o g n a t h s ) o r f r o m s t e p w i s e i n c r e a s e s ( e . g . , a s i n c r u s t a c e a n s ) ; t h e g r o w t h m e a s u r e d i s t h e t o t a l o c c u r r i n g b e t w e e n o n e s t a g e o f d e v e l o p m e n t a n d a l a t e r s t a g e , b u t i s n o t n e c e s s a r i l y t h o s e p e r i o d i c c h a n g e s a s s o c i a t e d w i t h e c d y s i s a s o c c u r 1 ; i n c r u s t a c e a n s . A r e l a t i o n s h i p b e t w e e n RNA a n d g r o w t h w h i c h may b e u s e d t o p r e d i c t t h e i n c r e a s e i n t h e d r i e d w e i g h t o f a z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m m u s t s a t i s f y t h e f o l l o w i n g c o n d i t i o n s : t h e b u l k o f m a t e r i a l p r o d u c e d i n a n i n c r e a s e o f t h e d r i e d w e i g h t m u s t r e f l e c t t h e RNA c o n t e n t a t a l l t h e s t a g e s o f d e v e l o p m e n t o f a s p e c i e s ; a n d i f t h e r e l a t i o n s h i p i s n o t s p e c i e s s p e c i f i c , t h e n t h e a m o u n t o f d r y w e i g h t p r o d u c e d - 60 -p e r p g RNA m u s t b e t h e same i n a l l s p e c i e s . T h e c o n c e p t t h a t t h e g r o w t h r a t e o f a n o r g a n i s m i s some f u n c t i o n o f i t s RNA c o n c e n t r a t i o n h a s b e e n l o n g e s t a b l i s h e d i n t h e l i t e r a t u r e ( B r a c h e t , 1 9 4 2 ) . I n t h e m e t a b o l i c s e n s e g r o w t h r a t e h a s b e e n d e f i n e d a s t h e r a t e o f p r o t e i n s y n t h e s i s ( B r a c h e t , 1 9 6 0 ) . P r o t e i n s w h i c h a r e t h e p r o d u c t o f R N A - d e p e n d e n t s y n t h e s e s a r e s t r u c t u r a l o r f u n c t i o n a l i n n a t u r e . T h r o u g h t h e f u n c t i o n a l p r o t e i n s ( e n z y m e s ) f o r m e d i n t h e s e s y n t h e s e s , t h e n u c l e i c a c i d s c o n t r o l t h e w h o l e q u a n t i t a t i v e a n d q u a l i t a t i v e p a t t e r n o f b i o s y n t h e s i s i n t h e c e l l ( N e e d h a m , 1 9 6 4 ) . P r o t e i n s y n t h e s i s h a s b e e n q u a n t i t a t i v e l y r e l a t e d t o RNA i n b a c t e r i a l c u l t u r e s g r o w i n g a t r a t e s d e t e r m i n e d b y t h e c u l t u r e m e d i a ( K j e l d g a a r d , 1 9 6 1 ) . I t i s a l s o a p p a r e n t i n K j e l d g a a r d ' s ( 1 9 6 1 ) e x p e r i m e n t s t h a t t h e r a t e o f i n c r e a s e i n m a s s / c e l l w a s p o s i t i v e l y c o r r e l a t e d w i t h RNA c o n t e n t . S i n c e t h e b u l k o f t h e m a t e r i a l a d d e d t o t h e m a s s o f e a c h b a c t e r i u m w a s p r o t e i n ( p r o t e i n + r i b o n u c l e o -p r o t e i n ) , t h i s c o r r e l a t i o n i s u n d e r s t a n d a b l e . N o t a l l o f t h e p r e s e n t l i t e r a t u r e i n d i c a t e s t h a t a c o n s t a n t r e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e r a t e o f p r o t e i n s y n t h e s i s a n d RNA e x i s t s u n d e r a l l c o n d i t i o n s o f g r o w t h . B r o w n a n d L i t t n a ( 1 9 6 4 a , b ) f o u n d t h a t RNA may b e s t o r e d i n o n e s t a g e o f g r o w t h o f t h e o o c y t e s o f t h e a m p h i b i a n X e n o p u s l a e v i s f o r u s e i n s u b s e q u e n t s t a g e s o f d e v e l o p m e n t . R o s s e t , J u l i e n , a n d M o n i e r ( 1 9 6 6 ) a n d S o x a n d H o a g l a n d ( 1 9 6 6 ) f o u n d f o r b a c t e r i a a n d l i v e r t i s s u e r e s p e c t i v e l y , t h e e f f i c i e n c y o f r i b o s o m e s i n p r o t e i n s y n t h e s i s w a s n o t t h e s ame a t d i f f e r e n t r a t e s o f g r o w t h . S p e i g e l m a n ( 1 9 6 5 ) s u m m a r i z e s ; - 6 1 -e x p e r i m e n t s i n w h i c h i t was f o u n d t h a t w h e r e g r o w t h w a s i n t e r r u p t e d b y r e m o v a l o f t h e f o o d s u p p l y , t h e a m o u n t o f p r o t e i n s y n t h e s i s w a s r e d u c e d a n d t h e r e d u c t i o n p r e c e d e d a d e c r e a s e i n RNA. G r e a t e r d i f f i c u l t y m i g h t b e e x p e c t e d w h e r e i t i s d e s i r e d t o ' r e l a t e t h e r a t e o f i n c r e a s e i n d r i e d w e i g h t o f z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s t o t h e i r RNA c o n t e n t . A l t h o u g h R a y m o n t e_t a l _ ( 1 9 6 4 , 1 9 6 6 ) , q u o t e ^ i v a l u e s f o r p r o t e i n up t o 8 0 % o f t h e d r y w e i g h t o f z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s , l i p i d s ( u p t o 7 0 % ) a n d c a r b o h y d r a t e ( u p t o 1 3 % ) a l s o may a c c o u n t f o r a s u b s t a n t i a l p o r t i o n o f t h e t o t a l d r y w e i g h t . M u c h o f t h e l i p i d a n d p o l y s a c c h a r i d e i n o r g a n i s m s f u n c t i o n s a s f o o d r e s e r v e s , a n d i s n o t p a r t o f t h e l i v i n g f a b r i c . E v e n i n a n i m a l s n o t i n c r e a s i n g i n w e i g h t , b i o s y n t h e s i s o f p r o t e i n s i s r e q u i r e d t o r e p l a c e l o s s o f m a t e r i a l d u e t o w e a r o r a c c i d e n t , a n d f o r a c t i v i t i e s r e q u i r i n g e n e r g y p r o d u c t i o n ( N e e d h a m , 1 9 6 4 ) . S u t c l i f f e ( 1 9 6 5 ) w a s a b l e t o d e r i v e a r e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e RNA c o n t e n t a n d i n c r e a s e i n d r i e d w e i g h t o f t h e a m p h i p o d O r c h e s t i a p l a t e n s i s a n d t o a p p l y t h i s r e l a t i o n s h i p t o p r e d i c t g r o w t h i n t h e y o u n g d e v e l o p m e n t a l s t a g e s o f t h e b r i n e s h r i m p A r t e m i a s a l i n a a n d i n t h e e g g s o f t h e mud s n a i l N a s s a r i u s o b s o l e t u s . To e x p l a i n t h e p r o p e r t i e s o f S u t c l i f f e ' s R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p a n d h i s s u c c e s s i n p r e d i c t i n g t h e g r o w t h o f A r t e m i a a n d N a s s a r i u s , t h i s r e l a t i o n s h i p i s r e p r o d u c e d a g a i n i n F i g . 1 7 , b u t i n c a r -t e s i a n i n s t e a d o f l o g a r i t h m i c c o o r d i n a t e s . T h e c u r v e s h o w n F i g . 1 8 : S u t c l i f f e 1 s ( 1 9 6 5 ) R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p a s e x p r e s s e d i n c a r t e s i a n c o o r d i n a t e s . - 6 3 -i s s i m i l a r t o t h e r e l a t i o n s h i p ( W h i t e e t a l , 1 9 5 9 ) w h i c h h a s b e e n d e t e r m i n e d b e t w e e n t h e v e l o c i t y o f a n e n z y m e c a t a l y z e d r e a c t i o n ( a n a l a g o u s t o S u t c l i f f e ' s E x p e c t e d G r o w t h % D r y W t / d a y ) a n d t h e c o n c e n t r a t i o n o f s u b s t r a t e ( a n a l a g o u s t o S u t c l i f f e ' s R N A ) . A s o c c u r s w i t h r e a c t i o n s c a t a l y z e d b y e n z y m e s t h e e f f e c t o f a g i v e n c h a n g e i n c o n c e n t r a t i o n , a t t h e h i g h e r c o n c e n t r a t i o n s o f RNA, p r o d u c e s l e s s o f a c h a n g e i n t h e g r o w t h r a t e t h a n a n e q u a l c h a n g e o f RNA a t t h e l o w e r c o n c e n t r a t i o n ( F i g . 1 7 ) . A l t h o u g h S u t c l i f f e ' s ( 1 9 6 5 ) R N A / G r o w t h r e l a t i o n -s h i p w a s a b l e t o p r e d i c t t h e g r o w t h o f A r t e m i a a n d N a s s a r i u s r e a s o n a b l y w e l l , t h e s e e x p e r i m e n t s c o v e r e d o n l y r a p i d l y g r o w i n g s t a g e s i n w h i c h RNA v a l u e s w e r e h i g h . B e c a u s e c o n c e n t r a t i o n s o f RNA w e r e h i g h , t h e e f f e c t s o n g r o w t h o f a n y v a r i a t i o n s i n RNA t h a t may h a v e b e e n p r e s e n t s h o u l d b e s m a l l . I n t h e p r e s e n t s t u d y , p r e d i c t i o n s o f g r o w t h w e r e r e a s o n a b l e f o r r a p i d l y g r o w i n g A r t e m i a ( F i g . 9) i n l a b o r a t o r y e x p e r i m e n t s a n d o f t h e same o r d e r a s t h e o b s e r v e d g r o w t h r a t e s f o r c a l y p t o p i s a n d f u r c i l i a s t a g e s i n E. p a c i f i c a ( T a b l e V ) . H o w e v e r , f o r t h e p e r i o d o f s l o w e r g r o w t h p r i o r a n d s u b s e q u e n t t o t h e e x p o n e n t i a l p h a s e o f g r o w t h o f A. s a l i n a , a n d i n some o f t h e c y r t o p i a a n d a d u l t s t a g e s o f E. p a c i f i c a , RNA v a l u e s w e r e h i g h e r t h a n i n d i c a t e d b y t h e o b s e r v e d r a t e o f i n c r e a s e i n w e i g h t . I n t h e y o u n g s t a g e s o f A. s a l i n a a n d E. p a c i f i c a , • t h e c o r r e l a t i o n f o u n d b e t w e e n p r e d i c t e d a n d o b s e r v e d i n c r e a s e s i n w e i g h t w a s r e a s o n a b l y c l o s e . T h i s w o u l d e n s u e i f t h e s y n t h e s i z e d p r o t e i n w e r e p r i m a r i l y p a r t o f t h e l i v i n g f a b r i c o r s e c o n d a r i l y i n v o l v e d a s e n z y m e s i n s y n t h e s i z i n g o t h e r m a c r o m o l e c u l e s . F u r t h e r m o r e , i n y o u n g s t a g e s RNA i s h i g h a n d g r o w t h i s r a p i d s o t h e e f f e c t s o f d i f f e r e n c e s i n t h e R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p s f o r c o r r e s p o n d i n g s t a g e s i n d i f f e r e n t s p e c i e s s h o u l d b e s m a l l . T h e e f f e c t o f t h a t p a r t o f t h e t o t a l RNA w h i c h i s r e l a t e d t o o t h e r p r o c e s s e s n o t d i r e c t l y c o n c e r n e d w i t h t h e i n c r e a s e i n d r i e d w e i g h t ( e . g . , e c d y s i s ) s h o u l d a l s o b e r e l a t i v e l y s m a l l c o m p a r e d w i t h t h o s e e f f e c t s o f t h e r e l a t i v e l y l a r g e a m o u n t s o f RNA c o n c e r n e d w i t h g r o w t h . C o n s e q u e n t l y p r e d i c t i o n s o f r a t e o f i n c r e a s e b a s e d o n S u t c l i f f e ' s R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p w o u l d a p p r o x i m a t e t h e o b s e r v e d r a t e i n t h e s e y o u n g s t a g e s . I n t h e p r e s e n t s t u d y RNA v a l u e s may b e g r e a t e r t h a n i s s u g g e s t e d b y t h e g r o w t h w h i c h h a s b e e n o b s e r v e d i n A. s a l i n a a n d E. p a c i f i c a , a n d e f f e c t s o f t h e e x c e s s e s a r e r e l a t i v e l y g r e a t e r a t t h e s l o w e r g r o w t h r a t e s . A t a n y s t a g e o f d e v e l o p m e n t , h o w e v e r , e x c e s s RNA may a r i s e a n d b e a t t r i b u t e d t o e i t h e r o r b o t h u n r e s o l v e d d i f f i c u l t i e s i n t h e a n a l y s i s o f RNA a n d t h e d e t e r m i n a t i o n o f i n d i v i d u a l w e i g h t s , o r t o some m e t a b o l i c p r o c e s s e s n o t a c c o u n t e d f o r b y m e a s u r e m e n t o f t h e i n c r e a s e i n w e i g h t . I n t h e a n a l y s i s f o r RNA i n A. s a l i n a , e r r o r s a r o s e b e c a u s e o f i n t e r f e r e n c e f r o m c h r o m o g e n i c s u b s t a n c e s o t h e r t h a n DNA; a n d p o s s i b l y a d d i t i o n a l RNA p r e s e n t i n t h e f o o d o r g a n i s m P h a e o d a c t y l u m i n t h e g u t s o f t h e a n i m a l s w a s a l s o i n c l u d e d . T h e v a l u e s o RNA c a l c u l a t e d f r o m t h e d i f f e r e n c e i n a b s o r b a n c e s r e c o r d e d -. 65 -a t 6 7 0 a n d 6 1 5 mp w o u l d c o r r e c t f o r t h e e f f e c t o f m o s t o f t h e i n t e r f e r i n g s u b s t a n c e s , b u t n o t f o r t h e a d d i t i o n a l RNA f o r w h i c h n o a s s e s s m e n t w a s made. When t h e w e i g h t w a s d e t e r m i n e d f r o m a v e r a g e l e n g t h o f A. s a l i n a , t h e d i s p e r s i o n o f t h e w e i g h t i n d i c a t i n g t h e o b s e r v e d g r o w t h ( F i g . 9) w a s s m a l l a n d i s c o n s i d e r e d n o t t o p r e s e n t a p r o b l e m i n t h e i n t e r p r e t a t i o n o f t h e d a t a . D i f f i c u l t i e s w h i c h a r i s e i n a s s e s s i n g c h a n g e s i n w e i g h t s o f t h e d e v e l o p i n g s t a g e s o f E. p a c i f i c a c o l l e c t e d i n t h e f i e l d a r e g r e a t e r t h a n f o r l a b o r a t o r y g r o w n A. s a l i n a . I t i s p r o b l e m a t i c w h e t h e r a n y o n e s a m p l e o f E. p a c i f i c a , f o r w h i c h a n a v e r a g e w e i g h t o f a s t a g e h a s b e e n d e t e r m i n e d , e i t h e r i s r e p r e s e n t a t i v e o f t h e p o p u l a t i o n o f t h a t s t a g e a t t h a t t i m e , o r p r o v i d e s r e a l c o n t i n u i t y w i t h t h a t s t a g e a s c o l l e c t e d p r e v i o u s l y . N o t e n o u g h d a t a w e r e o b t a i n e d i n t h e s a m p l i n g p r o g r a m t o a s s e s s t h e s e d i f f i c u l t i e s i n r e l a t i o n t o d e t e r m i n a t i o n s o f t h e w e i g h t s o f t h e i n d i v i d u a l s t a g e s u s e d i n t h e c o n s t r u c t i o n o f t h e g r o w t h c u r v e s h o w n i n F i g . 1 2 . T h e t e n d e n c y t o u n d e r - p r e d i c t i n c r e a s e s o f d r i e d w e i g h t i n t h e f u r c i l i a p o s s i b l y r e s u l t s f r o m c h a n g e s , s u c h a s m e n t i o n e d a b o v e , n o t b e i n g d e t e c t e d i n t h e p o p u l a t i o n . I n c a l y p t o p i s , f u r c i l i a , a n d c y r t o p i s s t a g e s , t h e m o u l t i n g p r o c e s s a n d t h e s y n t h e s i s o f e n z y m e s a s s o c i a t e d w i t h e c d y s i s c o u l d c o n t r i b u t e t o w a r d s r e l a t i v e l y h i g h v a l u e s o f RNA. D u r i n g e c d y s i s , g l y c o g e n a n d g l u c o s e ( P a s s a i n o , 1 9 6 0 ) may b e p r o d u c e d , b u t e r r o r s i n t h e e s t i m a t i o n o f RNA w h i c h may r e s u l t f r o m t h e i r p r e s e n c e a r e b e l i e v e d t o b e T , 66 -e l i m i n a t e d u s i n g t h e RNA v a l u e o b t a i n e d f r o m t h e a b s e r b a n c e a t 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp. I n a d u l t E. p a c i f i c a e g g p r o d u c t i o n a l s o may a c c o u n t f o r h i g h RNA c o n c e n t r a t i o n s i n a n i m a l s w h i c h h a v e , o r a l m o s t h a v e , a t t a i n e d t h e i r f i n a l s i z e : t h e d e c r e a s e s i n w e i g h t ( T a b l e VII) p o s s i b l y r e s u l t f r o m s h e d d i n g o f t h e s e e g g s i n t o t h e w a t e r o r t o t h e d i s a p p e a r a n c e f r o m t h e p o p u l a t i o n o f t h e l a r g e r a d u l t s ( t h e 2 - y r o l d s ) . N e i t h e r c o n t a m i n a t i o n o f t h e g u t w i t h p h y t o p l a n k -t o n n o r c h a n g e s i n t h e a v e r a g e w e i g h t e x p l a i n s t h e 3 5 - f o l d i n c r e a s e i n RNA c o n t e n t o f C a l a n u s p l u m c h r u s , w h e n s p e c i m e n s w e r e s t a r v e d ( F i g . 1 1 ) . T h e a v e r a g e w e i g h t r e m a i n e d f a i r l y c o n s t a n t o v e r 15 d a y s a l t h o u g h d i v e r g e n c e s i n t h e w e i g h t s o f i n d i v i d u a l s i n c r e a s e d . P r o b a b l y t h e a b s e n c e o f e x t e r n a l f o o d r e s u l t e d i n a s h i f t i n t h e m e t a b o l i s m t o i n t e r n a l f o o d r e s e r v e s ; o i l g l o b u l e s c o n s i d e r e d t o b e p a r t o f t h e s e w e r e o b s e r v e d t o d e c r e a s e i n s i z e d u r i n g t h i s p e r i o d . S h o u l d RNA i n C. p l u m c h r u s o r o t h e r o r g a n i s m s c o l l e c t e d i n t h e f i e l d b e r e l a t e d t o t h e u s e o f i n t e r n a l f o o d r e s e r v e s , i t w o u l d b e c o n c l u d e d t h a t t h e a n i m a l w a s a c t i v e l y g r o w i n g w h e n i n f a c t , p a r t o f t h e s u b s t a n c e c o n t r i b u t i n g t o i t s w e i g h t w a s b e i n g u t i l i z e d a s a n e n e r g y s o u r c e . T h e i n c r e a s e d v a r i a t i o n i n w e i g h t s o f s t a r v e d C_. p l u m c h r u s may i n d i c a t e t h a t some s p e c i m e n s i n e a c h s a m p l e h a d s t o r e d m o r e o f t h e s e f o o d r e s e r v e s t h a n o t h e r s . Some c o p e p o d s , t h e r e f o r e , w o u l d l o s e m o r e w e i g h t t h a n o t h e r s , e v e n t h o u g h t h e a v e r a g e w e i g h t f o r a l l s p e c i m e n s d i d n o t r e f l e c t t h i s l o s s . E v i d e n c e ( F i g . 1 1 ) t h a t t h e f o o d r e s e r v e s w e r e c o n v e r t e d i n t o o t h e r s u b s t a n c e s i s s u g g e s t e d b y t h e - 67 -i n c r e a s e d i n t e r f e r e n c e a s s o c i a t e d w i t h 3 5 - f o l d i n c r e a s e i n RNA. S u c h i n t e r f e r e n c e w o u l d r e s u l t i f t h e f o o d r e s e r v e s w e r e l i p o i d a l a n d t h e i r c o n v e r s i o n r e s u l t e d i n t h e f o r m a t i o n o f c o m p o u n d s s u c h a s g l y c o g e n ( P a s s a i n o , 1 9 6 0 ) . I n t h e p r e s e n t s t u d y a n o v e r a l l d e c r e a s e i n RNA c o n t e n t o f t h e s p e c i e s r e f l e c t e d a n i n c r e a s e i n a g e o f b o t h A. s a l i n a a n d E. p a c i f i c a . T h i s i s c o n s i s t e n t w i t h r e l a t i o n s h i p s p r e v i o u s l y o b s e r v e d b e t w e e n t h e a g e o f c e l l s o r o r g a n i s m s a n d t h e i r c o n t e n t o f RNA ( C a l d w e l l , M a c k o r , a n d H i n s h e l w o o d , 1 9 5 0 ; J e e n e r , 1 9 5 3 ; D i s c h e , D e v i , a n d Z e l -m e n i s , 1 9 6 1 ; K j e l d g a a r d a n d K u r l a n d , 1 9 6 3 ; S u t c l i f f e , 1 9 6 5 ; V i c k e r s a n d M i t l i n , 1 9 6 5 ) . T r e n d s i n t h e w e i g h t s ( T a b l e VII) f o r m i x t u r e s o f s p e c i e s w e r e r e f l e c t e d i n i n c r e a s e s o r d e c r e a s e s i n t h e RNA c o n t e n t , b u t RNA v a l u e s p r e d i c t r a t e s o f i n c r e a s e i n d r y w e i g h t w h i c h a r e h i g h e r t h a n i n d i c a t e d b y t h e o b s e r v e d c h a n g e s i n d r y w e i g h t . No i n f o r m a t i o n i s a v a i l a b l e f r o m t h e p r e s e n t s t u d y t o i n d i c a t e w h e t h e r s u c h t r e n d s i n w e i g h t a r e d e p e n d e n t o n t h e t r e n d s i n R N A " o r a r i s e i n s e a s o n a l c h a n g e s i n s t r u c t u r e o f t h e p o p u l a -t i o n o r f o o d s u p p l y . B o t h a r e k n o w n t o h a v e v a r i e d d u r i n g t h e p e r i o d o f t w o m o n t h s o v e r w h i c h s a m p l i n g w a s c a r r i e d o u t . T h e r e w e r e i n d i c a t i o n s t h a t c h a n g e s i n t h e RNA c o n t e n t o f E. p a c i f i c a a n d c h a e t o g n a t h s w e r e a s s o c i a t e d w i t h t h e l e v e l o f f o o d ( p h y t o p l a n k t o n o r c o p e p o d s ) . H o w e v e r , i n C. p l u m c h r u s i n c r e a s e s i n RNA w e r e a s s o c i a t e d w i t h s t a r v a t i o n . K n o w l e d g e o f t h e RNA c o n t e n t o f i n d i v i d u a l s p e c i e s o f z o o p l a n k t o n may p r o v i d e a m e a s u r e o f t h e i r g r o w t h - 68 -r a t e o r a n i n d i c a t i o n o f t h e r e l a t i o n s h i p s b e t w e e n t h e s e s p e c i e s a n d t h e i r s u p p l y o f f o o d . W h e r e e n o u g h i n f o r m a t i o n i s a v a i l a b l e t o i n d i c a t e t h e o t h e r p r o c e s s e s w h i c h a r e d e p e n d e n t o n RNA i n t h e s p e c i e s e x a m i n e d , RNA may b e u s e f u l t o i n v e s t i g a t e s h o r t o r l o n g t e r m r e s p o n s e s i n t h e s e r e l a t i o n s h i p s . T h e c o m p l e x i t i e s o f t h e m i x e d s a m p l e s p r o b a b l y p r e c l u d e t h e i r u s e t o i n d i c a t e s h o r t t e r m r e s p o n s e s . W h e t h e r RNA v a l u e s d e t e r m i n e d o n m i x e d s a m p l e s o f z o o p l a n k t o n r e f l e c t s e a s o n a l t r e n d s i n t h e a b u n d a n c e o f f o o d o r g a n i s m s c a n n o t b e d e t e r m i n e d f r o m t h e d a t a c o l l e c t e d i n t h i s s t u d y . - 69 -C H A P T E R V C O N C L U S I O N S F r o m t h e e v i d e n c e p r e s e n t e d t h e f o l l o w i n g c o n c l u s i o n s c a n b e d r a w n : 1 ) I t i s u n c e r t a i n t h a t t h e m o d i f i c a t i o n s o f S c h n e i d e r ' s ( 1 9 4 5 ) t e c h n i q u e e m p l o y e d i n t h i s s t u d y m e a s u r e s t h e t r u e RNA c o n t e n t o f z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s . 2) T h e e r r o r s i n h e r e n t i n t h e m o d i f i e d t e c h n i q u e may a m o u n t t o n o m o r e t h a n u n d e r e s t i m a t i o n o f t h e t o t a l RNA. 3) S u t c l i f f e ' s ( 1 9 6 5 ) R N A / G r o w t h r e l a t i o n s h i p a t p r e s e n t c a n b e p r e s u m e d t o p r e d i c t g r o w t h o f z o o p l a n k t o n i c s p e c i e s o n l y i n t h e e x p o n e n t i a l p h a s e o f g r o w t h . 4) O t h e r p r o c e s s e s s u c h a s e c d y s i s w h i c h may a f f e c t t h e t o t a l RNA c o n t e n t o f z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s s h o u l d b e t a k e n i n t o a c c o u n t . 5) T e c h n i c a l p r o b l e m s i n t h e e s t i m a t i o n o f RNA i n z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s s h o u l d b e i n v e s t i g a t e d f u r t h e r . 6) R e l a t i o n s h i p s b e t w e e n RNA a n d g r o w t h , r e p r e s e n t e d b y i n c r e a s e s i n w e i g h t ( o r p r o t e i n ) , r e q u i r e f u r t h e r i n v e s t i g a t i o n b e f o r e b e i n g c o n s i d e r e d v a l i d . 70 -R E F E R E N C E S C I T E D B a t h , l . H . 1 9 5 8 . T h e u l t r a v i o l e t s p e c t r o p h o t o m e t r y d e t e r m i n a t i o n o f s u g a r s a n d u r o n i c a c i d s . A n a l y s t . 8 3 : 4 5 1 - 4 5 5 . B e r t a l a n f f y , L . v o n . 1 9 3 8 . A q u a n t i t a t i v e t h e o r y o f o r g a n i c g r o w t h . ( I n q u i r i e s o n G r o w t h L a w s . I I ) . Hum. B i o l . 1 0 : 1 8 1 - 2 1 3 . B e v e r t o n , R . J . H . a n d S . J . H o l t . 1 9 5 7 . On t h e d y n a m i c s o f e x p l o i t e d f i s h p o p u l a t i o n s . F i s h . I n v e s t . , L o n d . , S e r . 2, 1 9 : 5 3 3 p . B o d e n , B . P. 1 9 5 0 . T h e p o s t - n a u p l i a r s t a g e s o f t h e c r u s t -a c e a n E u p h a u s i a p a c i f i c a . T r a n s . Am. M i c r o s c o p . S o c . 6 9 : 3 7 3 - 3 8 6 . B r a c h e t , J . 1 9 4 2 . I n I d e a s i n m o d e r n b i o l o g y , p . 3 4 . J . A . M o o r e ( e d T J . T h e N a t u r a l H i s t o r y P r e s s , G a r d e n C i t y . 1 9 6 0 . T h e b i o l o g i c a l r o l e o f t h e n u c l e i c a c i d s . E l s e v i e r , New Y o r k . 1 4 4 p . B r o w n , D.D., a n d E. L i t t n a . 1 9 6 4 a . RNA s y n t h e s i s d u r i n g t h e d e v e l o p m e n t o f X e n o p u s l a e v i s , t h e S o u t h A f r i c a n c l a w e d t o a d . J . M o l . B i o l . 8: 6 6 9 - 6 8 7 . 1 9 6 4 b . V a r i a t i o n s i n t h e s y n t h e s i s o f s t a b l e RNA's d u r i n g o o g e n e s i s a n d d e v e l o p m e n t o f X e n o p u s l a e v i s . J . M o l . B i o l . 8: 6 8 8 - 6 9 5 . C a l d w e l l , P .C., E . L . M a c K o r , a n d C. H i n s h e l w o o d . 1 9 5 0 . T h e r i b o s e n u c l e i c a c i d c o n t e n t a n d c e l l g r o w t h o f B a c t , l a c t i s a e r o g e n e s . J . Chem. S o c . 1 9 5 0 : 3 1 5 1 - 3 1 5 5 . C a m p b e l l , M.H. 1 9 3 4 . T h e l i f e h i s t o r y a n d p o s t e m b r y o n i c d e v e l o p m e n t o f t h e c o p e p o d s C a l a n u s t o n s u s B r a d y a n d E u c h a e t a j a p o n i c a M a r u k a w a . J . B i o l . B d . C a n a d a . 1 ( 1 ) : 1 - 6 5 . C a s s i e , R.M. 1 9 6 0 . F a c t o r s i n f l u e n c i n g t h e d i s t r i b u t i o n p a t t e r n o f p l a n k t o n i n t h e m i x i n g z o n e b e t w e e n o c e a n i c a n d h a r b o u r w a t e r s . New Z e a l a n d J . S c i . 3: 2 6 - 5 0 . C u r l , H. J r . 1 9 6 1 . S t a n d i n g c r o p s o f c a r b o n , n i t r o g e n a n d p h o s p h o r u s a n d t r a n s f e r b e t w e e n t r o p h i c l e v e l s ^ . , i n c o n t i n e n t a l s h e l f w a t e r s s o u t h o f New Y o r k . R a p p t . P r o c e s - V e r b o u x R e u n i o n s C o n s e i l P e r m . I n t e r n . E x p l o r a t i o n M e r . 1 5 3 : 1 8 3 - 1 8 9 . 71 -R E F E R E N C E S ( C o n t ' d ) C u s h i n g , D.H. 1 9 5 9 . On t h e n a t u r e o f p r o d u c t i o n i n t h e s e a . M i n . A g r . F i s h . F o o d , U.K., F i s h , I n v e s t . 2 2 ( 6 ) : 1 - 4 0 . D i s c h e , Z., A. D e v i , a n d G. Z e l m e n i s . 1 9 6 1 . I n f l u e n c e o f a g e a n d c a t a r a c t f o r m a t i o n o n t h e r i b o n u c l e i c a c i d o f t h e l e n s . Am. J . O p t h a l m o l . 5 1 ( 3 ) : 9 9 3 - 1 0 0 3 , F u l t o n , J . D . , O.D. K e n n e d y , K. S t e p h e n s a n d J . S k e l d i n g . 1 9 6 7 . P h y s i c a l , c h e m i c a l a n d b i o l o g i c a l d a t a , S t r a i t o f G e o r g i a , 1 9 6 6 . F i s h . R e s . B d . C a n a d a , MS R e p t . S e r . ( O c e a n o g r . a n d L i m n o l . ) No. 8 1 , 1 4 5 p . G i l f i l l i a n , E . S . I I I . 1 9 6 7 . A new m e t h o d o f d e t e r m i n i n g t h e e f f i c i e n c y o f t o w e d p l a n k t o n s a m p l e r s . M S c . T h e s i s . U n i v . o f B r i t i s h C o l u m b i a . 8fe p . G r e z e , N.V. 1 9 6 3 . P r o c e d u r e f o r c a l c u l a t i n g p r o d u c t i o n o f p l a n k t o n i c c o p e p o d s . Z o o l o g i c h e s k i y Z h u r n a l . 4 2 ( 9 ) : 1 3 2 9 - 1 3 3 7 ; U.S. D e p t . o f C o m m e r c e , O f f i c e o f T e c h n i c a l S e r v i c e s , J o i n t P u b l i c a t i o n s R e s e a r c h S e r v i c e . T r a n s l a t i o n N o . 2 1 , 8 0 1 . H o a g l a n d , M.B. 1 9 5 9 . T h e p r e s e n t s t a t e o f t h e a d a p t o r h y p o -t h e s i s , p . 4 0 - 4 6 . In. S t r u c t u r e a n d f u n c t i o n o f g e n e t i c e l e m e n t s . B r o o k h a v e n S y m p o s i a i n B i o l o g y . No. 1 2 . H o r e c k e r , B . L . 1 9 5 7 . T h e o r c i n o l r e a c t i o n s f o r m i x t u r e s o f p e n t o s e a n d h e p t u l o s e . p . 1 0 5 - 1 0 7 . I n S.P. C o l o w i c k a n d N.O. K a p l a n , ( e d s . ) , M e t h o d s i n e n z y m o l o g y . V o l . I I I . A c a d e m i c P r e s s , New Y o r k . H o r e c k e r , B . L . , P.Z. S m y r n i o t i s a n d J . E . S e e g m i l l e r . 1 9 5 1 . T h e e n z y m a t i c c o n v e r s i o n o f 6 - p h o s p h o g l u c o n a t e t o r i b u l o s e - 5 - p h o s p h a t e a n d r i b o s e - 5 - p h o s p h a t e . J . B i o l . Chem. 1 9 3 : 3 8 3 - 3 9 6 . J e e n e r , R. 1 9 5 3 . R i b o n u c l e i c a c i d a n d p r o t e i n s y n t h e s i s i n c o n t i n u o u s c u l t u r e s o f P o l y t o m e l l a c a e c a . A r c h . B i o c h e m . B i o p h y s . 4 3 : 3 8 1 - 3 8 8 . K j e l d g a a r d , N.O. 1 9 6 1 . T h e k i n e t i c s o f r i b o n u c l e i c a c i d a n d p r o t e i n f o r m a t i o n i n S a l m o n e l l a t y p h i m u r i u m d u r i n g t h e t r a n s i t i o n b e t w e e n d i f f e r e n t s t a t e s o f b a l a n c e d g r o w t h . B i o c h i m . B i o p h y s . A c t a . 4 9 : 6 4 - 7 6 . K j e l d g a a r d , N.O., a n d C.G. K u r l a n d . 1 9 6 3 . T h e d i s t r i b u t i o n o f s o l u b l e a n d r i b o s o m a l RNA a s a f u n c t i o n o f g r o w t h r a t e . J . M o l . B i o l . 6: 3 4 1 - 3 4 8 . 72 -REFERENCES (Cont'd) K j e l d g a a r d , N.O., 0. Maaloe, and M. S c h a e c h t e r . 1958. The t r a n s i t i o n between d i f f e r e n t p h y s i o l o g i c a l s t a t e s d u r i n g b a l a n c e d growth of S a l m o n e l l a typhimurium. J . Gen. M i c r o b i o l . 19: 607-616. L a s k e r , R. 1966. F e e d i n g , growth, r e s p i r a t i o n and carbon u t i l i z a t i o n o f a e u p h a u s i i d c r u s t a c e a n . J . F i s h . Res. Bd. Canada. 2 3 ( 9 ) : 1291-1317. L o n g h u r s t , A.R. and D.L.R. S e i b e r t . 1967. S k i l l i n the use of Folsom's p l a n k t o n sample s p l i t t e r . L i m n o l . Oceanogr. 1 2 ( 2 ) : 334-335. McEwan, G.F., M.W.' Johnson, and T.R. Folsom. 1954. 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B i o l . , 1963, T r a n s l a t i o n No. 20158. 73 -R E F E R E N C E S ( C o n t ' d ) R a y m o n t , J . E . G . , J . A u s t i n , a n d E. L i n f o r d . 1 9 6 4 . B i o -c h e m i c a l s t u d i e s o n m a r i n e z o o p l a n k t o n . I . T h e b i o c h e m i c a l c o m p o s i t i o n o f N e o m y s i s i n t e g e r . J . C o n s e i l , C o n s e i l P e r m . I n t e r n . E x p l o r a t i o n M e r . 2 8 ( 3 ) : 3 5 4 - 3 6 3 . 1 9 6 6 . T h e b i o c h e m i c a l c o m p o s i t i o n o f c e r t a i n o c e a n i c z o o p l a n k t o n i c d e c a p o d s . D e e p - s e a R e s e a r c h . 1 4 : 1 1 3 - 1 1 5 . R a y m o n t , J . E . G . , a n d R . J . C o n o v e r . 1 9 6 1 . F u r t h e r i n v e s t i g a -t i o n s o n t h e c a r b o h y d r a t e c o n t e n t o f m a r i n e z o o -p l a n k t o n . L i m n o l . O c e a n o g . 6 ( 2 ) : 1 5 4 - 1 6 4 . R e e v e , M.R. 1 9 6 4 . G r o w t h e f f i c i e n c y i n a r t e m i a u n d e r l a b o r a -t o r y c o n d i t i o n s . B i o l . B u l l . 1 2 5 ( 1 ) : 1 3 3 - 1 4 5 . R i c h a r d s , A.G. 1 9 5 1 . T h e i n t e g u m e n t o f a r t h r o p o d s . O x f o r d U n i v e r s i t y P r e s s , L o n d o n . 4 1 1 p . R i c k e t t s , T.R. 1 9 6 6 . On t h e c h e m i c a l c o m p o s i t i o n o f some U n i c e l l u l a r a l g a e . P h y t o c h e m . 5: 6 7 - 7 6 . R i l e y , G.A. 1 9 4 7 . A. t h e o r e t i c a l a n a l y s i s o f t h e z o o p l a n k t o n p o p u l a t i o n o f G e o r g e s B a n k . J . M a r . R e s . 6: 5 4 - 7 3 . 1 9 6 2 . T h e o r y o f f o o d - c h a i n - r e l a t i o n s i n t h e o c e a n , p . 4 3 8 - 4 6 3 . I n M.N. H i l l ( e d . ) , T h e s e a . V o l . I I . I n t e r s c i e n c e P u b l i s h e r s , New Y o r k . R o s s e t , R. , J . J u l i e n , a n d R. M o n i e r . 1 9 6 6 . R i b o n u c l e i c a c i d c o m p o s i t i o n o f b a c t e r i a a s a f u n c t i o n o f g r o w t h r a t e . J . M o l . B i o l . 1 8 : 3 0 8 - 3 2 0 . S c h n e i d e r , W.C. 1 9 4 5 . P h o s p h o r o u s c o m p o u n d s i n a n i m a l t i s s u e s . I . E x t r a c t i o n a n d e s t i m a t i o n o f d e s o x y p e n t o s e n u c l e i c a c i d a n d o f p e n t o s e n u c l e i c a c i d . J . B i o l . Chem. 1 6 1 : 2 9 3 - 3 0 3 . S n e d e c o r , G.W. 1 9 6 6 . S t a t i s t i c a l m e t h o d s . I o w a S t a t e U n i -v e r s i t y P r e s s , A m e s . 5 3 4 p . S o x , H.C. J r . a n d M.B. H o a g l a n d . 1 9 6 6 . F u n c t i o n a l a l t e r a t i o n s i n r a t l i v e r p o l y s o m e s a s s o c i a t e d w i t h s t a r v a t i o n a n d r e f e e d i n g . J . M o l . B i o l . 2 0 : 1 1 3 - 1 2 1 . S p i e g e l , M.R. 1 9 6 1 . T h e o r y a n d p r o b l e m s o f s t a t i s t i c s . S c h a u m P u b l i s h i n g C o . , New Y o r k . 3 5 9 p . - 7 4 -R E F E R E N C E S ( C o n t ' d ) S p i e g e l m a n , S. 1 9 6 5 . G e n e a c t i o n , p . 1 7 - 7 8 . I n J . A. M o o r e ( e d . ) I d e a s i n m o d e r n b i o l o g y . T h e N a t u r a l H i s t o r y P r e s s , G a r d e n C i t y . S t e p h e n s , K., J . D . F u l t o n , O.D. K e n n e d y , a n d A. K. P e a s e . 1 9 6 7 . B i o l o g i c a l , c h e m i c a l , a n d p h y s i c a l o b s e r -v a t i o n s i n S a a n i c h I n l e t , V a n c o u v e r I s l a n d , B.C. F i s h . R e s . B d . C a n a d a , MS R e p t . S e r . ( O c e a n o g r . a n d L i m n o l . ) No. 8 1 , 1 4 5 p . S t e w a r t , J . A . a n d J . P a p a c o n s t a n t i n o u . 1 9 6 7 . A s t a b i l i -z a t i o n o f RNA t e m p l a t e s i n l e n s c e l l d i f f e r e n -t i a t i o n . P r o c . N a t . A c a d . S c i e n c e s ( U . S . A . ) , 5 8 ( 1 ) : 9 5 - 1 0 2 . S t r i c k l a n d , J . D . H . a n d T.R. P a r s o n s . 1 9 6 5 . A m a n u a l o f s e a w a t e r a n a l y s i s . F i s h . R e s . B d . C a n a d a , B u l l e t i n N o . 1 2 5 . O t t a w a . 1 2 6 p . S u t c l i f f e , W.H. J r . 1 9 6 5 . G r o w t h e s t i m a t e s f r o m r i b o n u c l e i c a c i d c o n t e n t i n some s m a l l m a r i n e o r g a n i s m s . L i m n o l . O c e a n o g . S u p p l e m e n t t o V o l . 1 0 . p . 2 5 3 - 2 5 8 , V i c k e r s , D.H. a n d N. M i t l i n . 1 9 6 5 . C h a n g e s i n n u c l e i c a c i d c o n t e n t o f t h e b o l l w e e v i l A n t h o n o m u s g r a n d i s B o d e m a n d u r i n g i t s d e v e l o p m e n t . P h y s i o l . Z o o l . 39 ( 1 ) :• 7 0 - 76. Webb, J.M. a n d H.B. L e v y . 1 9 5 8 . New d e v e l o p m e n t s o n t h e c h e m i c a l d e t e r m i n a t i o n o f t h e n u c l e i c a c i d s , p . 1 - 3 0 . I n D. G l i c k , ( e d . ) , M e t h o d s o f b i o -c h e m i c a l a n a l y s i s . V o l . 6, I n t e r s c i e n c e , New Y o r k . W h i t e , A . , P. H a n d l e r , a n d E . L . S m i t h . 1 9 6 4 . P r i n c i p l e s o f b i o c h e m i s t r y . M c G r a w - H i l l B o o k C o . , New Y o r k . 1 1 0 6 p W i n b e r g , G.G. 1 9 5 6 . R a t e o f m e t a b o l i s m a n d f o o d r e q u i r e m e n t s o f f i s h e s . N a u c h n y e T r u d y B e l o r u s s k o v o G o s u d a r t -v e n n o v o U n i v e r s i t e t a i m e n i V . I . L e n i n a , M i n s k , 2 5 3 p ; F i s h . R e s . B d . C a n a d a . T r a n s l a t i o n S e r . No. 1 9 4 . Y o u n g , J . Z . 1 9 5 0 . T h e l i f e o f v e r t e b r a t e s . O x f o r d , C l a r e n d o n P r e s s . 7 6 7 p . - 75 -A P P E N D I X T h e f o l l o w i n g t a b l e s c o n t a i n r e s u l t s o f a n a l y s e s made u p o n z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s c o l l e c t e d i n S a a n i c h I n l e t , V a n c o u v e r I s l a n d , B.C. d u r i n g J u n e a n d J u l y 1 9 6 6 . Z o o p l a n k -t o n c o l l e c t i o n s s u b - d i v i d e d ( s e e s e c t i o n I I . 1 ) i n t o m o r e t h a n o n e f r a c t i o n a r e r e p o r t e d i n t a b l e s a p p e a r i n g o n p a g e s 76 t o 1 0 5 . A n a d d i t i o n a l t a b l e f o r c o l l e c t i o n s u n s o r t e d b y t h i s p r o c e d u r e ( s e c t i o n I I . 1 ) may b e f o u n d o n p a g e 1 0 6 . A n e x p l a n a t i o n o f t h e t a b l e s i s g i v e n b e l o w : S T A T I O N NUMBER - BB o r B r e n t w o o d B a y ; S A M P L I N G GEAR - L . C . B . ( L a r g e C l a r k e B u m p u s ) o r a 25-cm d i a r i n g n e t ( P . O . G . O . ) ; DATE - d a y / m o n t h / y e a r ; T I M E - d u r a t i o n o f s a m p l i n g ; CORR. D E P T H - d e p t h o f t h e s a m p l i n g d e v i c e c o r r e c t e d f o r w i r e a n g l e ; S A M P L E D E S C R I P T I O N - ( s e e s e c t i o n I I . 1 ) ; COMP. - t h e c o m p o s i t i o n o f e a c h s a m p l e i n t e r m s o f t h e n u m b e r o f o r g a n i s m s c o u n t e d o r e s t i m a t e d i n t h e s a m p l e , e x c e p t f o r : a ) t h o s e n u m b e r s f o l l o w e d b y t h e s u b s c r i p t e_ a r e sums o f t h e n u m b e r o f o r g a n i s m s i n t h e s e p a r a t e f r a c t i o n s , o f e a c h s a m p l e ; b ) t h o s e n u m b e r s f o l l o w e d b y a p e r c e n t s i g n (%) r e p r e s e n t t h e p e r c e n t a g e o f t h e o r g a n i s m s i n t h a t f r a c t i o n ; m g / I N D I V I D U A L , WET o r DRY - ( s e e s e c t i o n I I . 1 ) ; % A S H - t h e a s h e d w e i g h t o f z o o p l a n k t o n i c o r g a n i s m s com-b u s t e d a t 450°C i n a m u f f l e f u r n a c e , a n d d i v i d e d b y t h e d r y w t o f t h e s e o r g a n i s m s ; m g / i ^ , WET o r DRY - may b e r e l a t e d t o t h e a b o v e d a t a b y t h e e x p r e s s i o n : COMP. m u l t i p l i e d b y t h e m g / I N D I V I D U A L , WET o r DRY m^ o f w a t e r f i l t e r e d S T A T I O N BB-1 L . C . B. S o r t e d p l a n k t o n s a m p l e s 3 - V I - 6 6 T I M E : 1 0 4 8 - 1 1 2 2 CORR. SAMPLE mg/INDIVIDUAL % RNA p g / m g NUMBER mg/m 3 DEPTH D E S C R I P T I O N COMP WET DRY ASH 6 70 mp 6 70 m i n u s PER m3 WET DRY 6 1 5 mjx 0-33m T o t a l S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s R e s i d u e 1 5 2 3 2 - 1 4 5 m T o t a l 2 1 , 2 8 8 S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s 1 7 6 E u p h a u s i a p a c i f i c a - a d u l t s 60 O t h e r A m p h i p o d s 1 8 0 O r c h o m o n e l l a s p . 20 4 R e s i d u e e g g s m i s c . 4 4 2 0 , 8 5 2 6 5 . 1 % 3 4 . 9 % 59 4 14 0.23 0.10 0.42 9.14 0.47 80 47 89 94 1 0 . 3 3 3 . 6 2 7 . 6 - 1 8 7 1 0 . 03 1 1 . 4 2.3 5 11 1.27 4 1 . 6 3 2 . 3 - 47 4.41 2 5 . 0 2 4 . 4 380 - 3 8 . 01 i - - J 8.1 2.8 3 15 1.30°^ i 1 3 . 2 5.9 1 64 10. 05 2 5 . 0 2 4 . 4 3 12 1. 50 - - 0. 4 5 -3 9 . 9 u 0. 07 - 0.12 6 4 . 8 1 1 . 8 0. 1 - 0. 34 2 5 . 1 6.0 0. 07 - 0. 27 2 8 . 8 4.4 0. 07 - 0. 34-- - 3 7 2 - -S T A T I O N BB-2 L . C . B . 7-VI-66 T I M E : 0 9 2 0 - 1 1 0 8 CORR. S A M P L E m g / I N D I V I D U A L % RNA }ig/mg NUMBER mg/m 3 D E P T H D E S C R I P T I O N COMP WET DRY A S H 6 70 mu 6 70 m i n u s RER m 5 WET DRY 6 1 5 mu 0-30m 3 0 - 1 4 0 m T o t a l 19,680 0. 2 0. 03 16.4 28. 3 25. 1 512 106 16. 05 S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s 340 1 0. 12 10. 2 5. 6 9 12 1. 07 C a l a n u s s p V - V I 1,268 0. 5 0. 08 18. 4 13. 8 33 16 2. 57 O t h e r A m p h i p o d s 232 0. 5 0. 08 52. 4 50. 5 6 3 0. 47 R e s i d u e 17,840 0. 01 0. 004 20. 8 17. 6 465 7 1. 90 T o t a l 8,488 3 0. 18 7.7 9. 4 5. 5 145 497 25. 80 S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s 192 5 0. 66 17. 4 12. 0 3 16 2. 18 C a l a n u s p l u m c h r u s V 516 4 0. 84 10. 7 7. 3 9 3 7. 39 E u p h a u s i a p a c i f i c a a d u l t 24 28 3. 58 18. 9 13. 6 0. 4 11 1. 43 O t h e r A m p h i p o d s 144 4 - 17. 1 12. 5 2 10 -O r c h o m e n e l l a s p 8 5 - - 0. 1 1 -2 - 0v 54 69. 7 5. 4 0. 03 - 0. 0003 2 - • 1. 05 111. 6 44. 8 0. 03 - 0. 0006 2 - 3. 54 13. 2 u 0. 03 - 0. 002 2 - 4. 72 9. 3 u 0. 03 - 0. 003 R e s i d u e 7,604 0. 05 0. 02 20. 1 15. 3 129 6 1. 93 S T A T I O N B B - 3 L • C. B. 9 - V I - 6 6 T I M E : 0 9 2 8 - 1 0 5 9 CORR. SAMPLE D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY A S H RNA ug/mg NUMBER mg/m 670 mp 6 7 0 m i n u s P E R m f WET DRY 30. 2 2 8 . 6 758 1 6 4 2 3 . 1 4 1 8 . 6 1 0 . 0 6 8 0 . 9 3 1 3 . 0 1 2 . 8 34 5 7 8.08 3 3 . 8 2 5 . 1 1 2 0. 28 2 3 . 1 2 0 . 8 3 2 0.57 4 6 . 0 3 9 . 7 716 39 4.42 0-33m T o t a l S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s C a l a n u s s p V - V I E u p h a u s i i d s O t h e r A m p h i p o d s R e s i d u e e g g s m i s c . 5 8 , 4 9 6 0.2 512 2,596 60 220 5 5 , 3 0 8 6 7 , 8 % 3 2 . 2% 1 2 3 0.5 0.05 0.030 9.6 0.14 0. 24 0. 35 0.20 0.006 3 3 - 1 5 6 m T o t a l 1 4 , 7 4 4 S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s 44 C a l a n u s p l u m c h r u s V 8 20 E u p h a u s i i d s , a d u l t s 32 O t h e r A m p h i p o d s 1 8 0 O r c h o m o n e l l a s p . 20 2 6 10 2 R e s i d u e 1 3 , 6 4 8 1 0.20 8.0 2 5 . 4 5 0.59 1 6 . 1 5 0.92 9.1 21 3.50 3 0 . 9 4 0.84 1 7 . 0 6 . . . 0.40 - 6 0 . 2 1.23 - 5 0 . 2 3.55 - 3.9 5.05 - 3 6 . 6 1 0.07 - 4 7 . 7 2 3 . 1 177 2 2 9 3 5 . 52 8. 5 0. 5 3 0. 32 4. 2 10 53 9. 06 2 3 . 8 0. 4 8 1. 34 1 1 . 0 2 8 1. 82 - 0. 2 1 -u 0. 03 - 0. 01 u 0. 1 - 0. 09 u 0. 1 - 0. 4 3 u 0. 0 3 - 0. 12 6 2 . 7 1 6 4 1 1 2 1 1 . 97 S T A T I O N BB-4 L . C . B . 1 3 - V I - 6 6 T I M E : 1 0 1 0 - 1 1 5 9 CORR. S A M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % A S H RNA jag/mg 6 70 mu 6 70 m i n u s 6 1 5 mu NUMBER PER m 3 mt; WET l/m5 DRY 5,252 0.4 0.086 9.2 26 . 6 2 3 . 2 1 1 0 50 9.48 1 9 6 1 0.15 2 0 . 1 1 1 . 5 4 6 0.62 1,13 2 1 0.16 2 8 . 5 2 5 . 0 24 21 3. 81 40 3 0.50 2 5 . 4 2 1 . 2 1 2 0.40 540 0.8 0.15 34 . 8 3 2 . 6 1 1 9 1. 70 3 , 3 4 4 e 0.06 0 . 0 0 8 1 1 5 . 9 9. 7 70 4 0. 57 2 8 , 9 4 0 e 0.80 0 .12 1 0 . 6 1 4 . 1 1 1 . 3 3 8 3 3 0 6 4 5 . 9 3 64 4.1 0.46 1 7 . 8 1 6 . 1 1 3 0.37 1,34 0 4.0 0. 75 1 4 . 0 8. 8 18 71 1 3 . 2 8 16 4 3 . 1 6.40 3 0 . 6 2 4 . 9 0.2 9 1.28 312 3.8 0. 72 2 0 . 8 1 3 . 8 4 16 2.95 48 9.2 - - - 1 6 . -20 - 0 . 54 1 3 . 8 0.6 0.3 - 0.16 8 - 1.20 7 5 . 9 u 0.1 - 0.12 •12 - 4. 30 3 6 . 1 1 2 . 2 0.2 - 0. 86 8 - 7.12 5.8 1.9 0.1 - 0.15 2 7 , 1 6 0 0.67 0.14 6.0 2.2 359 2 4 1 5 0 . 30 0-31m T o t a l S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s C a l a n u s s p V - V I E u p h a u s i i d s O t h e r A m p h i p o d s R e s i d u e 3 4 - 1 7 1 m T o t a l S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s C a l a n u s p l u m c h r u s V E u p h a u s i i d s O t h e r A m p h i p o d s O r c h o m e n e l l a s p R e s i d u e S T A T I O N B B - 5 P.O.G.O. NET 1 5 - V I - 6 6 T I M E : 0 9 3 7 - 0 9 5 5 CORR. S A M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % RNA ug/mg A S H 6 70 my 6 70 m i n u s 6 1 5 mu NUMBER P E R m mg/m 3 WET DRY 0-150m T o t a l S o r t e d G r o u p s C a l a n u s p l u m c h r u s V E u p h a u s i i d s O t h e r A m p h i p o d s O r c h o m e n e l l a s p . 2 9 , 5 0 0 0.17 1 0 . 4 1 5 . 9 1 2 . 8 369 4 7 2 6 2 . 6 9 1 5 6 5 0.93 7.1 3.1 15 72 1 4 . 32 24 33 4.57 2 7 . 2 1 9 . 2 0.3 10 1.37 1 5 6 4 0.87 1 6 . 8 1 1 . 5 2 8 1. 82 88 10 - - - 1 12 -4 - 0.40 4 6 . 2 u 0.05 - 0.02 8 - 0. 72 1 2 . 9 u 0.1 - 0.08 16 - 2. 50 7.6 u 0.2 - 0.58 32 - 5.19 1 5 . 2 u 0.4 - 2. 21 4 - 6. 70 3 1 . 2 u 0.05 - 0. 36 16 - 3.68 8.4 u 0.2 - 0. 78 CO o S T A T I O N B B - 6 P.O.G.O. NET 1 7 - V I - 6 6 T I M E : 1 0 0 7 - 1 1 0 3 CORR. D E P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I VTDUAL WET DRY % RNA AS H 6 7 0 mp. ug/mg 6 7 0 m i n u s -.•615 mji NUMBER P E R m 3 mg/ WET 3 m J DRY 0-152m T o t a l 69 ,652 0.07 0.01 6.2 8.8 6.5 5 3 1 39 6.90 S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s 26 0.5 0.06 1 8 . 3 8.6 0.2 0.1 0.01 C a l a n u s p l u m c h r u s V 2,820 3 0. 70 9.2 4.9 22 • 7 1. 51 E u p h a u s i a p a c i f i c a - a d u l t s 8 78 1 3 . 0 0 2 3 . 0 1 6 . 3 0.1 8 1. 30 O t h e r a m p h i p o d s 160 5 0.43 2 6 . 7 2 4 . 9 1 6 0. 52 O r c h o m e n e l l a s p . 48 14 3.25 0.4 6 1. 30 24 - 0.28 6 9 . 4 4 7 . 0 0.2 - 0.06 8 - 0. 59 36. 2 3. 7 0.06 - 0 . 0 3 6 - 1.2 7 4 9 . 5 u 0.04 - 0.05 8 - 2.52 3 9 . 1 3.4 0.06 - 0.02 14 - 3.57 2 7 . 6 1.3 0.1 - 0. 36 8 - 4. 28 23.4 1.4 0. 06 - 0.26 2 - 9.43 3 2 . 9 2.0 0.02 - 0.19 R e s i d u e 1.23 1 5 . 9 8.6 0. 5 - 0. 62 S i z e A n a l y s i s 1 0 0 0 u M e s h 1 5 , 9 1 2 0.05 0 . 0 0 5 2 1 . 9 1 8 . 6 1 2 1 6 0. 62 C o p e p o d s 1 0 0 % 6 4 0 u M e s h 3,220 0.05 , 0.01 8.6 7.1 24 1 0.16 C o p e p o d s 1 0 0 % 300 u M e s h 4 7 , 3 9 0 0 . 0 0 5 0 . 0 0 1 •17.9 1 3 . 6 3 6 1 2 0.33 C o p e p o d s e g g s 2 1 . 7% 78 . 3% S T A T I O N B B - 7 P.O.G.O. NET 1 9 - V I - 6 6 T I M E : 1 1 3 7 - 1 2 4 3 CORR. DEPTH 0- 30m 0-151m SA M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % A S H RNA 6 7 0 mp Ug/mg 6 70 m i n u s 6 1 5 mp NUMBER P E R m 3 mg/m 3 WET DRY T o t a l 5 5 y 3 3 2 ^ 0.1 0. 005 6.0 3 3 . 3 3 2 . 7 4 6 1 46 2. 30 S o r t e d G r o u p s C h - a e t o g n a t h s 87 4 2.40 8.1 4.3 1 3 1. 74 C a l a n u s p l u m c h r u s V 43 3 0. 52 9.6 7.4 0.4 1 0.17 O t h e r A m p h i p o d s 1 6 2 1 0.12 2 8 . 8 2 5 . 3 1 0.4 0.16 R e s i d u e 48 0.2 0. 03 2 2 . 2 1 5 . 6 0.1 0.2 0. 01 S i z e F r a c t i o n 1 0 0 0 u M e s h 567 1 0. 21 4 0 . 0 35 . 4 0.4 5 0. 99 C o p e p o d s 1 0 0 % 6 4 0 p. M e s h 1,442 0.6 0. 09 2 1 . 9 1 8 . 9 5.0 7 1. 08 C o p e p o d s 1 0 0 % 5 7 1 p M e s h 1 , 6 0 1 0.2 0.0 3 29 . 8 20.5- 12 2 0. 40 C o p e p o d s 1 0 0 % 3 3 3 p M e s h 5 1 , 3 7 2 0.04 - - - 4 2 8 17 -C o p e p o d s 2 9 . 8% E g g s 70. 2% T I M E : 1 1 2 2 - 1 2 3 0 T o t a l 9 1 , 6 0 0 e 1 0.05 9.4 1 6 . 0 1 1 . 1 5 7 2 3 4 3 28. 63 S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s 87 0.92 1 8 . 3 8.6 0.5 0.46 S T A T I O N BB -7 P.O.G.O. NET 1 9 - V I - 6 6 T I M E : 1 1 2 2 - 1 2 3 0 CORR. S A M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % A S H RNA 6 70 mu ug/mg 6 70 m i n u s 6 1 5 mp NUMBER PER m 3 m WET g/m 3 DRY 0-151m C a l a n u s p l u m c h r u s V 2, 7 4 5 4 0.85 1 5 . 0 9.6 17 60 1 4 . 62 ( c o n t ' d ) E u p h a u s i a p a c i f i c a 4 6 46 1 1 . 3 2 24. 0 1 8 . 0 0.3 14 3.40 O t h e r A m p h i p o d s 1 8 5 5 0.95 1 3 . 0 1 2 . 1 1 6 1.14 O r c h o m e n e l l a s p . 15 6 12 - - 1 12 -9 0.27 5 9 . 2 2.8 0. 06 - 0.02 14 0. 72 4 0 . 4 6.6 0.09 - 0. 06 7 1. 74 9 2 . 0 1 7 . 3 0. 04 - 0.07 25 2.68 2 9 . 9 8.2 0.2 - 0.19 53 3.47 2 6 . 0 3.2 0 C 3 J - 1. 04 39 4.76 2 3 . 0 4.5 0.2 - 0. 95 9 6. 78 30 . 9 7.9 0. 06 - 0.41 R e s i d u e 1 5 8 4 0.83 1 7 . 5 1 1 . 9 1 4 0. 83 S i z e a n a l y s i s 1 5 0 0 u M e s h 2 , 7 4 5 4 0.85 1 5 . 0 9.6 17 60 1 4 . 62 C o p e p o d s 1 0 0 % 1 0 0 0 u M e s h 1,442 3 0.26 8. 8 3.0 9 23 2. 34 C o p e p o d s 1 0 0 % 6 4 0 p M e s h 2 0 , 1 8 3 0.4 0.10 1 3 . 4 1 1 . 2 12 6 54 1 2 . 61 C o p e p o d s 1 0 0 % 5 7 1 u M e s h 1 3 , 4 6 9 0.2 0.03 1 7 . 0 1 4 . 7 84 20 2. 53 C o p e p o d s 1 0 0 % 3 3 3 u M e s h 5 1 , 8 3 0 0.09 0.01 1 6 . 3 1 2 . 2 3 2 3 29 4. 21 CO C o p e p o d s E g g s 3 0 . 5% 6 9 . 5% S T A T I O N B B - 8 P.O.G.O. NET 2 1 - V I - 6 6 T I M E : 0 8 3 3 - 0 9 5 1 CORR. DE P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L NUMBER mg/nf WET DRY A S H 6 70 mu 670 m i n u s 6 1 5 mp. PE R m6 WET DRY 3 5 , 7 9 5 e 1 0.16 . 8.1 1 1 . 9 9.9 214 218 3 4 . 1 9 68 4 0. 51 1 0 . 6 9.4 0.4 2 0. 20 2, 5 2 8 4 0. 84 6.3 3.3 15 53 1 2 . 6 8 29 47 8.23 2 9 . 8 2 1 . 6 0.2 9 1. 65 237 3 0. 60 2 9 . 1 2 3 . 8 1 4 0. 84 68 11 - - - 0.4 4 -1.3 - • 0.2 7 2 8 . 3 6.6 0.01 - 0. 0 0 2 4 - 0.85 2 2 . 2 6.6 0.02 - 0.02 4 - 1. 20 2 3 . 4 6.3 0.02 - 0.02 13 - 2.54 3 1 . 4 8.3 0.08 - 0. 20 23 - 3. 56 2 9 . 7 5.0 0.1 - 0. 36 16 - 4-. 78 3 4 . 9 5.9 0.1 - • 0.48 1.3 - 8.45 2 1 . 5 2.4 0.01 - 0. 07 104 5 1.10 1 2 . 4 7.4 0.6 - 0. 66 2,528 4 0. 84 6.3 3.3 15 53 1 2 . 6 8 1 0 0 % 1 , 2 1 3 1 ; 0. 10 31 . 4 2 8 . 3 7 4 0. 70 7 6 . 9 % 2 3 . 1 % 1 0 , 4 5 3 1 0.14 1 7 . 1 1 4 . 9 62 62 8. 72 1 0 0 % 2 , 1 4 7 0.3 - - - 13 4 -1 0 0 % 2 9 , 4 0 0 0.1 0.01 2 0 . 8 1 2 . 4 170 12 2.46 0-160m T o t a l S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s C a l a n u s p l u m c h r u s V E u p h a u s i a p a c i f i c a O t h e r A m p h i p o d s O r c h o m e n e l l a s p . R e s i d u e S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 p M e s h C o p e p o d s 1 0 0 0 p M e s h C o p e p o d s F i s h e g g s 6 4 0 p M e s h C o p e p o d s 5 7 1 u M e s h C o p e p o d s 3 3 3 p M e s h C o p e p o d s e g g s 3 1 . 4 % 6 8 . 6 % S T A T I O N BB-9 P.O.G.O. NET 2 3 - V I - 6 6 T I M E 1 1 4 6 - 1 3 0 4 CORR. SAMPLE COMP m g / I N D I V I D U A L % RNA Ug/mg m § / m D E P T H D E S C R I P T I O N WET DRY ASH 6 70 mp 670 m i n u s P E R m WET DRY 6 1 5 m 0-160m T o t a l 4 7 , 5 9 5 e - 0.16 5.4 2 6 . 1 1 7 . 2 238 - 3 9 . 0 9 S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s 1 3 2 5 0.46 2 6 . 3 1 8 . 3 1 3 0.30 C a l a n u s p l u m c h r u s V 3, 8 2 6 4 0.67 1 5 . 0 8.2 19 78 1 2 . 7 9 E u p h a u s i a p a c i f i c a - a d u l t s 22 44 - 3 9 . 4 3 0 . 0 0.1 4 O t h e r A m p h i p o d s 1 6 0 11 0.39 2 4 . 6 1 7 . 1 1 9 0 . 3 1 O r c h o m e n e l l a s p . 76 10 - - - 0.4 4 R e s i d u e 1 0 0 8 1.36 25.4 1 5 . 5 0.5 4 0.68 S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 u M e s h 3,826 4 0.67 1 5 . 0 8.2 18 71 1 2 . 1 3 C o p e p o d s 1 0 0 1 1 0 0 0 p M e s h 4 , 1 0 6 2 0.39 1 6 . 1 1 0 . 8 20 48 8.00 C o p e p o d s 1 0 0 % 6 4 0 ju M e s h 5 , 040 1 0.12 2 9 . 1 2 5 . 1 25 25 3.02 C o p e p o d s 99+% M i s c . 5 7 1 p M e s h 3 , 1 7 3 1 0.10 3 3 . 9 2 5 . 0 16 13 1.59 C o p e p o d s 99+% M i s c . 3 3 3 p M e s h 3 0 , 9 6 0 0.2 0.02 2 4 . 5 1 5 . 6 1 5 5 23 3.10 C o p e p o d s 2 8 . 8 % C a l y p t o p i s 1.8% e g g s 6 9 . 4 % S T A T I O N B B - 1 0 P.O.G.O. NET 2 6 - V I - 6 6 T I M E : 1 6 2 0 - 1 7 0 7 CORR. S A M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % RNA ug/mg NUMBER m g / m 3 ASH 6 70 mn 6 70 m i n u s P E R nT WET DRY 6 1 5 mp  0-160m T o t a l S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s C a l a n u s p l u m c h r u s V E u p h a u s i a p a c i f i c a - a d u l t s O t h e r A m p h i p o d s O r c h o m e n e l l a s p . R e s i d u e S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 p M e s h C o p e p o d s 1 0 0 0 u M e s h C o p e p o d s F i s h e g g s M i s c . d e c a p o d 6 4 0 p M e s h C o p e p o d s 5 7 1 jx M e s h C o p e p o d s C a l y p t o p i s 3 3 3 p. M e s h C o p e p o d s C a l y p t o p i s E g g s 3 7 , 5 4 7 1 4 4 1 , 3 0 6 18 3 4 2 59 1 , 3 0 6 1 0 0 % 2 , 7 1 2 8 5 . 6 % 1 3 . 8 % 0.6% 1 , 7 7 3 1 0 0 % 2 , 6 2 0 8 0 . 3% 1 9 . 7% 7 4 5 7 4 12 69 14 4 2 1 0.4 2 8 , 4 8 4 0.2 3 3 . 1 % 2. 7% 6 4 . 2% 0.14 0 . 9 3 0. 85 0.86 2.16 0.85 0. 34 0.19 0. 06 0.02 5.9 1 8 . 1 1 7 . 3 1 4 . 5 4 5 . 1 3 2 . 0 1 4 . 5 3 2 . 6 3 2 . 8 3 3 . 1 1 8 . 8 1 3 . 9 1 2 . 2 8.4 2 4 . 9 1 8 . 9 8.4 2 2 . 0 1 7 . 2 1 9 . 5 1 4 . 3 13 1 11 0.2 3 0.5 11 23 15 22 238 10 9 47 1 1 1 1 6 47 44 16 35 1.8 1.1 9.2 2.4 1.3 9.2 7.6 2.8 1.3 3.5 S T A T I O N B B - 1 1 P.O.G.O. NET 2 8 - V I - 6 6 T I M E : 0 9 1 1 - 0 9 5 6 CORR. SA M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % RNA pg/mg NUMBER. A S H 6 70 mp 6 70 m i n u s P E R m* 6 1 5 mp  mg/m*5 WET DRY 0-160m-.! T o t a l 51 , 274, 0.5 0.04 1 1 . 5 1 7 . 9 1 3 . 5 42 7 205 1 5 . 89 S o r t e d F r a c t i o n C h a e t o g n a t h 40 4 C a l a n u s p l u m c h r u s V 1,000 3 E u p h a u s i a p a c i f i c a 59 58 O t h e r A m p h i p o d s 664 3 O r c h o m e n e l l a s p . 40 3 15 4 11 -15 Q -O 3 _ R e s i d u e 60 10 S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 u M e s h 1,252 3 C o p e p o d s 1 0 0 % 1 0 0 0 p M e s h 1 , 5 8 6 1 C o p e p o d s 9 4 . 1 % E u p h a u s i i d s 5.91 6 4 0 p M e s h 2 , 5 8 5 0 C o p e p o d s 8 5 . 6 % C a l y p t o p i s - F u r c i l i a 1 0 . 4 % 5 7 1 p M e s h 4 , 4 4 2 0 C o p e p o d s 8 1 . 0% C a l y p t o p i s 1 8 . 9% 3 3 3 p M e s h 4 0 , 5 4 4 0 C o p e p o d s 4 7 . 8 % C a l y p t o p i s 4 . 5 % E g g s 4 7 . 6 % .8 .2 .1 0. 60 0.8 2 9.93 0.40 0. 35 1. 65. 2.41 3.61 4.41 6. 60 1.82 0.43 0.17 0.11 0.03 0. 01 2 7.9 6.0 3 9 . 4 1 7 . 6 3 4 3 . 0 6 2 . 4 4 7 . 2 2 3 . 1 3 3 . 5 6.1 6 0 . 1 6.0 1 8 . 7 2 8 . 4 2 4 . 0 4 2 . 7 2 1 . 5 2.9 3 0 . 0 1 4 . 0 9 6 . 6 1 1 . 8 1 5 . 1 5.5 8.0 1.8 2 4 5 . 2 2.9 1 5 . 9 2 2 . 1 1 9 . 1 2 3 . 3 0.3 1 0. 20 8 25 6. 83 0.5 28 4.88 6 18 2. 21 0.02 - . 0. 01 0. 03 - 0.05 0.1 - 0.22 0.1 - 0.43 0.1 - 0. 31 0.02 - 0 . 1 3 0. 5 5 0 . 9 1 10 1 3 22 37 338 34 19 18 26 4.49 2. 24 2.37 1.00 2. 57 S T A T I O N B B - 1 2 L . C . B . •39-:VI-66 T I M E : 1 0 4 1 - 1 0 5 4 C O R R . D E P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET D R Y R N A u g / m g N U M B E R A S H 6 70 mu 6 70 m i n u s P E R m WET m g / m ' D R Y 0 - 1 0 m T o t a l 1 5 9 , 1 9 7 e 0 . 06 0 . 0 0 2 1 3 . 6 2 5 . 6 1 8 . 6 5 0 5 2 3 1 3 S o r t e d G r o u p s E u p h a u s i a p a c i f i c a C a l y p t o p i s I I 3 9 9 - 0 . 0 5 5 9 . 7 4 2 . 3 1 3 -C a l y p t o p i s I I I 2 0 6 - 0 . 0 7 9 4 . 6 4 9 . 2 6 -F u r c i l i a I 78 - 0 . 09 1 2 7 . 6 8 4 . 8 2 -- F u r c i l i a I I 1 6 0 - 0 . 09 1 1 3 . 1 6 9 . 2 5 -S i z e A n a l y s i s 1 0 0 0 u M e s h 92 1 7 2 . 0 3 4 2 . 4 2 5 . 8 3 4 9 D e c a p o d l a r v a e 100% A l g a e 6 4 0 ja M e s h 7 , 6 1 0 0 . 3 0 . 0 4 6 1 . 1 4 8 . 6 2 4 1 80 C a l y p t o p i s I 3 . 0 % C a l y p t o p i s I I 1 2 . 6 % C a l y p t o p i s I I I 3 5 . 0% F u r c i l i a I 7 . 2 % F u r c i l i a I I 1 6 . 9 % F u r c i l i a I I I 1 . 3 % C o p e p o d s 2 4 . 0 % 3 0 0 j i M e s h 1 5 1 , 4 9 5 0 . 04 0 . 0 1 1 2 . 3 1 0 . 0 4 , 8 0 9 1 8 3 C a l y p t o p i s I 0 . 8 % C a l y p t o p i s I I 0 . 8% C o p e p o d s 7 . 9 % e g g s 9 0 . 5 % 1 1 . 6 7 0 . 6 5 0 . 4 6 0 . 2 2 0 . 4 4 5 . 9 3 1 0 . 1 5 2 2 . 1 2 T I M E : 0 9 5 2 - 1 0 2 8 1 0 - 2 3 m T o t a l 1 8 , 5 3 8 0 . 2 0 . 0 2 2 4 . 4 4 4 . 3 2 7 . 0 3 7 8 87 6 . 8 0 STATION BB-12 L . C . B. 30-VI-66 TIME: 0952-1028 CORR. SAMPLE COMP mg/INDIVIDUAL . % RNA ug/mg NUMBER mg/m3 DEPTH DESCRIPTION WET DRY ASH 6 70 mu 6 70 minus PER m5 WET DRY 615 m 10-23m Size A n a l y s i s (cont'd) 1000 u Mesh 34 7 1.00 38.8 17.1 1 5 0.70 Decapods 60% Amphipods § Algae 40% 640 p Mesh 3,290 0.5 0.07 19.0 16.9 67 36 4.76 Calyptopis 8.0% F u r c i l i a 22.8% Copepods 42.9% Amphipods 20.2% 300 u Mesh 15,214 0.1 0.01 48.2 18.7 310 34 3.72 Calyptopis 2.1% Copepods 70.9% Amphipods 8.1% eggs 18.9% 23-33m T o t a l 23,208 0.2 0.03 13.5 38.7 25.2 464 130 14.37 Size A n a l y s i s 1000 p Mesh 378 3 0.39 35.4 15.2 8 23 2.96 Chaetognaths 15.6% Copepods 43.7% Amphipods 2 5.7 % Decapods § Euphausiids 15.0% 640 p Mesh 3,564 0.4 0.06 41.9 16.0 71 33 4.06 Copepods 50.7% Amphipods 35.9% F u r c i l i a 13.4% 300 |U Mesh 19, 266 0. 1 0.01 86.8 52.8 385 38 3.85 Copepods 77.3% Amphipods 2.7% eggs 20.0% S T A T I O N B B - 1 3 P.O.G.O. NET 2 - V I I - 6 6 T I M E : 1 3 4 5 - 1 4 3 0 CORR. S A M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY NUMBER. A S H RNA pg/mg 670 mp 6 7 0 m i n u s PER m" mg/m^ WET DRY 6 1 5 mi T o t a l 3 7 , 5 2 5 e 0.6 0. ,09 1 0 . 3 8. ,9 5. o 3 1 3 1 8 8 27. , 20 S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s 2 9 . 3 4 0. , 33 1 3 . ,9 1 1 . ,4 0. , 2 1 0. ,07 C a l a n u s p l u m c h r u s V 3,08 0 - - - 26 -E u p h a u s i a p a c i f i c a - a d u l t s 15 49 10. , 50 9. , 3 5. , 3 0. ,1 5 1. ,05 F u r c i l i a 1 5 5 1 0. ,14 26. , 8 24. , 5 1 1 0. , 18 O t h e r A m p h i p o d s 288 3 0. . 54 8. , 9 4. , 2 2 8 1. , 30 O r c h o m e n e l l a s p . 5 - 0. ,61 - 0. , 04 - 0. , 02 5 - 1. ,16 - 0. , 04 - 0. ,05 16 - 2. ,68 2 1 . , 5 2. ,4 0. ,1 - 0. ,27 53 - 3, , 53 22. ,1 3. , 0 0. ,4 - 1. ,41 21 - 4, ,17 22. , 3 16 . , 2 0. , 2 - 0. ,83 5 - 6, , 04 31 . , 2 1. , 68 0. ,04 - 0. , 24 5 - 10. ,99 • 25. , 6 6. , 6 0. ,04 - 0. , 44 R e s i d u e 78 6 0. , 91 46. , 5 4 0 . , 8 0. , 6 4 0. , 59 0-160m S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 p M e s h 1 0 0 0 p. M e s h 6 4 0 p M e s h C a l y p t o p i s F u r c i l i a C o p e p o d s 300 p M e s h C o p e p o d s C a l y p t o p i s F u r c i l i a e g g s 4 , 7 6 5 2, 548 1 4 . 6 % 2 0 . 9 % 6 4 . 5 % 2 9 , 6 1 5 5 8 . 3 % 5.0% 0.4% 3 6 . 3% N o t h i n g r e t a i n e d b y M e s h 1 0.05 3 2 . 2 0.1 0.02 1 3 . 5 2 7.0 1 1 . 0 40 21 2 47 1 1 24 1.02 3. 70 S T A T I O N B B - 1 4 L . C . B. 4 - V I I - 6 6 T I M E : 0 9 1 5 - 0 9 3 0 CORR. D E P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % A S H RNA 6 70 mu Ug/mg 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mu NUMBER PE R m 3 mg/m 3 WET DRY 0 - 11m T o t a l 6 1 , 3 6 8 e 0.2 0. 01 1 5 . 1 2 1 . 0 1 9 . 2 2 3 2 4 390 2 3 . 2 5 S o r t e d G r o u p s E u p h a u s i a p a c i f i c a C a l y p t o p i s I 4 3 2 0. 06 0.0058 2 9 . 6 2 1 . 7 16 1. 01 C a l y p t o p i s I I 2 1 3 0.1 o . o n 4 3 . 6 1 8 . 9 8 1.09 C a l y p t o p i s I I I 256 0.2 0 . 0 2 3 4 9 . 6 3 8 . 6 10 1.54 F u r c i l i a I 1 0 4 0.2 0. 044 2 6 8 . 7 .217.0 4 0. 86 F u r c i l i a I I 1 2 3 0.4 0. 0 6 1 1 0 3 . 8 8 7 . 2 5 1. 88 F u r c i l i a I I I + 96 0.6 0. D-9B 2 3 . 4 2 2 . 5 4 2.08 S i z e F r a c t i o n 1 0 0 0 u M e s h C a l y p t o p i s I I I F u r c i l i a I F u r c i l i a I I F u r c i l i a I I I + C o p e p o d s O t h e r A m p h i p o d s 6 4 0 p M e s h C a l y p t o p i s I I I F u r c i l i a I O t h e r A m p h i p o d s C o p e p o d s 5 7 1 p M e s h C a l y p t o p i s I C a l y p t o p i s I I C a l y p t o p i s I I I F u r c i l i a I O t h e r A m p h i p o d s C o p e p o d s 4,018 1 6 . 3% 3 5 . 8% 9.3% 1 0 . 7% 24. 6% 3.2% 1 3 , 2 4 3 6 7 . 2 % 2 6 . 9 % 3.0% 3. 0% 5,4 9 5 2 6 . 2 % 33, 1 1 , 4, 6, 18, 0% 2% 4% 8% 0% 0.6 0.3 0.2 0.07 0.04 0.02 2 3 . 3 2 0 . 1 5 0 . 2 1 9 . 6 1 8 . 2 4 1 . 4 1 5 2 98 5 0 1 1 3 3 208 34 1 0 . 9 6 1 9 . 06 3.95 to S T A T I O N B B - 1 4 L. C. B. 4 - V I I - 6 6 T I M E : 0 9 1 5 - 0 9 3 0 CORR. D E P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY NUMBER % RNA pg/mg A S H 6 7 0 mp 6 7 0 m i n u s P E R m5  6 1 5 mp  mg/m WET DRY 0 - l l m 3 0 0 p M e s h C a l y p t o p i s I C a l y p t o p i s I I O t h e r A m p h i p o d s C o p e p o d s e g g s l l - 2 3 m T o t a l 3 8 , 6 8 8 2 1 . 7% 4 . 3 % 2 . 9 % 1 8 . 8 % 5 2 . 2 % 2 3 , 758, 0.03 0. 0 0 5 4 4 . 5 0.3 0. 09 8.6 2 5 . 8 3 9 . 7 2 7.3 1 4 6 6 50 6. 74 T I M E : 0 9 3 8 - 0 9 5 3 591 1 8 9 5 2 . 01 S i z e A n a l y s i s 1 0 0 0 p M e s h 2 ,074 C a l y p t o p i s I I I 2. 7% F u r c i l i a I 5 0 . 4% F u r c i l i a I I 2 3 . 4% F u r c i l i a I I I 1 L . 7% O t h e r A m p h i p o d s 5. 4% C o p e p o d s 5. 4% C h a e t o g n a t h s 1. 0% 640 u M e s h 6, 9 6 2 C a l y p t o p i s I I I 1 6 . 1% F u r c i l i a I 2 2 . 2% C o p e p o d s 4 8 . 2% A m p h i p o d s 1 3 . 4% 5 7 1 u M e s h 7, 2 4 3 C a l y p t o p i s I 0. 8% C a l y p t o p i s I I 7, 7% C a l y p t o p i s I I I 3. 4% F u r c i l i a I 1 0 . 3% F u r c i l i a I I 0. 8% C o p e p o d s 7 0 . 4% A m p h i p o d s 6. 7% 1.2 0.16 4 1 . 8 0.1 0.04 5 1 . 8 0.2 0.02 5 0 . 1 4 0 . 3 52 6 3 8.46 34 . 7 1 7 3 19 6.06 4 2 . 3 1 8 0 30 3.60 S T A T I O N B B - 1 4 L . C . B . 4 - V I I - 6 6 T I M E : 0 9 3 8 - 0 9 5 3 CORR. SA M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L % RNA ug/mg NUMBER m g / m 3 WET DRY A S H 6 70 mp 6 70 m i n u s P E R m5 WET DRY 6 1 5 mp  11-23m 300 u M e s h 1 8 , 9 5 2 O t h e r A m p h i p o d s 3.4% C o p e p o d s 7.9% e g g s 8 8 . 6 % 0.09 0.009 3 6 . 1 1 3 . 5 222 21 2.05 T I M E : 0 8 5 3 - 0 9 0 5 23-33m T o t a l S i z e A n a l y s i s 1 0 0 0 p M e s h 6 4 0 p M e s h C a l y p t o p i s I I I F u r c i l i a I F u r c i l i a I I C o p e p o d s A m p h i p o d s 57 1 p M e s h C a l y p t o p i s I I F u r c i l i a I C o p e p o d s A m p h i p o d s 300 p M e s h C o p e p o d s A m p h i p o d s e g g s 2 7,360 4 , 8 5 0 7. 29, 5, 14, 4 3 , 7% 5% 0% 2% 6% 3,677 6.6% 8.6% 7 1 . 1 % 1 3 . 7% 1 2 , 3 4 0 7 1 . 2% 2.0% 2 6 . 7% 0.3 0.1 0.3 0.2 0. 02 0. 06 1 7 . 9 4 0 . 9 3 8 . 1 3 2 . 1 3 7 . 2 1 8 . 6 2 7.6 27 . 7 2 7.5 3 1 . 4 639 1 1 3 179 2 7 86 10 2 8 8 210 1 7 . 9 0 4.27 2.83 1. 55 1 8 . 1 6 S T A T I O N B B - 1 5 P.O.G.O. NET 6 - V I I - 6 6 T I M E : 1 5 0 6 - 1 6 6 3 CORR. S A M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % RNA ug/mg A S H 6 7 0 mp 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp NUMBER P E R m : mg/m WET DRY 0-160m T o t a l S o r t e d G r o u p s C h a e t o g n a t h s C a l a n u s p l u m c h r u s V E u p h a u s i a p a c i f i c a A d u l t s F u r c i l i a O t h e r A m p h i p o d s O r c h o m e n e l l a s p . R e s i d u e S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 p M e s h C o p e p o d s 1 0 0 0 p M e s h C o p e p o d s F u r c i l i a 6 4 0 p M e s h C a l y p t o p i s F u r c i l i a C o p e p o d s S i z e A n a l y s i s 5 7 1 p M e s h C a l y p t o p i s F u r c i l i a C o p e p o d s 8 5 , 1 2 2 e 0.3 80 ,544 1 3 330 930 1 0 6 13 16 37 32 5 ,'64 4 , 0 0 0 1 0 0 1 1 , 7 4 1 2% 8% 48, 5 1 , 3 , 8 08 2 6 . 2 1 2 7.9% 4 5 . 91 2 , 3 7 0 6. 7% 1 0 . 6 % 8 2 . 7% 2 3 40 1 4 11 0. 8 3 0.4 0.05 4.7 5 9 . 2 0. 20 8.48 0.11 0. 70 0. 72 2.53 3, 4, 51 76 6. 25 0. 79 0.19 0.07 4 9 . 8 7.3 3 0 . 0 1 5 . 0 3 2 . 1 4 3 , 32, 29, 27, 28, 2 5 . 0 0.13 2.8 2 8 . 1 2 8 . 7 3 7 . 6 5 5 . 5 26 . 9 4.3 23, 4, 30, 9, 2, 4.8 3.0 1.8 24 . 2 2 6 . 5 2 6 . 5 3 8 . 1 709 0.7 1 3 0, 3 8 0, 0, 0, 0, 0, 9 1 1 3 3 0. 04 0.5 33 14 32 20 220 1 36 28 11 2 28 44 4 1 3 6 . 89 0.14 0. 85 0. 30 5.47 0.07 0. 25 1. 05 1. 43 0.25 0.40 4. 33 6.02 1.44 S T A T I O N B B - 1 5 P.O.G.O. NET 6 - V I I - 6 6 T I M E : 1 5 0 6 - 1 6 6 3 CORR. D E P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L % WET RNA ug/mg NUMBER m g / m 3 DRY A S H 6 70 mu 6 70 m i n u s P E R nT WET DRY 6 1 5 mu \ 0-160m 300 p M e s h ( C o n t ' d ) C a l y p t o p i s C o p e p o d s e g g s 7 1 , 6 8 0 1 0 . 9 1 3 7 . 5 % 5 1 . 6 % 0.2 0.02 6 2 . 6 5 2 . 4 597 1 1 9 1 4 . 34 S T A T I O N B B - 1 6 L. C . B. 8 - V I I - 6 6 T I M E : 0 8 2 9 - 0 8 5 6 0-10m T o t a l 1 1 9 , 7 6 0 0.3 0.03 1 6 . 1 1 2 . 0 1 2 . 0 2 1 5 4 6 6 8 6 4 . 62 C a l y p t o p i s I 5 C a l y p t o p i s I I 3 C a l y p t o p i s I I I 5 F u r c i l i a I 10 F u r c i l i a I I 7 F u r c i l i a I I I + 5 A m p h i p o d s 1 C o p e p o d s 57 e g g s 4 1% 3% 1% 3% 5% 1% 9% 5% 2% S i z e F r a c t i o n A n a l y s i s 1 0 0 0 u 6 4 0 u 300 p 3 6 . 3 4 1 . 0 54. 0 34. 5 4 1 . 8 4 2 . 2 3 8 1 140 1 1 9 5 8 . 29 2 1 . 4 8 1 6 . 0 4 T I M E : 0 8 0 4 - 0 8 1 9 1 0 - 2 3 m T o t a l 8 2 , 9 1 7 e 0.5 0.02 5.7 2 8 . 2 2 7 . 1 1 4 7 0 6 7 6 3 0 . 8 7 S T A T I O N B B - 1 6 L . C . B. 8 - V I I - 6 6 T I M E : 0 8 0 4 - 0 8 1 9 CORR. D E P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY NUMBER 3 m g / n r % RNA Ug/mg AS H 6 70 mu 6 70 m i n u s P E R m° WET DRY ' 6 1 5 mu 10 - 2 3 m S i z e A n a l y s i s ( C o n f d) 2 3 - 3 3m 1 0 0 0 u M e s h 1 8 , 0 6 9 - 0. 12 F u r c i l i a I 0% F u r c i l i a I I 4 1 . 3% F u r c i l i a I I I 3 5 . 91 A m p h i p o d s 2. 7% C o p e p o d s 2 0 . 1 % 6 4 0 u M e s h 1 4 , 4 4 8 0. 7 0. 08 C a l y p t o p i s I 0.8% C a l y p t o p i s I I 1.8% C a l y p t o p i s I I I 4.4% F u r c i l i a I 5.9% F u r c i l i a I I 2 0 . 7% F u r c i l i a I I I 7.0% A m p h i p o d s 1 0 . 3% C o p e p o d s 4 9 . 1 % 300 u M e s h 5 0 , 4 0 0 0. 1 0. 0 1 C a l y p t o p i s I I 1.0% A m p h i p o d s 3.3% C o p e p o d s 24. 4% e g g s 7 1 . 3% T o t a l 5 0 , 7 6 8 e 0. 3 0. 03 S i z e F r a c t i o n A n a l y s i s 1 0 0 0 u M e s h 1 5 , 6 6 2 0. 6 0. 08 F u r c i l i a I 1.3% F u r c i l i a I I 9.4% F u r c i l i a I I I 4.7% A m p h i p o d s 5.5% C o p e p o d s 7 9 . 1 % 9.8 5 2 . 6 4 7 . 9 320 3 8 . 45 7.3 5 0 . 7 4 1 . 4 256 1 6 9 2 1 . 2 6 3 5 . 5 3 6 . 3 894 89 1 1 . 6 2 T I M E : 0 7 3 8 - 0 7 5 0 7.2 3 0 . 9 3 1 . 4 2 8 . 5 2 7 . 6 1 0 4 9 324 3 5 6 2 0 4 3 5 . 66 2 4 . 2 7 S T A T I O N B B - 1 6 L . C . B . 8 - V I I - 6 6 T I M E : 0 7 3 8 - 0 7 5 0 GORR. DE P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY * RNA pg/mg NUMBER m g / m 3 A S H 6 7 0 mu 6 70 m i n u s P E R nT WET DRY • 6 1 5 mp  23 - 3 3 m 6 4 0 p M e s h ( C o n t ' d ) C a l y p t o p i s I I I F u r c i l i a I F u r c i l i a I I F u r c i l i a I I I A m p h i p o d s C o p e p o d s 7,339 2.7% 1 6 . 3% 3 0 . 81 7.21 2.7% 4 0 . 3% 0.6 0. 09 5.7 2 2 . 6 1 9 . 2 1 5 2 86 1 3 . 1 9 300 p M e s h C a l y p t o p i s I C a l y p t o p i s I I C o p e p o d s e g g s S T A T I O N B B - 1 7 P.O.G.O. NET 2 7,76 7 2 2 83 12 0% 0% .9% 1% 0.1 0. 02 l l - V I I - 6 6 4 0 . 0 4 3 . 0 5 74 63 T I M E : 0 9 5 5 - 1 0 4 3 9. 75 0-160m T o t a l 6 7 , 0 4 8 e 0. 7 0. 11 7.8 1 1 . 9 9. 6 559 4 0 8 6 3 . 26 S o r t e d G r o u p s 11 C h a e t o g n a t h s 40 4 0. 35 9. 0 6. 7 0. 3 1 0. C a l a n u s p l u m c h r u s V 229 - • 0. 77 9. 8 6. 6 2 - 1. 46 E u p h a u s i a p a c i f i c a 4 06 A d u l t s 1 50 7. 39 1 2 . 1 40-. .2 2 8 . 6 0. 1 0. 0. F u r c i l i a I I 40 0. 4 0. 05 1 2 . 0 9. 8 0. 3 0. 1 0. 02 F u r c i l i a I I I + 1 3 3 0. 4 0. 08 9. 0 8. 1 1 0. 5 0. 09 O t h e r A m p h i p o d s 3 7 4 10 0. 78 1 5 . 9 1 3 . 9 1 2 . 4 3 31 2. 42 O r c h o m e n e l l a s p . 61 14 - - . - - 0. 5 7 -5 - 0. 37 - •5 7. 0 6. 0 0. 04 - 0. 02 8 - 0. 72 - 1 7 . 5 0. 07 - - 0. 05 3 - 1. 26 - 1 9 . 2 0. 02 - 0. 0 3 S T A T I O N BB-1'7 P.O.G.O. NET l l - V I I - 6 6 T I M E : 0 9 5 5 - 1 0 4 3 CORR. SA M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L % WET DRY A S H RNA 670 mp NUMBER 670 m i n u s P E R m 3 .615 mp mg/m WET DRY 0-160m ( C o n t ' d ) O r c h o m e n e l l a s p , R e s i d u e 17 17 4 169 2. 51 3.45 4.63 6.63 0. 51 1 8 . 3 1 5 . 2 6.9 1 2 . 4 8. 5 2 1 . 8 1.3 2 9 . 3 0.07 0.1 0.1 0.03 1 0.16 0.48 0.65 0. 22 0. 71 S i z e F r a c t i o n 1 5 0 0 p M e s h 288 C a l a n u s p l u m c h r u s V 6 1 . 1 % C a l a n u s s p , 1 0 0 0 p M e s h C o p e p o d s F u r c i l i a A m p h i p o d s 6 4 0 p M e s h C o p e p o d s F u r c i l i a I I I + 5 71 p M e s h F u r c i l i a I - I I C a l y p t o p i s I I I C o p e p o d s 3 00 p M e s h C o p e p o d s M i s c . 3 8 . 9% 4,6 1 0 6 7 . 5 % 2 8 . 3 % 3.9% 4 , 6 8 1 5 7.2% 4 2 . 8% 2,462 1 1 . 6 % 6.4% 8 2 . 0 % 5 4 , 1 7 6 99 + % 0.6 0.4 0.48 0.10 0.05 0.03 5.9 9.8 0.34 8.9 2 8 . 9 4.0 5 0 . 2 4.7 3 3 . 1 3.0 2 7 . 4 6.6 28 . 8 5 0 . 1 3 3 . 9 2 3 . 9 38 39 2 0 . 5 4 5 1 . 5 94 24 1.15 1 3 . 0 6 3. 82 8.20 0.94 1 4 . 4 5 STATION BB-18 L . C . B. 1 3 - V I I - 6 6 TIME: 1043-1052 CORR. DEPTH SAMPLE DESCRIPTION COMP mg/INDIVIDUAL % RNA Ug/mg N ^ B E R 3 „ „ m g / m * WET DRY ASH 6 70 mu 6 70 minus PER m J WET 615 mu DRY Tota l 53,705 e 0. 3 0. 05 13.2 37.5 38. 8 1668 534 Size Analys is 1500 u Mesh Whole sample l , 7 7 5 e 3 0. 50 41. 9 <37. 6 55 185 E. p a c i f i c a Adults 19 ... • 7, 78 30 . 4 24. 6 0.6 Cyrtopia 1mm 3 - 1. 66 29. 9 22. 3 0.09 -F u r c i l i a 960 - 1. 5 2 60.0 55. 0 30 -Residue 794 1 0. 22 13.9 13. 5 25 29 Chaetognaths 15.4% Copepods Amphipods 45.6% 39.0% 1000 u Mesh 2,698 1 0. 20 22.3 24. 2 83 109 F u r c i l i a 51. 8% 0. 7 0. 14 48.2 24. 2 43 32 Copepods 48.2% 640 u Mesh 18,992 0. 1 - 15.5 12. 4 590 65 F u r c i l i a 1.2% 1 0. 19 12.5 9. 5 7.1 10 Copepods Amphipods 98. 3% 0.5% 300 u Mesh Copepods eggs 30,240 0. 1 - 46.4 46. 2 939 188 98.4% 1.6% BB-18 13 -VII - 66 TIME: 1013-1039 27. 56 4. 59 0.15 45. 32 5.42 16. 76 6.08 1. 34 L. C . B. 30-53m Tota l 22,465 e . 0.5 0.01 9.6 36.8 30.8 294 135 4.12 S T A T I O N B B - 1 8 1 3 - V I I - 6 6 T I M E : 1 0 1 3 ' - 1 0 3 9 L. C . B. CORR. SAM P L E COMP m g / I N D I V I D U A L % RNA Ug/mg NUMBER m g/m 3 D E P T H D E S C R I P T I O N WET DRY A S H 670 mu 6 70 m i n u s P E R m ° WET DRY / 6 1 5 mp 3 0 - 5 3m S i z e A n a l y s i s ( C o n t ' d ) 1 5 0 0 u M e s h E u p h a u s i a p a c i f i c a A d u l t 2 39 7. 04 - - - 0.03 1 0. 18 F u r c i l i a 1 1 8 0. 7 0.13 2 4 . 1 2 0 . 7 2 1 0. 20 R e s i d u e 2 97 3 0. 40 2 6 . 5 2 5 . 0 4 12 1. 56 C h a e t o g n a t h s 1 0 . 5% C o p e p o d s . 6 5 . 0% A m p h i p o d s 2 3 . 8 % D e c a p o d s t a g e s 0. 7% 1 0 0 0 p M e s h W h o l e s a m p l e 1,760 0. 7 0.07 2 2 . 3 2 1 . 6 2 3 . 0 16 1.57 E. p a c i f i c a F u r c i l i a 7 24 0.6 0. 08 54 . 9 4 7 . 6 10 4 0.48 R e s i d u e 1 , 038 0.4 0.09 1 9 . 1 1 7 . 3 14 5 1. 20 C h a e t o g n a t h s 1 5 . 4 % C o p e p o d s 5 5 . 6 % A m p h i p o d s 2 9 . 0% 640 p M e s h W h o l e s a m p l e 6 2 8 0.3 0. 02 24. 3 2 2 . 6 8 3 0.14 E. p a c i f i c a -3 8 . 8 0.13 C a l y p t o p i s - F u r c i l i a 2 9 1 0.6 0.04 4 5 . 1 4 2 R e s i d u e 3 37 0.8 0.19 2 3 . 4 1 9 . 3 4 4 0. 84 C o p e p o d s 8 4 . 8% A m p h i p o d s 1 5 . 2% 300 p M e s h 1 7 , 2 7 0 0.03 0.004 3 5 . 6 3 1 . 7 2 2 6 7 0.81 C o p e p o d s A m p h i p o d s 9 9 . 2% 0.8% S T A T I O N B B - 1 8 L . C. B. 1 3 - V I I - 6 6 T I M E : 0 9 4 7 - 0 9 5 9 CORR. D E P T H S A M P L E D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY % RNA AS H 6 7 0 mp pg/mg 6 7 0 m i n u s 6 1 5 mp NUMBER P E R m 3 WET 53-88m T o t a l 10 , 3 5 3 Q 0.2 0. 02 7.6 2 0 . 2 2 1 . 6 1 8 1 33 S o r t e d G r o u p s E u p h a u s i a p a c i f i c a F u r c i l i a ( f r o m 1 5 0 0 p ) 28 ** F u r c i l i a ( 1 0 0 0 u m e s h ) 21 0.4 0.2 0. 06 0.04 7 8 . 7 5 9 . 3 54.4 4 3 . 3 0.5 0.4 0 0 S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 u M e s h C o p e p o d s A m p h i p o d s D e c a p o d l a r v a e 216 5 9 . 9% 2 4 . 1 % 1 6 . 0 % 2 0.25 2 1 . 9 1 9 . 2 4 7 1 0 0 0 u M e s h C o p e p o d s A m p h i p o d s D e c a p o d l a r v a e 292 8 1 . 3% 1 8 . 3 % 0.4% 0.4 0.18 4 6 . 2 3 7 . 5 5 2 64 0 p M e s h C o p e p o d s A m p h i p o d s 930 9.4% 9 0 . 6 % 0.1 0.01 5 5 . 3 4 9 . 1 16 2 30 0 p M e s h C o p e p o d s A m p h i p o d s 8 ,866 8 4 . 2% 1 5 . 8 % 0.2 0. 009 2 8 . 8 28. 0 1 5 5 23 mg/m 3  5 DRY 4. 35 0.03 0.94 0.38 0.23 1. 35 A l l F u r c i l i a s t a g e s p r e s e n t r e t a i n e d b y t h e f i l t e r a s i n d i c a t e d , S T A T I O N B B - 1 9 L . C . B. 1 8 - V I I - 6 6 T I M E : 1 0 1 7 - 1 0 2 6 CORR. S A M P L E COMP m g / I N D I V I D U A L % RNA Ug/mg NUMBER mg/m 3 D E P T H D E S C R I P T I O N WET DRY A S H 670 mu 6 7 0 m i n u s P E R nT WET DRY 6 1 5 mu 59-89m T o t a l 8 , 0 8 6 e 0. 7 0. 07 1 0 . 6 3 3 . 6 3 3 . 9 272 1 3 3 1 9 . 87 S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 p M e s h W h o l e S a m p l e 8 0 8 e 1 0. 14 4 6 . 0 2 1 . 0 2 7 32 3. 80 E u p h a u s i a p a c i f i c a 14 2. 39 A d u l t 8 52 8. 88 2 3 . 9 1 8 . 9 0.3 F u r c i l i a 4 3 2 - 0. 19 2 5 . 5 2 3 . 0 14 - 2. 76 R e s i d u e 368 4 0. 60 3 0 . 9 22 . 7 12 52 . 7.43 C h a e t o g n a t h s 2 1 . 7% C o p e p o d s 2 9 . 4 % A m p h i p o d s 4 8 . 9 % 1 0 0 0 p M e s h W h o l e S a m p l e 7 3 8 e 1 0. 16 4 0 . 9 3 6 . 9 25 24 3.97 E u p h a u s i a p a c i f i c a 1 1 1.17 F u r c i l i a 3 48 0. 7 0. 10 5 3 . 3 3 9 . 2 8 R e s i d u e 400 1 0. 16 5 4 . 2 4 0 . 7 47 13 2.15 A m p h i p o d s 1 0 % C o p e p o d s 9 0 % 6 4 0 p M e s h W h o l e S a m p l e l , 3 6 0 e 0. 5 0. 07 3 1 . 8 2 9 . 6 45 24 3.09 E u p h a u s i a p a c i f i c a 0.53 F u r c i l i a ' 1 6 8 0. 6 0. 09 6 9 . 3 5 5 . 4 6 3 R e s i d u e 1,192 0. 4 0. 05 3 1 . 6 28. 2 40 16 1.92 C o p e p o d s 9 8 . 3% A m p h i p o d s 1.7% 300 u M e s h Cop'epods 5 , 1 8 0 0. 1 0. 01 3 9 . 2 2 6 . 4 1 7 4 24 2.2 7 9 7 . 3 % A m p h i p o d s 2.7% S T A T I O N B B - 1 9 L. C . B. . 1 8 - V I I - 6 6 T I M E : 1 0 3 9 - 1 0 5 7 CORR. S A M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY A S H 670 m RNA ug/mg NUMBER 6 70 m i n u s P E R m 3  6 1 5 mp  mg/m J WET DRY 3 0-59m T o t a l S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 p M e s h E u p h a u s i a p a c i f i c a A d u l t F u r c i l i a R e s i d u e C h a e t o g n a t h s C o p e p o d s A m p h i p o d s D e c a p o d l a r v a e 1 7 , 7 3 7 e 0.6 1 1 8 299 14, 64, 19, 1, 5.0 0.7 0.07 0.62 0.13 3 6 . 6 2 4 . 1 2 6 . 5 3 0 . 8 2 0 , 7 2 5 . 0 296 1 7 1 2 1 . 5 8 1 24 0.26 3.10 1 0 0 0 p M e s h W h o l e S a m p l e 2 , 1 8 3 1 - - - 36 41 -E u p h a u s i a p a c i f i c a F u r c i l i a 724 „ 0.18 3.8 23.4 2 2 . 6 12 _ 2.18 R e s i d u e 1 , 459 2 0.40 4 7 . 8 3 7.3 24 38 9. 72 C o p e p o d s A m p h i p o d s 9 4 . 7% 5 . 3 % 6 4 0 p M e s h W h o l e S a m p l e 6 7 0 1 0.16 4.2 3 8 . 1 3 7 . 5 11 12 1.83 E u p h a u s i a p a c i f i c a F u r c i l i a 292 0. 4 0. 06 6 5 . 7 5 7 . 1 5 2 0. 29 R e s i d u e 3 78 1 0.11 4 2 . 1 4 5 . 1 6 6 0 . 60 C o p e p o d s A m p h i p o d s 8 4 . 7% 1 5 . 3 % 300 p M e s h W h o l e S a m p l e 1 1 , 6 1 4 0. 07 0. 009 3.4 2 0 . 7 2 1 . 1 1 9 4 14 1. 66 F u r c i l i a C o p e p o d s A m p h i p o d s 0 . 3 % 9 7 . 8% 1 . 9 % S T A T I O N B B - 1 9 L . C . B . 1 8 - V I I - 6 6 T I M E : 0 9 5 1 - 1 0 0 2 NUMBER CORR. SA M P L E D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L % WET DRY A S H RNA ug/mg 6 70 mp 6 70 m i n u s 6 1 5 mp P E R m* mg/m WET DRY 8 9 - 1 2 8 m T o t a l S o r t e d G r o u p E u p h a u s i a p a c i f i c a A d u l t s F u r c i l i a R e s i d u e A m p h i p o d s C o p e p o d s M i s c . Few p t e r o p o d s 0-30m T o t a l S i z e A n a l y s i s 1 5 0 0 p M e s h E u p h a u s i a p a c i f i c a F u r c i l i a I I I + R e s i d u e C h a e t o g n a t h s C o p e p o d s A m p h i p o d s D e c a p o d l a r v a e 1 0 0 0 p M e s h W h o l e S a m p l e E u p h a u s i a p a c i f i c a F u r c i l i a R e s i d u e C o p e p o d s A m p h i p o d s 9 , 568. 248 9,312 3.9! 9 6 . 0 i 9 4 , 278, 320 576 1 5 . 5% 6 1 . 1 % 1 7 . 6 % 5.8% 5 , 9 0 1 1,617 4 , 2 8 4 8 7 . 6 % 1 2 . 4 % 87 2 0.3 1 3 0. 38 1 2 . 0 0 0. 20 0.04 6.9 0.44 8.1 1 1 . 8 7.6 2 7 . 3 4 0 . 4 3 7 . 0 1 2 . 1 2.3 2 0 . 5 4 2 . 5 2 9 . 6 217 0.2 6 439 16 8 T I M E : 1 1 0 6 - 1 1 2 4 1 1 3 9 4 7 4 20 8 2 . 8 8 2.18 1.12 342 4 0 . 9 9 3.06 0. 7 0.08 9.5 2 7 . 7 29. 5 71 49 5.92 0.7 0. 09 1 2 . 4 7 1 . 6 6 1 . 8 20 14 1. 81 0.8 0.11 9.6 3 0 . 9 26. 6 52 41 5. 69 S T A T I O N BB.-19 L . C. B. 1 8 - V I I - 6 6 T I M E : 1 1 0 6 - 1 1 2 4 CORR. SAMPLE D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L % WET DRY A S H RNA ug/mg 6 70 mu 6 70 m i n u s 6 1 5 mp. f NUMBER PE R m 3 mg/m-5 WET DRY 0-30m 6 4 0 u M e s h ( C o n t ' d ) W h o l e S a m p l e E u p h a u s i a p a c i f i c a F u r c i l i a -C a l y p t o p i s R e s i d u e C o p e p o d s A m p h i p o d s 300 u M e s h W h o l e S a m p l e A m p h i p o d s C o p e p o d s S T A T I O N BB-2-0 P.O.G.O. NET 1 7 , 4 8 0 0.3 2 , 9 1 3 1 4 , 5 7 6 7 7 . 1 % 2 2 . 9 % 7 0 , 0 0 0 1 3 . 4 % 8 6 . 6% 0.4 0.3 0.04 9.9 0.06 9.7 0.05 7.5 3 1 . 5 4 8 . 0 32 . 9 3 6 . 0 2 1 1 35 1 7 6 59 8.02 15 51 0.1 0.008 1 8 . 8 •15. 6 84 5 1 0 1 2 0 - V I I - 6 6 T I M E : 0 9 0 6 - 0 9 4 0 2.08 4.10 6. 51 8 , 1 7 5 e 3 0. 59 5. 7 6.4 1.5 68 218 4 0 . 1 8 1,597 4 0.89 6.9 9.9 5.1 13 47 1 1 . 84 88 7 0.86 1 1 . 2 10 . 2 6.0 0. 7 5 0. 60 8 53 1 0 . 00 1 3 . 2 1 9 . 4 1 1 . 9 0.1 4 0. 70 18 70 8. 00 1 0 . 2 5 4 . 1 34 . 5 0.2 14 1.60 309 3 0. 54 39 .1 31 . 4 3 9 1.40 9 2 5 - 0. 70 1 9 . 9 1 7 . 8 1 3 . 7 8 - 5. 39 85 13 - - - - 0. 7 4 - • 80 7 1.14 - 1 3 . 0 9.9 0.6 4 0. 68 0-160m T o t a l S o r t e d G r o u p s C a l a n u s p l u m c h r u s V C h a e t o g n a t h s M y s i d s E u p h a u s i a p a c i f i c a A d u l t s F u r c i l i a 11 In-O t h e r A m p h i p o d s O r c h o m e n e l l a s p . R e s i d u e S T A T I O N B B - 2 0 P.O.G.O. NET 2 0 - V I I - 6 6 T I M E : 0 9 0 6 - 0 9 4 0 CORR. SAMPLE D E P T H D E S C R I P T I O N COMP m g / I N D I V I D U A L WET DRY NUMBER 3 % RNA ug/mg mg/m AS H 6 70 mu ' 6 70 m i n u s P E R WET DRY 6 1 5 nya .  0-160m S i z e A n a l y s i s ( C o n t ' d ) 1 5 0 0 u M e s h C o p e p o d s 1 0 0 0 u M e s h E u r c i l i a I I I + C o p e p o d s 5 7 1 u M e s h C o p e p o d s 3 00 u M e s h C o p e p o d s l-2mm e g g s 1 ,597 99 + % 2 ,605 6.9% 9 3 . 1 % 1 , 8 29 1 0 0 % 6 3 2 9 6 . 9 % 3 . 1 % 4 0.89 6.9 9.9 5.1 2 0.34 3.0 2 4 . 6 2 0 . 3 0.3 0.05 1 2 . 9 2 5 . 3 2 1 . 7 0.08 0.01 2.6 2 0 . 0 1 5 . 9 13 22 15 47 1 1 . 8 4 39 7.38 0. 78 0.4 0.06 A d d i t i o n a l s a m p l e s ( u n s o r t e d ) t a k e n w i t h P.O.G.O. n e t , 0-30m S T A T I O N DATE COMP. m g / I N D I V I D U A L % RNA pg/mg NUMBER m g / m WET DRY A S H 6 70 mu 6 70 m i n u s p E R m 3 W E T D R Y ; ' 6 1 5 mp  BB-6 1 7 - V I 3 5 , 8 0 0 0. 2 0. 03 1 2 . 2 3 9 . 1 3 1 . 8 1 1 9 3 298 3 5 . 79 B B - 8 2 1 - V I 1 9 , 1 4 8 0. 02 0. 02 1 3 . 5 2 1 . 4 1 9 . 5 6 3 8 1 0 2 -10. 1 3 B B - 9 2 3 - V I 1 4 , 8 4 0 0. 3 0. 03 9.7 4 4 . 3 3 1 . 7 3 9 6 1 0 7 1 3 . 06 B B - 1 0 2 6 - V I 4 1 , 1 0 4 0. 1 0. 02 - 3 1 . 4 1 6 . 7 18 2 7 219 2 9 . 23 B B - 1 1 2 8 - V I 7 6 , 2 4 8 0. 06 0. 01 6.9 2 5 . 6 2 1 . 2 3 3 8 9 207 3 0 . 16 B B - 1 3 2 - V I I 2 , 128 0. 2 0. 02 1 0 . 1 2 9 . 6 2 7 . 6 1 4 2 23 3. 26 B B - 1 5 6 - V I I 2 5 , 7 5 2 0. 1 0. 02 5.8 5 9 . 0 4 7 . 2 1 7 1 7 2 40 3 9 . 49 B B - 1 7 1 1 - V I I 2 4 , 3 0 4 0. 16 0. 02. 1 0 . 5 1 9 . 6 1 6 . 2 1 0 8 0 1 7 3 1 9 . 44 B B - 2 0 2 0 - V I I 3 5 , 0 9 6 0. 2 0. 02 4.9 1 8 . 3 1.6. 1 1 5 6 0 3 1 3 3 9 . 00 

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